抑制产气荚膜梭菌感染的融合蛋白及其相关生物材料与应用制造技术

本发明专利技术公开了抑制产气荚膜梭菌感染的融合蛋白及其相关生物材料与应用。该融合蛋白为a)或b)或c)：a)由SEQ ID No.2的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由SEQ ID No.2第51‑937位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白。该融合蛋白免疫动物后可使动物产生较高的血清抗体水平，并且可抵抗产气荚膜梭菌的攻击。该融合蛋白可溶性好，纯化简易，可作为诊断抗原、制备成单克隆抗体或进一步对蛋白功能与构象关系进行研究。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
中抑制产气荚膜梭菌感染的融合蛋白及其相关生物材料与应用。
技术介绍
产气荚膜梭菌(Clostridium Perfringens)也称魏氏梭菌，是一种重要的人畜共患病，该病原是创伤性气性坏疽和人类食物中毒以及羊快疫、羔羊痢疾、牛羊坏死性肠炎、牛羊肠毒血症的主要病原之一，对畜牧业造成了巨大的经济损失。产气荚膜梭菌主要的致病因素是其分泌的外毒素，种类多达13种，其中α、β和ε是最主要的外毒素，根据产生外毒素的种类不同，可将产气荚膜梭菌分为A、B、C、D、E这五个血清型。目前产气荚膜梭菌病的免疫主要通过传统的经过灭活的单价苗、多联苗或者类毒素疫苗而实现，这些传统疫苗虽然能够诱导动物产生一定的保护性抗体，但是它们存在安全性不高、稳定性差、免疫后副反应大等缺点，这些缺点大大限制了其应用，研发一种针对多种血清型的基因工程亚单位多价疫苗因而成为了世界各国研究者的重点研究目标。由于基因工程亚单位多价疫苗含有产生保护性免疫应答所必需的有效免疫成分，去除了与免疫无关的成分，因而相对于传统疫苗而言安全性、稳定性更好，同时也消除了传统疫苗成分中的热原与应激原、变应原等反应原，很好本文档来自技高网...

【技术保护点】
a)或b)或c)或d)的蛋白质：a)由SEQ ID No.2的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由SEQ ID No.2第51‑937位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；d)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的可溶性蛋白质。

【技术特征摘要】
1.a)或b)或c)或d)的蛋白质：a)由SEQ ID No.2的氨基酸序列组成的蛋白质；b)由SEQ ID No.2第51-937位所示的氨基酸序列组成的蛋白质；c)在a)或b)所示的蛋白质的羧基端或/和氨基端融合蛋白标签得到的融合蛋白；d)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的可溶性蛋白质。2.根据权利要求1所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质按照包括如下步骤的方法制备：使所述蛋白质的编码基因在生物中进行表达得到所述蛋白质；所述生物为微生物、植物或非人动物。3.根据权利要求2所述的蛋白质，其特征在于：使所述蛋白质的编码基因在生物中进行表达包括将权利要求1所述的蛋白质的编码基因导入受体微生物，得到表达权利要求1所述蛋白质的重组微生物，培养所述重组微生物，表达得到权利要求1所述蛋白质。4.根据权利要求3所述的蛋白质，其特征在于：所述受体微生物为C1)-C4)中的任一种:C1)原核微生物；C2)革兰氏阴性细菌；C3)埃希氏菌属细菌；C4)大肠杆菌BL21(DE3)。5.根据权利要求2-4中任一所述的蛋白质，其特征在于：所述蛋白质的编码基因为如下1)或2)或3)所示的基因：1)编码序列是SEQ ID No.1所示的DNA分子；2)编码序列是SEQ ID No.1的第151-2814位所示的DNA分子；3)与1)或2)限定的DNA分子具有90％以上的同一性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。6.根据权利要求3-6中任一所述的蛋白质，其特征在于：所述重组微生物为将pET30a-α-β2-ε-Y导入大肠杆菌BL21(DE3)得到的表达氨基酸序列是SEQ ID No.2的蛋白质的重组微生物，所述重组微生物命名为BL21(DE3)/pET30a-α-β2-ε-Y，所述pET30a-α-β2-ε-Y为将载体pET30a(+)的BamHI和XhoI位点之间的序列替换为SEQ ID No.1第151-2814位所示的DNA片段得到的重组载体。7.D1)或D2)的应用：D1)权利要求1所述的蛋白质在...

【专利技术属性】
技术研发人员：宋晓晖，孙雨，翟新验，曲萍，
申请(专利权)人：中国动物疫病预防控制中心，
类型：发明
国别省市：北京;11