一种测定大黄中总蒽醌的方法技术

本发明专利技术公开了一种测定大黄中总蒽醌的方法，包括以下步骤：步骤1：将大黄切片后加入到粉碎机中，同时加入纳米石英砂，纳米石英砂和大黄的重量比为0.1‑0.2:1，得到大黄粉；步骤2：将大黄粉和硅藻土混合后加入到铺设有石英砂的萃取池中采用ASE快速萃取仪萃取；萃取参数如下：萃取溶剂为重量比为0.3‑0.4：0.6‑0.7的乙醇和甲醇的混合溶液；萃取温度80‑90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；所述的静态萃取的吹扫时间为100s；步骤2：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤3：将上清液采用液相色谱法进行分析。本发明专利技术提供了一种测定大黄中总蒽醌的方法，该方法提取较为彻底、测量精度高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及实验室检测领域，特别是一种测定大黄中总蒽醌的方法。
技术介绍
2010年药典记录了提取大黄中总蒽醌的方法：取本品粉末(过四号筛)约0.15g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过。精密量取续滤液5ml，置烧瓶中，挥去溶剂，加8％盐酸溶液10ml，超声处理2分钟，再加三氯甲烷10ml，加热回流1小时，放冷，置分液漏斗中，用少量三氯甲烷洗涤容器，并入分液漏斗中，分取三氯甲烷层，酸液再用三氯甲烷提取3次，每次10ml，合并三氯甲烷液，减压回收溶剂至于，残渣加甲醇使溶解，转移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品按干燥品计算，含总蒽醌以芦荟大黄素(C15H10O5)、大黄酸(C15H8O6)、大黄素(C15H10O5)、大黄酚(C15H10O4)和大黄素甲醚(C16H12O5)的总量计，不得少于1.5％。为了改善药典中检测过程中测试较为繁琐，对操作人员的操作技能要求高的问题，我们试图采用ASE快速萃取法进行萃取，萃取溶剂为1％乙酸和甲醇水溶液；萃取效率较高。因此，ASE快速萃取法是对中药材快速准确的检测方法的发展趋势，对ASE快速萃取法进一步优化可以提高检测精度和检测速度。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种测定大黄中总蒽醌的方法，该方法提取较为彻底、测量精度高。本专利技术提供的技术方案为：一种测定大黄中总蒽醌的方法，包括以下步骤：步骤1：将大黄切片后加入到粉碎机中，同时加入纳米石英砂，纳米石英砂和大黄的重量比为0.1-0.2:1，得到大黄粉；步骤2：将大黄粉和硅藻土混合后加入到铺设有石英砂的萃取池中采用ASE快速萃取仪萃取；萃取参数如下：萃取溶剂为重量比为0.3-0.4：0.6-0.7的乙醇和甲醇的混合溶液；萃取温度80-90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；所述的静态萃取的吹扫时间为100s；步骤3：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤4：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：agilent1260超高效液相色谱仪b)色谱柱规格：C181.8μm4.6×100mmc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：0-6min:0.1％磷酸-甲醇，0.1％磷酸溶液-甲醇体积比为40:60；6min:0.1％磷酸-甲醇，0.1％磷酸溶液-甲醇体积比为10:90；f)检测波长：254nm。在上述的测定大黄中总蒽醌的方法中，步骤3具体为：将萃取液在15000r/min的条件下离心3min，取上清液。在上述的测定大黄中总蒽醌的方法中，所述的仪器为agilent1260超高效液相色谱仪。在上述的测定大黄中总蒽醌的方法中，所述的色谱柱为AgilentZORBAXExtend-C181.8μm4.6×100mm。在上述的测定大黄中总蒽醌的方法中，所述的ASE萃取法所采用的仪器为ASE350快速溶剂萃取仪。本专利技术在采用上述技术方案后，其具有的有益效果为：本专利技术在检测过程中，首先通过粉粹然后经过ASE快速萃取法进行萃取，能够提高分离精度，特别是在粉碎过程中，采用纳米石英砂可以提高细胞破碎的效果，因为纳米石英砂会粘附在细胞的表面，在告诉粉碎过程中，粘附在细胞表面的纳米石英砂会和相互碰撞的细胞摩擦以及和粉碎刀片摩擦，提高细胞粉碎效果。同时，萃取液采用乙醇甲醇混合液，通过一次静态循环即可以实现非常彻底的提取效果。采用液相色谱分析方法，可以有效的准确的测定大黄中的总蒽醌的含量。具体实施方式下面结合具体实施方式，对本专利技术的技术方案作进一步的详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制。实施例1：将1g大黄切片后加入到粉碎机中，同时加入纳米石英砂，纳米石英砂和大黄的重量
