一种量子点-抗体溶液及其制备方法与应用技术

本发明专利技术提供了一种量子点-抗体溶液，是由抗体和量子点组成的量子点-抗体交联物，通过将抗体和量子点混匀后加入EDC和NHS，避光搅拌后超滤离心获得；可用于检测一些微量或痕量物质，该类物质由于浓度或含量过低而无法使用现有免疫层析法进行检测。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物技术分析检测领域，尤其是一种量子点-抗体溶液及其制备方法 与应用。
技术介绍
现阶段，快速检测试剂盒一般的标记物是胶体金或者荧光基团。例如，检测转铁蛋 白（SF)的检测试纸，由含有胶体金标记的抗人SF抗体的胶体金-抗体垫、包被有配对检测物 抗体(T线）和抗鼠 IgG(C线）的NC膜、样品垫、吸样垫和塑料底板组成，每个试纸的宽度为3-5mm，长度为7-8cm，样品垫、NC膜和吸样垫从塑料底板一端依次排列至另一端。 胶体金标记的检测试剂盒虽然成本较量子点更低，但检测灵敏度不如量子点标记 高，检测范围也较量子点更窄。荧光基团标记的检测试剂盒，灵敏度也低于量子点标记。 胶体金使用可见光吸光进行检测，结果为反应区上一条红色或紫色的条带。一般 胶体金检测试剂盒均为肉眼观察该条带是否出现及颜色深浅。而量子点则是由紫外光激 发，产生非常强的激发光，其信号强度要大于胶体金的反应信号，提高灵敏度。同时，当胶体 金在反应区结合达到一定值时，再增加结合胶体金不会改变条带颜色。而量子点是进行发 光强度测定，故而无此问题，从而增大检测范围。 和荧光基团相比，量子点的激发光和发射光距离较远，故而激发光对于发射光的 干扰很小，从而减小检测的本底值，进而提高灵敏度。同时，量子点的激发光谱很窄，故而在 峰值的光强非常强。若使用同样光栅进行测定时，量子点产生的激发光强度远远大于荧光 基团的发光强度。故而量子点标记得到的激发光信号更强。同时，和荧光基团相比，量子点 具有相似或者更高的吸光系数和光量子产率。故而使用量子点标记，其检测灵敏度较荧光 基团更尚。【专利技术内容】 本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种量子点-抗体溶液。 本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供上述量子点-抗体溶液的制备方法。 本专利技术所要解决的另一技术问题在于提供上述量子点-抗体溶液的应用。为解决上述技术问题，本专利技术的技术方案是： -种量子点-抗体溶液，是由抗体和量子点组成的量子点-抗体交联物，所述量子 点是由粒径在2-20nm之间的IIB.VIA族元素或IIIA.VA族元素为核、二氧化硅为壳的核壳型 纳米复合粒子。 所述量子点-抗体溶液为淡橙色透明的溶液，PH值在7.5左右，溶液中的量子点是 由粒径在2-20nm之间的IIB.VIA族元素（如CdS、CdSe、CdTe、ZnSe等）或IIIA.VA族元素（如 InP、InAs等)为核、二氧化娃为壳的核壳型纳米复合粒子。交联了不同粒径的抗体经过相同 波长的激发光激发后可以发射不同发射光谱，进而表现为量子点不同颜色的改变。 优选的，上述量子点-抗体溶液，所述抗体是鼠抗人单克隆抗体。 所述抗体是鼠抗人单克隆抗体指通过免疫小鼠得到的B淋巴细胞，再通过杂交瘤 细胞技术在体内或体外制备，得到针对一种抗原决定簇的抗体。 优选的，上述量子点-抗体溶液，所述量子点是ZnS、CdS、HgS、ZnSe、CdSe、HgSe、 CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/PbS、CdS/Cd (0H)2、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/CdS、CdSe/ ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、CdTe/ HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、SeTe、 8&5、8&56、8&了6、0(15:]\111、2115:]\111丄(15:(：11、2115:(：11丄(15:113、2115:113中的任意一种或任意几种 纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核壳型纳米复合粒子。 