本发明专利技术公开了一种青钱柳试管苗的生根培养基及青钱柳的组培快繁方法。所述生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖15～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；其中，改良MS的配方为：大量元素：硝酸钾700mg/L、硝酸铵600mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾60mg/L、二水氯化钙165mg/L；有机化合物：肌醇100mg/L、烟酸1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、甘氨酸2mg/L；微量元素同MS培养基。用上述培养基对青钱柳试管苗进行生根培养，生根率≥72％。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物的组织培养技术，具体涉及一种青钱柳试管苗的生根培养基及青钱柳的组培快繁方法。
技术介绍
青钱柳[Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja]属胡桃科(Juglandaceae)青钱柳属植物，别名摇钱树、麻柳，青钱李、山麻柳、山化树。青钱柳被誉为“植物大熊猫”、“医学界的第三棵树”，是冰川四纪幸存下来的珍稀树种，仅存于中国，是国家重点保护的濒危植物。青钱柳主要分布于江西、浙江、江苏、安徽、福建、台湾、湖北、四川、贵州、云南等地，多零星分布于深山老林和一些自然保护区中。青钱柳更具有独特的保健和药用价值。民间长期以来用青钱柳叶做茶，茶气清香，味甜。《中国中药资源志要》(1994)记载，青钱柳叶具清热消渴解毒之效。《全国中草药名鉴》(1996)记载，青钱柳树皮、叶、根有杀虫止痒，消炎止痛祛风之功效。现代药理学研究证明，青钱柳有降血压、降血脂和抗衰老等药用功效。研究发现，青钱柳叶含有大量的钾、钙、镁、磷等常量元素，还含有锰、铁、铜、铬、锌、硒、钒、锗等微量元素。其中，与糖代谢和胰岛素作用密切相关的元素铬、镍、锂、硒、钒的含量较高，能够协助胰岛素发挥降血糖作用，并能改善糖耐量。青钱柳叶还含有丰富的多糖、黄酮、三萜、甾体类、皂苷、香豆精等有机化合物，这些化合物能有效降低甘油三酯和胆固醇，使青钱柳具有降血压、降血糖、降血脂的功能，同时对增强人体免疫力、抗氧化、抗衰老等具有独特作用。目前，市场上的青钱柳苗木多为野生资源移栽或人工培育的种子实生苗。由于青钱柳种源有限，种子饱满率低，还具有深休眠特性，采用常规播种育苗方法育种周期长，效率低，难以在短期内生产出大量种苗，不能满足市场的需求。近几年来，国内外研究人员以离体胚、叶片、嫩芽、茎段等为外植体相继开展青钱柳的组织培养与快速繁殖的研究，如谢寅峰等(谢寅峰等.青钱柳组培快繁体系的初步研究.西北植物学报，2009，29(11)：2331-2338)利用离体胚初步建立了青钱柳的快繁体系，采用WPM+0.2mg/L IBA+20g/L蔗糖培养基进行诱导，生根率为16.67％，经过15d暗诱导处理，生根率可提高到23.33％。乔卿梅等(乔卿梅,程茂高,魏志华.不同外源激素对青钱柳茎段组织培养的影响.北方园艺2009(7)：125-127)研究发现，在青钱柳茎段组织培养中，不定根诱导的适宜培养基为改良MS+5.0mg/L IBA，诱导率为40.00％。鲁萌等(鲁萌等.青钱柳茎段腋芽的离体培养技术.南京林业大学学报(自然科学版)，2013，37(6)：6-10)以WPM为基本培养基，研究IBA、GGR-6、ABT-1对青钱柳生根的影响，结果表明，10％GGR+1.0mg/L IBA组合处理效果最好，生根率为25％。已有的研究结果表明，青钱柳试管苗已能成功扩繁，但其生根率低、生根质量差，难以满足工厂化育苗的要求。由此可见，青钱柳组培苗的生根技术已成为制约青钱柳种苗工厂化生产的关键环节，组培苗生根技术的突破，对建立青钱柳高效组培快繁体系、扩大种植规模具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种青钱柳试管苗的生根培养基及青钱柳的组培快繁方法。采用本专利技术所述的生根培养基对常规青钱柳试管苗进行生根培养，可以获得72％以上的生根率，且根系发育良好，植株生长健壮，移栽成活率高。本专利技术所述的青钱柳试管苗的生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖15～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；其中，改良MS的配方为：大量元素的组分及浓度为：硝酸钾700mg/L、硝酸铵600mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾60mg/L、二水氯化钙165mg/L；有机化合物的组分及浓度为：肌醇100mg/L、烟酸1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、甘氨酸2mg/L；微量元素的组分及浓度同MS培养基。上述技术方案中，所述青钱柳生根培养基的配方优选为：改良MS+IBA0.5～1.0mg/L+IAA0.8～1.5mg/L+胺鲜酯0.05～0.08mg/L+蔗糖18～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；最优选为改良MS+IBA0.5mg/L+IAA1.0mg/L+胺鲜酯0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0。