C端和中央表位的Aβ抗体制造技术

本发明专利技术提供了相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的针对Aβ的C端和中央表位的抗体。本发明专利技术还提供了治疗患者以减少或消除Aβ的紧密斑的存在和相关症状的方法。一方面，本发明专利技术提供了一种治疗被诊断患有中期或晚期阿尔茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表位结合并且相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案。在某些情况下，所述患者已被诊断患有中期阿尔茨海默氏病。在某些情况下，所述患者已被诊断患有晚期阿尔茨海默氏病。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】与相关申请的交叉引用本申请要求2012年7月3日提交的美国临时专利申请号61/667,891在35USC119(e)下的权益，所述临时申请以其全部内容通过参考并入本文。
技术介绍
阿尔茨海默氏病(AD)是一种引起老年痴呆症的渐进性疾病。总的来说参见Selkoe，TINS16:403(1993)；Hardy等，WO92/13069；Selkoe，J.Neuropathol.Exp.Neurol.53:438(1994)；Duff等，Nature373:476(1995)；Games等，Nature373:523(1995)。广义来说，该疾病分成两类：在老年(65+岁)发生的迟发型，以及在老年期之前即在35至60岁之间充分发展的早发型。在这两种疾病类型中，病理学是相同的，但是在较早年龄开始的病例中异常情况倾向于更加严重且广泛。该疾病的特征在于脑中的至少两种类型的病变，即神经原纤维缠结和老年斑块。神经原纤维缠结是由成对的彼此缠绕的两根细丝构成的微管结合性tau蛋白的细胞内沉积物。老年斑块(即淀粉样斑块)是跨度高达150μm的无序的神经纤维网区域，在其中心处具有可以通过脑组织切片的显微镜分析看到的细胞外淀粉样沉积物。淀粉样斑块在脑中的积累也与唐氏综合征和其他认知障碍相关。斑块的主要组成成分是被称为Aβ或β-淀粉样肽的肽。Aβ是被称为淀粉样肽前体蛋白(APP)的较大跨膜糖蛋白的39-43个氨基酸的4-kDa内部片段。作为APP被不同分泌酶的蛋r>白水解加工的结果，Aβ主要以长度为40个氨基酸的短形式和长度在42-43个氨基酸范围内的长形式这两种形式存在。APP的疏水跨膜结构域的一部分存在于Aβ的羧基末端处，并且可以解释Aβ聚集成斑块的能力，尤其是在长形式的情况下。淀粉样斑块在脑中的积累最终导致神经元细胞死亡。与这种类型的神经退化相关的身体症状是阿尔茨海默氏病的特征。使用利用Aβ特异性抗体的免疫染色技术能够最可靠地揭示AD脑中斑块的存在(Hyman等，ProcNatlAcadSciUSA92:3586-3590(1995))。两种最常用的抗体(3D6和10D5)识别N端Aβ表位(分别在第1-5位和第3-7位残基内)(Hyman等，(1995)，同上；Bard等，ProcNatlAcadSciUSA100:2023-2028(2003))。已报道，针对Aβ的C端部分的一些抗体结合于淀粉样沉积物。然而，这样的研究通常使用福尔马林或聚甲醛固定的石蜡包埋的组织，所述组织通常经受了甲酸或其他攻击性试剂的攻击性预处理，以暴露出Aβ的C端表位(Murphy等，AmJPathol144:1082-1088(1994)；Kida等，NeurosciLet193:105-108(1995)；Fukumoto等，AmJPathol148:259-265(1996)；Mann等，AmJPathol148:1257-1266(1996)；Tekirian等，NeurobiolAging17:249-257(1996)；Lippa等，ArchNeurol56:1111-1118(1999)；Schwab等，ExpNeurol161:527-534(2000)；Axelsen等，MolImmunol46:2267-2273(2009))。因此，这些研究不一定在生理上与斑块相关。Wilcock等，J.Neurosci26:5340-5346(2006)和Wilcock等，JNeurosci24:6144-6151(2004)报道了在分别接受2H6抗体(抗Aβ33-40抗体；末端特异性的小鼠IgG2b同种型)或2286抗体(抗Aβ28-40抗体；末端特异性的小鼠IgG1同种型)注射的Tg2576小鼠中斑块减少。已报道，数种其他C端抗体，包括16C11、2G3和21F12，在阿尔茨海默氏病的PDAPP动物模型中不能结合或清除斑块(参见US20060257396)。已报道，266抗体(抗Aβ16-23抗体)主要结合于可溶形式的Aβ，并且显示出几乎不结合于斑块。关于该抗体从被治疗的小鼠的脑清除斑块的能力，这样的研究也已报道了冲突的结果。DeMattos等(ProcNatlAcadSciUSA98:8850-8855(2001))报道了外周施用于PDAPP小鼠的266抗体清除斑块但不结合于斑块或进入脑中，而是通过捕获外周中的可溶性Aβ，并通过产生使得Aβ从脑迁移出去并进入血浆中的浓度梯度来降低脑的斑块载量(外周池假说(peripheralsinkhypothesis))。然而，在用266抗体免疫的PDAPP小鼠中的较晚研究报道了斑块没有减少(Seubert等，NeurodegenerDis5:65-71(2008))。第三项研究报道了使用266抗体短期治疗PDAPP小鼠逆转了它们的认知缺陷而不影响斑块，提出266抗体结合并中和来自于脑的可溶性神经毒性Aβ物质(Dodart等，NatNeurosci5:452-457(2002))。US20060257396报道了266抗体和结合于Aβ中的中间区表位的两种其他抗体(18G11和22D12)在PDAPP转基因动物模型中既不结合也不清除斑块。
技术实现思路
