苞叶雪莲有效部位及其制备方法和应用技术

苞叶雪莲有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物技术领域。选自苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、苞叶雪莲正丁醇部位、苞叶雪莲水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。将苞叶雪莲全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液回流提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位和苞叶雪莲正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得苞叶雪莲水相萃取部位。本发明专利技术的苞叶雪莲有效部位在制备抑制HDAC1酶药物方面的应用，能够用于制备抗肿瘤药物。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及苞叶雪莲有效部位及其制备方法和应用，属于植物提取物

技术介绍
苞叶雪莲Saussurea obvallata （DC.）Edgew.为风毛菊属雪莲亚属植物，别称“苞叶风毛菊”，多年生草本，高16~60厘米 [参见：张志耘 . 中国植物志 . 第 78 卷［M］. 北京: 科学出版社，1999: 27.]。其花为蓝紫色，瘦果长圆形，长5毫米，花果期7~9月，生于高山草地、流石滩、溪边石隙处、山坡多石处，海拔3200~4700米。苞叶雪莲是高原地区特有的一种植物，具有独特的药理活性。其性温、微苦,一般全草入药，主治风湿性关节炎，血虚不孕，月经不调等，还具有抗炎镇痛、止血消肿、抗辐射、抗缺氧及抗氧化之功效,使用安全,无明显的不良反应。肿瘤是危害人类健康的重大疾病之一，恶性肿瘤的防治已成为医学界所关注的重要课题。恶性肿瘤就是人们所说的癌症。癌症作为目前人类死亡的首要原因，对其治疗仍局限于癌症疾病的多样性及反复性。然而，尽管不同的癌症的致癌原因可能不尽相同，但其组织观察均表现出相似的细胞周期紊乱以及迅速不可控制的细胞生长及转移。因此，对参与细胞周期调控的一些家族蛋白的研究在推动癌症治疗中成为重要因素。组蛋白去乙酰化酶（HDAC）是一类蛋白酶，对染色体的结构修饰和基因表达调控发挥着重要的作用。一般情况下，组蛋白的乙酰化有利于DNA与组蛋白八聚体的解离，核小体结构松弛，从而使各种转录因子和协同转录因子能与DNA结合位点特异性结合，激活基因的转录。在癌细胞中，HDAC的过度表达导致去乙酰化作用的增强，通过恢复组蛋白正电荷，从而增加DNA与组蛋白之间的引力，使松弛的核小体变得十分紧密，不利于特定基因的表达，包括一些肿瘤抑制基因。组蛋白去乙酰化酶抑制剂（histone deacetylase inhibitors，HDACi）则可通过提高染色质特定区域组蛋白乙酰化，从而调控细胞凋亡及分化相关蛋白的表达和稳定性，诱导细胞凋亡及分化，成为一类新的抗肿瘤药物。HDACi不仅对多种血液系统肿瘤和实体瘤具有良好的治疗作用，而且具有肿瘤细胞相对较高选择性和低毒的优点。申请人在研究中发现：目前抗肿瘤药物的原料较少，特别是用于制备抑制HDAC1酶药物的中药原料较为匮乏。现有技术中主要用于治疗风湿性关节炎，血虚不孕，月经不调等，还具有抗炎镇痛、止血消肿。目前，尚未见到关于苞叶雪莲抑制HDAC1酶的活性方面的研究和应用的报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是：克服现有技术的不足，提供苞叶雪莲有效部位及其制备方法和应用，该苞叶雪莲有效部位能有效抑制HDAC1酶的活性，用于制备抑制HDAC1酶药物，具有较好的抗肿瘤作用。本专利技术解决其技术问题所采用的技术方案是：该苞叶雪莲有效部位，其特征在于：选自苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、苞叶雪莲正丁醇部位、苞叶雪莲水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。该苞叶雪莲有效部位，其特征在于：选自苞叶雪莲石油醚部位，或者，苞叶雪莲石油醚部位和苞叶雪莲水相萃取部位任意质量比的混合物。该苞叶雪莲有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将苞叶雪莲全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位和苞叶雪莲正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得苞叶雪莲水相萃取部位。所述的提取为超声波辅助回流提取；超声波辅助回流提取的具体操作为：将粉碎后的苞叶雪莲全草加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液超声波提取0.5~3小时，过滤，滤渣回流提取1~3次，合并提取液，即得。该苞叶雪莲有效部位的应用，其特征在于：在制备抑制HDAC1酶药物方面的应用。所述制备抑制HDAC1酶药物，是通过苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、苞叶雪莲正丁醇部位和苞叶雪莲水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物，与药用辅料混合制成的口服制剂或注射制剂。所述的注射制剂为脂质体注射剂、纳米粒注射剂或微球注射剂。所述的口服制剂为散剂、片剂、颗粒剂、胶囊剂或溶液剂对于本专利技术的说明如下：现有技术中，苞叶雪莲常规用途为用于治疗风湿性关节炎，血虚不孕，月经不调等，还具有抗炎镇痛、止血消肿，未见其有抗肿瘤功效的相关报道。申请人研究发现：目前抗肿瘤药物的原料较为匮乏，现有技术中苞叶雪莲中的部分提取物还具有抗肿瘤的作用，但是其功效不明显，不能确定其具体的有效部位。因此通过怎样的溶剂、采用怎样制备方法，才能获得抑制HDAC1酶活性效果最好的有效部位，是必须要解决的问题。申请人通过研究发现：采用本专利技术制备方法，筛选出的苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、和苞叶雪莲水相萃取部位，其抑制HDAC1酶效果较好。制备方法中，加入质量百分浓度65%~95%乙醇溶液提取可以为浸提、回流提取或所述的超声波辅助回流提取。优选采用超声波辅助回流提取，该方法具有较高的收率和提取效率。超声波辅助回流提取的具体操作为：超声波提取后，过滤获得超声波提取液和滤渣，向滤渣中加质量百分比浓度65%~95%乙醇水溶液回流提取，合并超声波提取液和回流提取液。进一步的说明，回流提取的具体操作为：向回流加热装置中直接加入粉碎后的药材或加入超声波提取后的滤渣，加入乙醇水溶液，加热提取，放冷过滤得一次提取液和滤渣；再向滤渣中加入乙醇水溶液，加热、进行第二次回流提取，放冷过滤得二次提取液和滤渣（以上为回流提取2次）；合并多次提取液，即得回流提取液。优选的，每次回流提取0.5~2小时；每次回流提取时所加乙醇溶液没过药材表面1cm~2cm。回流提取的温度为乙醇回流提取的常规温度，需高于乙醇的沸点，优选为80℃~100℃。浸膏为粗提取物，采用不同的溶剂萃取浸膏分散液，指的是依次将石油醚加入浸膏分散液萃取分离获得石油醚萃取液、将乙酸乙酯加入浸膏分散液萃取分离获得乙酸乙酯萃取液、将正丁醇加入浸膏分散液萃取分离获得正丁醇萃取液；取石油醚萃取液、乙酸乙酯萃取液和正丁醇萃取液分别挥发去除溶剂后，即对应得到苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位和苞叶雪莲正丁醇部位；将萃取后剩余的浸膏分散液（溶剂为水），挥发去除溶剂即得苞叶雪莲水相萃取部位。溶剂的部位指的是该溶剂的萃取物，水相萃取部位也可以称作水相萃取物，水相萃取部位易溶于水；而相对的，石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位对应易溶于石油醚、乙酸乙酯和正丁醇。其中，苞叶雪莲石油醚部位主要含有甾醇类；苞叶雪莲乙酸乙酯部位主要含有萜类；苞叶雪莲正丁醇部位主要含有酚类化合物；苞叶雪莲水相萃取部位主要含有多糖和有机酸类化合物。挥去溶剂即挥发去除溶剂。挥去溶剂可以采用常压加热使溶剂（即石油醚、乙酸乙酯和正丁醇）挥发。优选的，挥去溶剂采用减压浓缩，该方法效率高，并且能避免热敏性成分因高温丧失药性。优选的，制备的抑制HDAC1酶药物，为口服制剂或注射制剂。口服制剂和注射制剂为最佳给药途径，此处所述口服制剂为经肠胃道给药制剂，优选的，口服制剂为缓释、控释型口服制剂。也可以为非肠胃给药的其他制剂，如呼吸道给药制剂（喷雾剂、气雾剂、粉雾剂）；皮肤本文档来自技高网...

