本发明专利技术公开了一种淡豆豉纯种发酵方法，属于淡豆豉发酵技术领域，本发明专利技术的淡豆豉纯种发酵方法包括以下步骤：(1)发酵菌株活化、(2)黄豆的制备、(3)发酵菌液的制备、(4)黄豆接菌与发酵和(5)淡豆豉的回收。本发明专利技术的淡豆豉纯种发酵方法具有简单、方便、易于操作的优点，并且本发明专利技术的方法制备的淡豆豉相对于现有的生产方法极大的提高了异黄酮的含量，本发明专利技术的方法值得大力推广，具有重大的经济意义和社会意义。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及淡豆豉发酵
，尤其涉及一种淡豆豉纯种发酵方法。
技术介绍
淡豆豉是我国特产的以大豆为原料的发酵类中药，根据我国历代医书记载，其性味苦寒，具有解表，除烦，宣郁，解毒之功效。用于伤寒热病，寒热，头痛，烦躁，胸闷。现代研究表明，其还具有降血糖、调血脂、抗氧化、体外康肝癌细胞的作用。淡豆豉中含有大量的异黄酮。异黄酮是黄酮类化合物中的一种，主要存在于豆科植物中，大豆异黄酮是大豆生长中形成的一类次级代谢产物。由于是从植物中提取，与雌激素有相似结构，因此称为植物雌激素。大豆异黄酮的雌激素作用影响到激素分泌、代谢生物学活性、蛋白质合成、生长因子活性，是天然的癌症化学预防剂。益生大豆异黄酮是从非转基因大豆精制而成的生物活性物质，是一种具有多种重要生理活性的天然营养因子，是纯天然的植物雌激素，容易被人体吸收，能迅速补充营养。在每100克大豆样品中，含异黄酮128毫克，传统方法生产的分离蛋白含异黄酮102毫克，而豆乳中含9.65毫克，因为豆乳含水93.27％，相当于干物质中每100克也含异黄酮100毫 克以上。豆腐中含异黄酮27.74毫克，其干物质含异黄酮200毫克以上。异黄酮是一种弱的植物雌激素，大豆是人类获得异黄酮的惟一有效来源。在雌激素生理活性强的情况下，异黄酮能起抗雌激素作用，降低受雌激素激活的癌症如乳腺癌的风险，而当妇女绝经时期雌激素水平降低，异黄酮能起到替代作用，避免潮热等停经期症状发生。异黄酮的抗癌特性十分突出，能阻碍癌细胞的生长和扩散，而且只对癌细胞有作用，对正常细胞并无影响。异黄酮还是一种有效的抗氧化剂，能阻止氧自由基的生成，而氧自由基是一种强致癌因素。可见异黄酮的抗癌作用有多种方式和途径。中国药典中记载的现有淡豆豉的炮制方法是：取桑叶、青蒿各70～100g，加水煎煮，滤过，煎液拌入净大豆1000g中，俟吸尽后，蒸透，取出，稍晾，再置容器内，用煎过的桑叶、青蒿渣覆盖，闷使发酵至黄衣上遍时，取出，除去药渣，洗净，置容器内再闷15～20天，至充分发酵、香气溢出时，取出，略蒸，干燥，即得。中国专利CN1994116A中公开了一种利用纯种制曲生产淡豆豉的工艺，以中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心保藏的保藏号为CGMCC NO.1863的枯草芽孢杆菌(BACILLUS SUBTILIS)为制曲菌种，大豆为主料，桑叶和青蒿为辅料生产淡豆豉。具体工艺包括煎煮,过滤,将吸尽滤液的大豆蒸煮，按蒸煮大豆∶种子液＝100∶1～3(W/V)的量接种活菌，发酵，干燥等过程。由于本专利技术在工艺中使用了纯种菌，生产的淡豆豉具有稳定的营养和功能品质，且安全卫生。提高淡豆豉中异黄酮的含量，可以提高淡豆豉的药效，但是现有的淡豆豉制备方法中都存在淡豆豉产物中异黄酮的产量低的问题，因此如何通过优化改进淡豆豉的制备工艺，提高淡豆豉中异黄酮的含量具有十分重要的意义。
技术实现思路