优选的，上述量子点-抗体溶液，是由下述方法得到的： (1)每20-200nmol抗体和200pmol量子点混匀后，加入40-200nmol的EDC和NHS，避 光反应60-180分钟并持续搅拌； ⑵所得反应混合物转移到10K-100KDa孔径的超滤管中，在速度10,000Xg下离心 15分钟，重复5次； (3)收集超滤管中的反应产物，即为量子点-抗体交联物； 上述量子点-抗体溶液中加入2 % BSA后，存于4 °C冰箱中备用。优选的，上述量子点-抗体溶液，是由下述方法得到的： (1)每lOOnmol的鼠抗人TSH单克隆抗体和200pmol粒径为4.0nm的CdTe量子点混匀 后，加入lOOnmol的EDC和NHS，避光反应60分钟并持续搅拌； (2)将所得反应混合物转移到lOKDa孔径的超滤管中，在速度10,000Xg下离心15 分钟，重复5次； (3)收集超滤管中的反应产物，即为量子点-抗体交联物。 上述量子点-抗体溶液的制备方法，具体步骤为： (1)每20-200nmol抗体和200pmol量子点混匀后，加入40-200nmol的EDC和NHS，避 光反应60-180分钟并持续搅拌； (2)所得反应混合物转移到10K-100KDa孔径的超滤管中，在速度10,000Xg下离心 15分钟，重复5次； (3)收集超滤管中的反应产物，即为量子点-抗体交联物。优选的，上述上述量子点-抗体溶液的制备方法，所述步骤(3)所得量子点-抗体交 联物中加入2 % BSA后，存于4 °C冰箱中备用。优选的，上述量子点-抗体溶液的制备方法，所述抗体是鼠抗人单克隆抗体。优选的，上述量子点-抗体溶液的制备方法，所述量子点是ZnS、CdS、HgS、ZnSe、 CdSe、HgSe、CdTe、ZnTe、ZnO、PbSe、HgTe、CaAs、InP、InAs、InCaAs、CdS/ZnS、CdS/Ag2S、CdS/ PbS、CdS/Cd(OH)2、CdS/HgS、CdS/HgS/CdS、ZnS/CdS、ZnS/CdS/ZnS、ZnS/HgS/ZnS/CdS、CdSe/ CdS、CdSe/ZnS、CdSe/ZnSe、CdSe/CuSe、CdSe/HgTe、CdSe/HgSe、CdSe/HgSe/CdSe、CdTe/HgS、 CdTe/HgTe、InAs/InP、InAs/CdSe、InAs/ZnSe、MgS、MgSe、MgTe、CaS、CaSe、CaTe、SrS、SrSe、 56丁6、8&5、8&56、8&了6、0(15:]\111、2115:]\111丄(15:(：11、2115:(：11、〇(15:113、2115:113中的任意一种或任 意几种纳米粒子的组合，以及由上述任意一种量子点为核、二氧化硅为壳的核壳型纳米复 合粒子。上述量子点-抗体溶液在制备检测试纸和/或试剂盒方面的应用。 优选的，上述量子点-抗体溶液的应用，所述检测试纸的NC膜包被有配对检测物抗 体(T线）和抗鼠 IgG(C线），所述量子点-抗体溶液应用于检测试纸的T线(检测线）与C线（质 控线)上。 优选的，上述量子点-抗体溶液的应用，所述检测试纸的NC膜是由本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种量子点‑抗体溶液，其特征在于：是由抗体和量子点组成的量子点‑抗体交联物，所述量子点是由粒径在2‑20nm之间的IIB.VIA族元素或IIIA.VA族元素为核、二氧化硅为壳的核壳型纳米复合粒子。

【技术特征摘要】
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【专利技术属性】
技术研发人员：李洲，周洪锐，许俊燕，张道红，李昀地，杨延瑞，
申请(专利权)人：天津中新科炬生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：天津;12