一种有机固化基质组培金线莲的方法技术

本发明专利技术涉及一种有机固化基质组培金线莲的方法，以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75％乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.％升汞灭菌7‑10分钟，用无菌水冲洗4‑5次；在无菌条件下，将茎切成l‑2 cm长带1‑2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，在每天连续光照12 h，光照强度1500‑3000 lx，培养温度25±1℃，培养120‑125天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化。培养出高质量的有机苗，具有比较完整根系和茎、叶，成活率高。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物细胞组织技术，具体涉及。
技术介绍
金线莲别名金线兰、金丝草，为兰科开唇植物花叶兰属多年生珍稀中草药，1990年被主产该药材的福建省省政府列为濒危药用植物。它在民间使用非常广泛，有清热凉血、祛风利湿、解毒、止痛、镇咳等功效，主治咯血、支气管炎、肾炎、膀胱炎、糖尿病、血尿、风湿性关节炎肿瘤等疑难病症，在小孩急惊风、去胎毒、保肝护肝、治疗糖尿病、乳癌、胃癌方面效果显著。素有“药王”、“金草”、“神药”、“鸟人参”等美称。经有关部门测定发现，金丝莲中氨基酸组成、成分、含量及抗衰老活性微量元素的含量均高于国产和野生西洋参。几百年来为历代皇宫的专用御品。现为宾馆、酒家及不少家庭的高档煲汤材料。金线莲性喜阴凉、潮湿，尤其喜欢生长在有常绿阔叶树木的沟边、石壁、土质松散的潮湿地带，最忌阳光直射。由于其对生态环境要求严格，加之近年自然环境遭受严重破坏，野生金线莲越来越少。现有无性繁殖培养出来苗，所形成的根系不具备吸收土壤中营养成分能力，移植土壤时需要经过比较长滞长阶段，种植移栽培过程需要洗苗去除基部无机培养基，造成根茎损伤，病原菌侵入，成活率低。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供，解决了现有技术中金线莲培养不易成活等缺点。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案: ，包括如下步骤: (1)以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75%乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.%升汞灭菌7-10分钟，用无菌水冲洗4-5次； (2)在无菌条件下，将茎切成1-2cm长带1-2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成1-2cm移入有机固化基质中，在每天连续光照12 h，光照强度1500 -3000 lx，培养温度25 ±1 °C，培养120-125天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化；诱导培养基为MS基本培养基中附加6-BA 1.0m g/L,NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。所述的有机固化基质含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麦皮麸3 g/L、琼脂粉3.5g/L。本专利技术的优点在于:本专利技术培养出高质量的金线莲有机苗，具有比较完整根系和茎、叶。实现在无菌条件下快繁和栽培磨合适应，这样培养出来高质量的有机苗，所形成的根系具备吸收土壤中营养成分能力，移植土壤时无需经过滞长阶段(传统培养基成移植土壤时滞长天数在30天左右)，减少种植移栽培过程损伤造成病害侵入，提高成活率(传统培养基成活率40-50%，有机固化基质成活率90-95%)。解决组织培养金线莲发根难成活率低，提1?效率，广品成色好、质量1? O【附图说明】图1在有机固化基质中培养的苗。 图2与有基质融为一体的根系。图3移植土壤的苗。 图4形成比较完整根系。【具体实施方式】实施例1 ，包括如下步骤: (1)以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75%乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.%升汞灭菌7分钟，用无菌水冲洗4次； (2)在无菌条件下，将茎切成Icm长带I腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成I cm移入有机固化基质中，在每天连续光照12 h，光照强度1500 lx，培养温度25 ±1 °C，培养120天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化;诱导培养基为MS基本培养基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。所述的有机固化基质含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麦皮麸3 g/L、琼脂粉3.5g/L。实施例2 ，包括如下步骤: (1)以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75%乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.%升汞灭菌10分钟，用无菌水冲洗5次； (2)在无菌条件下，将茎切成2cm长带2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成2cm移入有机固化基质中，在每天连续光照12 h，光照强度3000 lx，培养温度25 ±1 °C，培养125天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化;诱导培养基为MS基本培养基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。所述的有机固化基质含有白糖5g/L、木肩lOOg/L(木肩粗约3毫米见方)、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麦皮麸3 g/L、琼脂粉3.5g/L。实施例3 ，包括如下步骤: (1)以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75%乙醇中灭菌30秒，再以0.1 Wt.%升汞灭菌9分钟，用无菌水冲洗4次； (2)在无菌条件下，将茎切成Icm长带1-2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成1-2cm移入有机固化基质中，在每天连续光照12 h，光照强度25001x，培养温度25 ±1 °C，培养122天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化;诱导培养基为MS基本培养基中附加 6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L 和ZT 0.02m g/L。所述的有机固化基质含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麦皮麸3 g/L、琼脂粉3.5g/L。本专利技术以野生金线莲为外植体经过继代培养移入有机固化基质，形成比较完整根系和茎、叶(如图1)。实现在无菌条件下快繁和栽培磨合适应，这样培养出来高质量的有机苗，所形成的根系具备吸收土壤中营养成分能力(如图4)，移植土壤时无需经过滞长阶段，减少种植移栽培过程损伤造成病害侵入，提高成活率(如图3)，成活率达到90%以上。解决组织培养金线莲发根难成活率低，提高效率，产品成色好、质量高.以上所述仅为本专利技术的较佳实施例，凡依本专利技术申请专利范围所做的均等变化与修饰，皆应属本专利技术的涵盖范围。【主权项】1.，其特征在于:所述方法包括如下步骤: (1)以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75%乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.%升汞灭菌7-10分钟，用无菌水冲洗4-5次； (2)在无菌条件下，将茎切成1-2cm长带1-2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成1-2cm移入有机固化基质中，在每天连续光照12 h，光照强度1500 -3000 lx，培养温度25 ±1 °C，培养120-125天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化；诱导培养基为MS基本培养基中附加6-BA 1.0m g/L、NAA 0.1m g/L和ZT 0.02m g/L。2.根据权利要求1所述的，其特征在于:所述的有机固化基质含有白糖5g/L、木肩100g/L、玉米粉3 g/L、石灰粉lg/L、土豆10 g/L、麦皮麸3g/L、琼脂粉 3.5g/L。【专利摘要】本专利技术涉及，以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75％乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.％升汞灭菌7?10分钟，用无菌水冲洗4?5次；在无菌条件下，将茎切成l?2 cm长带1?2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，在每天连续光照12 h，光照强度1500?3000 lx，培养温度25本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种有机固化机质组培金线莲的方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：（1）以野生金线莲为外植体去除根叶的茎段，经表面清洗后，放入75％乙醇中灭菌30秒，再以0.1 wt.％升汞灭菌7‑10分钟，用无菌水冲洗4‑5 次；（2）在无菌条件下，将茎切成 l‑2 cm长带1‑2腋芽的节段，接种到诱导培养基上，经过继代培养的茎切成 l ‑2cm移入有机固化基质中，在每天连续光照 12 h，光照强度1500 ‑3000 lx，培养温度25 ±1 ℃，培养120‑125天，形成有效根，促进芽径增粗和茎、叶的分化；诱导培养基为MS基本培养基中附加 6‑BA 1.0m g／L、NAA 0.1m g／L 和ZT 0.02m g／L。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：林成辉，吴祖建，俞超维，
申请(专利权)人：福建农林大学，
类型：发明
国别省市：福建;35