原发性肝癌伴胆管癌栓生物标志物及其用途制造技术

本发明专利技术提供一种用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的标志物，以5,6‑二氢尿嘧啶、D‑天冬氨酸、硬脂酸、二十二烷酸和二十四酸五个指标联合时的灵敏度和特异度均较单指标诊断时有效，分别达到了99.06％和0％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种原发性肝癌伴胆管癌栓标志物，特别地，进一步具体涉及G01N33/68。
技术介绍
原发性肝癌伴胆管癌栓(BDTT)以肝细胞癌向胆道系统内转移致梗阻性黄疸为特点，是胆道系统最常见的继发性肿瘤。但是，其除了会与原发性肝癌伴胆管压迫所混淆外，其最容易发生误诊的疾病为胆道的恶性疾病，同时，也会与胆道系统的良性疾病，如胆管结石，胆管囊肿等疾病混淆。据统计，总体术前临床误诊率为16.6％(65/392)，后期术前临床误诊率(9.8％，26/264)低于前期(30.5％，39/128)。常易误诊的疾病包括：肝癌伴肝门部胆管压迫，肝门部肝管腺瘤/癌伴胆管癌栓，胆管结石。前、后期误诊为肝癌伴肝门部胆管压迫分别为9.4％和1.5％，误诊为胆管结石分别为7.8％和1.9％，差异有统计学意义(P<0.01)。针对上述问题，本专利技术提供了以人体样本的方法来筛查并鉴定BDTT与胆管癌、胆管结石、胆管囊肿鉴别诊断的标志物及其应用。
技术实现思路
用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的标志物，其包括：D-天冬氨酸、5,6-二氢尿嘧啶、二十二烷酸、苏糖酸、二十四酸和硬脂酸中的一种或多种组合物。作为本专利技术的一种实施方式，所述的标志物的p值小于0.05。作为本专利技术的一种实施方式，所述胆道系统疾病为肝外胆管癌、原发性胆管结石、先天性胆管囊肿中的一种或多种。作为本专利技术的一种实施方式，所述标志物用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和原发性肝癌伴胆管压迫。获取上述的标志物的方法，其步骤在于，获取受试者样品，并进行前处理；采用GC-MS/LC-MS进行检测；进行多元变量统计分析，获取标志物。用上述标志物区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的方法，所述方法包括：在受试者的组织样本中测定上述一种或两种标志物的水平；将受试者样品中的一种或两种标志物与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比较，其中与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比，受试者样品中的一种或多种标志物的水平的差异指示所述受试者具有原发性肝癌伴胆管癌栓。用于确定具有原发性肝癌伴胆管癌栓的受试者是否将对疗法有反应的方法，所述方法包括：在受试者的样品中测定上述的一种或多种标志物的水平；将受试者样品中的一种或多种标志物的水平与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比较，其中与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比，受试者样品中的一种或多种标志物的水平的差异指示所述受试者将对所述疗法有反应。用于在具有原发性肝癌伴胆管癌栓的受试者中监测治疗功效的方法，所述方法包括：在开始所述治疗之前，在来自受试者的第一样品中测定上述一种或多种标志物的水平；在已给予所述治疗的至少一部分之后，在来自受试者的第二样品中测定上述一种或多种标志物的水平；将第一样品中的一种或多种标志物的水平与第二样品中的一种或多种标志物的水平相比较，其中与第二样品中的一种或多种标志物的水平相比，第一样品中的一种或多种标志物的水平的差异指示所述受试者将对所述治疗有反应。作为本专利技术的一种实施方式，其中受试者样品是流体样品或组织样品。用于确定受试者是否具有或将发展原发性肝癌伴胆管癌栓的试剂盒，所述试剂盒包括用于在受试者样品中测定上述的一种或多种标志物的水平的试剂。说明书附图图1：实施例1，以5,6-二氢尿嘧啶为标志物时的ROC图；图2：实施例20，以硬脂酸、二十四酸为标志物时的ROC图；图3：实施例40，以苏糖酸、二十二烷酸和二十四酸为标志物时的ROC图；图4：实施例60，以5,6-二氢尿嘧啶、D-天冬氨酸、硬脂酸、二十二烷酸和二十四酸为标志物时的ROC图；具体实施方式参选以下本专利技术的优选实施方法的详述以及包括的实施例可更容易地理解本专利技术的内容。除非另有限定，本文使用的所有技术以及科学术语具有与本专利技术
所属领域普通技术人员通常理解的相同的含义。当存在矛盾时，以本说明书中的定义为准。当量、浓度、或者其它值或参数以范围、优选范围、或一系列上限优选值和下限优选值限定的范围表示时，这应当被理解为具体公开了由任何范围上限或优选值与任何范围下限或优选值的任一配对所形成的所有范围，而不论该范围是否单独公开了。例如，当公开了范围“1至5”时，所描述的范围应被解释为包括范围“1至4”、“1至3”、“1至2”、“1至2和4至5”、“1至3和5”等。当数值范围在本文中被描述时，除非另外说明，否则该范围意图包括其端值和在该范围内的所有整数和分数。单数形式包括复数讨论对象，除非上下文中另外清楚地指明。“任选的”或者“任意一种”是指其后描述的事项或事件可以发生或不发生，而且该描述包括事件发生的情形和事件不发生的情形。说明书和权利要求书中的近似用语用来修饰数量，表示本专利技术并不限定于该具体数量，还包括与该数量接近的可接受的而不会导致相关基本功能的改变的修正的部分。相应的，用“大约”、“约”等修饰一个数值，意为本专利技术不限于该精确数值。在某些例子中，近似用语可能对应于测量数值的仪器的精度。在本申请说明书和权利要求书中，范围限定可以组合和/或互换，如果没有另外说明这些范围包括其间所含有的所有子范围。此外，本专利技术要素或组分前的不定冠词“一种”和“一个”对要素或组分的数量要求(即出现次数)无限制性。因此“一个”或“一种”应被解读为包括一个或至少一个，并且单数形式的要素或组分也包括复数形式，除非所述数量明显旨指单数形式。本专利技术的各个方面更详细地描述于以下节段中：如本文所用，以下术语的每一个具有与其在本部分中相关的含义。冠词\一个\和\一种\在本文用于指该冠词的一个或超过一个(即至少一个)的语法对象。例如，\要素\意指一个要素或超过一个要素。“标志物”或“生物标志物”是与另一种表型状态(例如未患有疾病)相比，在取自一种表型状态(例如患有疾病)的受试者的样品中差别存在的有机生物分子。如果在不同组中生物标志物的平均或中位水平、例如表达水平经计算为统计学显著的，则生物标志物在不同的表型状态中差别存在。统计学显著性的常见检验特别包括t-检验、ANOVA、Kruskal-Wallis、Wilcoxon、Mann-Whitney和优势
比。单独或组合的生物标志物提供受试者属于一种表型状态或另一种表型状态的相对风险的度量。因此，它们用作标志物，例如，用于疾病(预后和诊断)、药物的治疗功效(治疗诊断学)和药物毒性的标志物。在一些实施方案中，用于本专利技术的组合物和方法的标志物的准确性可通过接收器工作特征曲线(“ROC曲线”)来表征。ROC是对于诊断标志物的不同可能的割点的真阳性率相对假阳性率的曲线。ROC曲线显示灵敏性和特异性之间的关系。即是说，灵敏性的增加将伴随特异性的降低。曲线越靠近ROC空间的左轴，然后顶缘，标志物越准确。相反地，曲线越靠近ROC图的45度对角线，标志物越不准确。ROC下的面积是标志物准确性的度量。标志物的准确性取决于标志物如何适当地将待测试的组分成具有所述疾病的组和不具有所述疾病的组。曲线下面积(称为“AUC”)为1表示完美的标志物，而面积为0.5表示有用性较差的标志物。因此，在一些实施方案中，本专利技术的生物标志物和方法的AUC大于约0.50、大于约0.60或大于约0.70。“原发性肝癌伴胆管癌栓”在本文中亦称为“BDTT”，主要临本文档来自技高网...