为了解决现有的淡豆豉生产方法中存在的不足，本专利技术目的在于提供一种具有更高异黄酮含量的淡豆豉纯种发酵方法。本专利技术采取的技术方案是：本专利技术的淡豆豉纯种发酵方法的具体步骤如下：(1)发酵菌株活化：将发酵菌株进行酒精消毒后，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，轻摇混匀发酵菌，存放至22-28℃生化培养箱培养，培养12-24h；(6)黄豆的制备：将干黄豆中加入纯水，没过黄豆，浸泡10-15h，于100-120℃灭菌10-20min，冷却备用；(7)发酵菌液的制备：将步骤(1)培养后的发酵菌液取出，观察液体培养基表面是否覆盖灰白色菌膜，液体是否浑浊、有悬浮物，确认发酵菌活化情况良好后，用已灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基，对发酵菌液进行5-15倍稀释；(8)黄豆接菌与发酵：往步骤(2)制备好的黄豆中加入步骤(3)稀释后的发酵菌液，黄豆与稀释菌液的重量比为1-5:1，混匀后，放入生化培养箱内，在20-37℃下培养1-11天；(9)淡豆豉的回收：将步骤(4)发酵后的产物取出，放入干燥箱中进行干燥，干燥至淡豆豉无粘液附着，则得到淡豆豉成品。步骤(1)中，所述的发酵菌株是蜡样芽孢杆菌CAK-05，保藏编号：CCTCC NO:M2016283。保藏信息如下：分类命名：蜡样芽孢杆菌CAK-05(Bacillus cereus CAK-05)保藏该生物材料样品的单位名称：中国典型培养物保藏中心地址：中国武汉武汉大学保藏日期：2016年5月26日保藏编号：CCTCC NO:M2016283步骤(1)中，优选将发酵菌株存放至25℃生化培养箱培养，培养18h。步骤(1)中，所述的牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法如下：每蛋白胨10g，牛肉膏10g，氯化钠5g，加纯水混合后加热至完全溶解，加纯水定容至1000mL，调定pH值于7.4至7.6，121℃高压消毒25min，至4℃冰箱保存。步骤(2)中，优选黄豆浸泡12h，于115℃高压灭菌15min。步骤(3)中，优选用已灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基，对发酵菌液进行10倍稀释。步骤(4)中，优选黄豆与稀释菌液的重量比为3:1。步骤(4)中，优选在25℃下培养9天。步骤(4)中，发酵过程中，每隔1至2天需翻动黄豆，以使防止位于较上位置的黄豆与菌液分离，帮助与菌液混合，促进发酵。步骤(5)中，优选干燥温度为60℃。本专利技术的积极效果如下：本专利技术的淡豆豉纯种发酵方法具有简单、方便、易于操作的优点，并且本专利技术的方法制备的淡豆豉相对于现有的生产方法极大的提高了异黄酮的含量，本专利技术的方法值得大力推广，具有重大的经济意义和社会意义。具体实施方式下面的实施例是对本专利技术的进一步详细描述。实施例1本专利技术的淡豆豉纯种发酵方法的具体步骤如下：(1)发酵菌株活化：将发酵菌株进行酒精消毒后，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，轻摇混匀发酵菌，存放至22℃生化培养箱培养，培养24h；(10)黄豆的制备：将干黄豆中加入纯水，没过黄豆，浸泡10h，于120℃灭菌10min，冷却备用；(11)发酵菌液的制备：将步骤(1)培养后的发酵菌液取出，观察液体培养基表面是否覆盖灰白色菌膜，液体是否浑浊、有悬浮物，确认发酵菌活化情况良好后，用已灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基，对发酵菌液进行15倍稀释；(12)黄豆接菌与发酵：往步骤(2)制备好的黄豆中加入步骤(3)稀释后的发酵菌液，黄豆与稀释菌液的重量比为1:1，混匀后，放入生化培养箱内，在37℃下培养1天；(13)淡豆豉的回收：将步骤(4)发酵后的产物取出，放入干燥箱中进行干燥，干燥至淡豆豉无粘液附着，则得到淡豆豉成品。