所述青钱柳生根培养基的pH值优选为5.8～6.0。本专利技术还包括一种青钱柳的组培快繁方法，该方法包括生根培养步骤，所述的生根培养步骤为：切取单株试管苗，接入生根培养基中培养至少25d；其中：所述生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖15～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；其中，改良MS的配方为：大量元素的组分及浓度为：硝酸钾700mg/L、硝酸铵600mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾60mg/L、二水氯化钙165mg/L；有机化合物的组分及浓度为：肌醇100mg/L、烟酸1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、甘氨酸2mg/L；微量元素的组分及浓度同MS培养基。上述方法中，青钱柳试管苗的生根培养条件可以与现有技术相同。优选如下：培养温度为20～30℃，光照周期为10～14h/d，光照强度为2000～3000Lx；进一步优选的培养条件为：培养温度为23～27℃，光照周期为10～12h/d，光照强度为2000～3000Lx。上述方法中，青钱柳试管苗在生根培养基中在上述培养条件下培养25d时，生根率可达到72％以上，而且根系发育良好，植株生长健壮。本专利技术所述方法中，优选试管苗的生根培养时间为25～35d。上述方法中，所述青钱柳生根培养基的配方优选为：改良MS+IBA0.5～1.0mg/L+IAA 0.8～1.5mg/L+胺鲜酯0.05～0.08mg/L+蔗糖18～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；最优选为改良MS+IBA 0.5mg/L+IAA 1.0mg/L+胺鲜酯0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0。所述青钱柳生根培养基的pH值优选为5.8～6.0。本专利技术所述方法中，用于进行生根培养的试管苗按现有常规方法离体培养得到，优选是以青钱柳当年生枝条，按常规方法离体培养所得。优选是选取高度≥2cm的单株试管苗进行生根培养，更优选是选取高度≥3cm且长有3～4个复叶的单株试管苗进行生根培养，以提高植株的移栽成活率。与现有技术相比，本专利技术的特点在于：通过改良基本培养基组分浓度、结合使用特定浓度的胺鲜酯、IBA以及IAA植物生长调节剂，使所得生根培养基可有效促进青钱柳试管苗生根。利用该生根培养基对青钱柳试管苗进行生根培养，可使生根率达到72％以上(优选实施例可达90％)，且根系发育良好，植株生长健壮，移栽成活率高，为实现青钱柳组培产业化和推广应用提供了技术支撑。附图说明图1为实施例1中按常规方法获得的青钱柳试本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种青钱柳试管苗的生根培养基，其特征在于：该生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖15～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；其中，改良MS的配方为：大量元素的组分及浓度为：硝酸钾700mg/L、硝酸铵600mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾60mg/L、二水氯化钙165mg/L；有机化合物的组分及浓度为：肌醇100mg/L、烟酸1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、甘氨酸2mg/L；微量元素的组分及浓度同MS培养基。
【技术特征摘要】
1.一种青钱柳试管苗的生根培养基，其特征在于：该生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖15～20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0；其中，改良MS的配方为：大量元素的组分及浓度为：硝酸钾700mg/L、硝酸铵600mg/L、七水硫酸镁185mg/L、磷酸二氢钾60mg/L、二水氯化钙165mg/L；有机化合物的组分及浓度为：肌醇100mg/L、烟酸1mg/L、盐酸吡哆醇1mg/L、盐酸硫胺素0.2mg/L、甘氨酸2mg/L；微量元素的组分及浓度同MS培养基。2.根据权利要求1所述的青钱柳试管苗的生根培养基，其特征在于：所述生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.5mg/L+IAA1.0mg/L+胺鲜酯0.05mg/L+蔗糖20g/L+琼脂5～8g/L，pH5.5～6.0。3.一种青钱柳的组培快繁方法，包括生根培养步骤，其特征在于：所述的生根培养步骤为：切取单株试管苗，接入生根培养基中培养至少25d；其中：所述生根培养基的配方为：改良MS+IBA0.2～1.5mg/L+IAA0～2.0mg/L+胺鲜酯0.02～0.1mg/L+蔗糖1...
【专利技术属性】
技术研发人员：莫海萍，苏玉卿，李伯林，刘云，
申请(专利权)人：桂林伯林生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：广西;45
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