【技术保护点】
用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的标志物，其包括：D‑天冬氨酸、5,6‑二氢尿嘧啶、二十二烷酸、苏糖酸、二十四酸和硬脂酸中的一种或多种组合物。

【技术特征摘要】
1.用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的标志物，其包括：D-天冬氨酸、5,6-二氢尿嘧啶、二十二烷酸、苏糖酸、二十四酸和硬脂酸中的一种或多种组合物。2.权利要求1所述的标志物，其p值小于0.05。3.权利要求1所述的标志物，所述胆道系统疾病为肝外胆管癌、原发性胆管结石、先天性胆管囊肿中的一种或多种。4.权利要求1所述的标志物，用于区分原发性肝癌伴胆管癌栓和原发性肝癌伴胆管压迫。5.获取权利要求1所述的标志物的方法，其步骤在于，获取受试者样品，并进行前处理；采用GC-MS或LC-MS进行检测；进行数据分析，获取所述标志物。6.用权利要求1所述的标志物区分原发性肝癌伴胆管癌栓和胆道系统疾病的方法，所述方法包括：在受试者的组织样本中测定权利要求1所述一种或两种标志物的水平；将受试者样品中的一种或两种标志物与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比较，其中与对照样品中的一种或多种标志物的水平相比，受试者样品中的一种或多种标志物的水平的差异指示所述受试者具有原发性肝癌伴胆管癌栓。7.用于确定具有原发性肝癌伴胆管癌栓的受试者是否将对疗法有反应的方法，所述方法包...

【专利技术属性】
技术研发人员：邓军亮，楼格尔，吴洪强，
申请(专利权)人：上海阿趣生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31