步骤(1)中，所述的发酵菌株是蜡样芽孢杆菌，保藏编号：CCTCC NO:M2016283。步骤(1)中，所述的牛肉膏蛋白胨液体培养基的制备方法如下：每蛋白胨10g，牛肉膏10g，氯化钠5g，加纯水混合后加热至完全溶解，加纯水定容至1000mL，调定pH值于7.4至7.6，121℃高压消毒25min，至4℃冰箱保存。步骤(4)中，发酵过程中，每隔1至2天需翻动黄豆，以使防止位于较上位置的黄豆与菌液分离，帮助与菌液混合，促进发酵。实施例2本专利技术的淡豆豉纯种发酵方法的具体步骤如下：(1)发酵菌株活化：将发酵菌株进行酒精消毒后，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，轻摇混匀发酵菌，存放至28℃生化培养箱培养，培养12h；(14)黄豆的本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种淡豆豉纯种发酵方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)发酵菌株活化：将发酵菌株进行酒精消毒后，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，轻摇混匀发酵菌，存放至22‑28℃生化培养箱培养，培养12‑24h；(2)黄豆的制备：将干黄豆中加入纯水，没过黄豆，浸泡10‑15h，于100‑120℃灭菌10‑20min，冷却备用；(3)发酵菌液的制备：将步骤(1)培养后的发酵菌液取出，观察液体培养基表面是否覆盖灰白色菌膜，液体是否浑浊、有悬浮物，确认发酵菌活化情况良好后，用已灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基，对发酵菌液进行5‑15倍稀释；(4)黄豆接菌与发酵：往步骤(2)制备好的黄豆中加入步骤(3)稀释后的发酵菌液，黄豆与稀释菌液的重量比为1‑5:1，混匀后，放入生化培养箱内，在20‑37℃下培养1‑11天；(5)淡豆豉的回收：将步骤(4)发酵后的产物取出，放入干燥箱中进行干燥，干燥至淡豆豉无粘液附着，则得到淡豆豉成品。
【技术特征摘要】
1.一种淡豆豉纯种发酵方法，其特征在于：所述方法的具体步骤如下：(1)发酵菌株活化：将发酵菌株进行酒精消毒后，接种至牛肉膏蛋白胨液体培养基中，轻摇混匀发酵菌，存放至22-28℃生化培养箱培养，培养12-24h；(2)黄豆的制备：将干黄豆中加入纯水，没过黄豆，浸泡10-15h，于100-120℃灭菌10-20min，冷却备用；(3)发酵菌液的制备：将步骤(1)培养后的发酵菌液取出，观察液体培养基表面是否覆盖灰白色菌膜，液体是否浑浊、有悬浮物，确认发酵菌活化情况良好后，用已灭菌的牛肉膏蛋白胨液体培养基，对发酵菌液进行5-15倍稀释；(4)黄豆接菌与发酵：往步骤(2)制备好的黄豆中加入步骤(3)稀释后的发酵菌液，黄豆与稀释菌液的重量比为1-5:1，混匀后，放入生化培养箱内，在20-37℃下培养1-11天；(5)淡豆豉的回收：将步骤(4)发酵后的产物取出，放入干燥箱中进行干燥，干燥至淡豆豉无粘液附着，则得到淡豆豉成品。2.如权利要求1所述的淡豆豉纯种发酵方法，其特征在于：步骤(1)中，所述的发酵菌株是蜡样芽孢杆菌CAK-05，保藏编号：CCTCC NO:M2016283。3.如权利要求1所述的淡豆豉纯种发酵方法，其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员：蔡琨，田维毅，冯果，刘力豪，王晓敏，梁建东，韩洁，
申请(专利权)人：贵阳中医学院，
类型：发明
国别省市：贵州;52
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