比为0.15:1，得到大黄粉；将0.1725g大黄粉与适量硅藻土混合均匀，待用，先在萃取池加入少量石英砂，再把样品移入到预先放好过滤膜的10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，在15000r/min下离心3min，取上清液，进入LC测定。萃取条件(见表1)为：表1分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：a)仪器：agilent1260超高效液相色谱仪b)色谱柱规格：AgilentZORBAXExtend-C181.8μm4.6×100mm，即碳18色谱柱，直径4.6mm，长度100mm，粒径1.8微米；c)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：0-6min:0.1％磷酸-甲醇(体积比40:60，本实施例中的体积比为20℃条件下的体积比)6min:0.1％磷酸-甲醇(体积比10:90)，即第6分钟前流动相为体积比为40:60的0.1％磷酸-甲醇的混合物，在第6分钟时，流动相为体积比为10:90的0.1％磷酸-甲醇的混合物。f)检测波长：254nm。对比例1将1g大黄切片后加入到粉碎机中，得到大黄粉；精密称定粉末0.15g，与适量硅藻土混合均匀，待用，先在萃取池加入少量石英砂，再把样品移入到预先放好过滤膜的10ml萃取池中再加入适量硅藻土，轻轻振摇使之与池口在同一水平线上，拧紧萃取
池上盖。萃取结束后，把萃取液转移于50ml容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，在15000r/min下离心3min，取上清液，进入LC测定。萃取条件(见表2)为：表2与药典接近萃取池体积(ml)10萃取溶剂1％乙酸和甲醇水溶液压力(psi)1500温度(℃)100静态萃取时间(min)5静态循环次数3冲洗体积(％)100吹扫时间(s)100分析方法为LC液相色谱法，液相色谱分析条件：a)仪器：agilent1260超高效液相色谱仪b)色谱柱规格：AgilentZORBAXExtend-C181.8μm4.6×100mm，即碳18色谱柱，直径4.6mm，长度100mm，粒径1.8微米；c)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：0-6min:0.1％磷酸-甲醇(体积比40:60)6min:0.1％磷酸-甲醇(体积比10:90)，即第6分钟前流动相为体积比为40:60的0.1％磷酸-甲醇的混合物，在第6分钟时，流动相为体积比为10:90的0.1％磷酸-甲醇的混合物。f)检测波长：254nm。实施例1的萃取方法的精确度测试采用实施例1的测定方法、对比例1的测定方法和药典方法对大黄进行萃取，大黄为3批，批号分别为150912，1511012,20150701；具体测试结果见下表3；表3以上所述的仅为本专利技术的较佳实施例，凡在本专利技术的精神和原则范围内所作的任何修改、等同替换和改进等，均应包含在本专利技术的保护范围之内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种测定大黄中总蒽醌的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将大黄切片后加入到粉碎机中，同时加入纳米石英砂，纳米石英砂和大黄的重量比为0.1‑0.2:1，得到大黄粉；步骤2：将大黄粉和硅藻土混合后加入到铺设有石英砂的萃取池中采用ASE快速萃取仪萃取；萃取参数如下：萃取溶剂为重量比为0.3‑0.4：0.6‑0.7的乙醇和甲醇的混合溶液；萃取温度80‑90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；所述的静态萃取的吹扫时间为100s；步骤3：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤4：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：agilent1260超高效液相色谱仪Y002b)色谱柱规格：C181.8μm4.6×100mmc)柱温：40℃d)流速：0.5mL/mine)流动相：0‑6min:0.1％磷酸‑甲醇，0.1％磷酸溶液‑甲醇体积比为40:60；6min:0.1％磷酸‑甲醇，0.1％磷酸溶液‑甲醇体积比为10:90；f)检测波长：254nm。

【技术特征摘要】
1.一种测定大黄中总蒽醌的方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤1：将大黄切片后加入到粉碎机中，同时加入纳米石英砂，纳米石英砂和大黄的重量比为0.1-0.2:1，得到大黄粉；步骤2：将大黄粉和硅藻土混合后加入到铺设有石英砂的萃取池中采用ASE快速萃取仪萃取；萃取参数如下：萃取溶剂为重量比为0.3-0.4：0.6-0.7的乙醇和甲醇的混合溶液；萃取温度80-90℃；静态萃取时间5min；冲洗体积100％；静态循环次数1次；静态萃取的压力为1500psi；所述的静态萃取的吹扫时间为100s；步骤3：将萃取液离心分离后，得到上清液；步骤4：将上清液采用液相色谱法进行分析；其中，液相色谱法的分析条件为：a)仪器：agilent1260超高效液相色谱仪Y002b)色谱柱规格：C181.8μm4.6×100mmc)柱温：40℃d)流...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈学松，廖强，韦日伟，陈佳丽，王华，姚泳成，
申请(专利权)人：广西壮族自治区梧州食品药品检验所，
类型：发明
国别省市：广西;45