【技术保护点】
苞叶雪莲有效部位，其特征在于：选自苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、苞叶雪莲正丁醇部位、苞叶雪莲水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。

【技术特征摘要】
1.苞叶雪莲有效部位，其特征在于：选自苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位、苞叶雪莲正丁醇部位、苞叶雪莲水相萃取部位中的一种或两种以上的任意质量比的混合物。2.根据权利要求1 所述的苞叶雪莲有效部位，其特征在于：选自苞叶雪莲石油醚部位，或者，苞叶雪莲石油醚部位和苞叶雪莲水相萃取部位任意质量比的混合物。3.权利要求1 所述的苞叶雪莲有效部位的制备方法，其特征在于，包括下述步骤：将苞叶雪莲全草粉碎，加入质量百分比浓度65%~95%乙醇溶液提取，将所得提取液浓缩、干燥，得浸膏；将浸膏加蒸馏水分散，得浸膏分散液，依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇作为溶剂萃取浸膏分散液，挥去溶剂后得苞叶雪莲石油醚部位、苞叶雪莲乙酸乙酯部位和苞叶雪莲正丁醇部位；将萃取后的浸膏分散液浓缩、干燥，得苞叶雪莲水相萃取部位。4.权利要求3 所述的苞叶雪莲有效部位的制备方法，其特征在于：所述的提取...

【专利技术属性】
技术研发人员：芦永昌，吴疆，李海丽，朱奎德，钱帅，白雪，王欢，田静，
申请(专利权)人：青海民族大学，
类型：发明
国别省市：青海;63