本专利技术提供了针对Aβ的C端和中央表位并且相对于弥散斑(diffuseplaque)来说优先结合紧密斑(compactplaque)的抗体。本专利技术还提供了治疗患者以减少或消除Aβ的紧密斑的存在和相关症状的方法。一方面，本专利技术提供了一种治疗被诊断患有中期或晚期阿尔茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表位结合并且相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案。在某些情况下，所述患者已被诊断患有中期阿尔茨海默氏病。在某些情况下，所述患者已被诊断患有晚期阿尔茨海默氏病。另一方面，本专利技术提供了一种治疗被诊断患有阿尔茨海默氏病并且紧密斑的比例相对于弥散斑的比例更高的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表位结合并且相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案。在某些情况下，紧密斑的比例为总斑块的至少40％。在某些情况下，紧密斑相对于弥散斑的比例通过正电子发射断层(PET)扫描来测定。在某些情况下，所述PET扫描包括检测选自[18F]AV-14、[18F]AV-144、[11C]AZD2995、[18F]-AZD4694和[18F]-SMIBR-W372的PET配体。另一方面，本专利技术提供了一种治疗被诊断患有阿尔茨海默氏病并具有癫痫发作症状的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种治疗被诊断患有中期或晚期阿尔茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12‑43位残基内的表位结合并相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2012.07.03 US 61/667,8911.一种治疗被诊断患有中期或晚期阿尔茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括向所
述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表位结合并相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗
体的有效方案。
2.权利要求1的方法，其中所述患者已被诊断患有中期阿尔茨海默氏病。
3.权利要求1的方法，其中所述患者已被诊断患有晚期阿尔茨海默氏病。
4.权利要求1的方法，其中所述抗体对Aβ的中央表位具有特异性。
5.权利要求4的方法，其中所述抗体是266抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，15C11
抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者22D12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式。
6.权利要求5的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区互补决定区(CDR)，其中CDR
L1包含SEQIDNO：4的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：5的氨基酸序列，并且CDRL3包
含SEQIDNO：6的氨基酸序列，以及三个重链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：7的氨
基酸序列，CDRH2包含SEQIDNO：8的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：9的氨基酸
序列。
7.权利要求5的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQID
NO：14的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：14的第55至61位残基的氨
基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：14的第94至101位残基的氨基酸序列，以及三个重链
可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：15的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含
SEQIDNO：15的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：15的第99至
101位残基的氨基酸序列。
8.权利要求5的方法，其中所述抗体包含：22D12的三个轻链可变区CDR和22D12的三个
重链可变区CDR。
9.权利要求1的方法，其中所述抗体对Aβ的C端表位具有特异性。
10.权利要求9的方法，其中所述抗体是2G3抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，14C2
抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者21F12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式。
11.权利要求10的方法，其中所述抗体包含：2G3的三个轻链可变区互补决定区(CDR)和
2G3的三个重链可变区CDR。
12.权利要求10的方法，其中所述抗体包含：14C2的三个轻链可变区CDR和14C2的三个
重链可变区CDR。
13.权利要求10的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：3的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：3的第55至61位残基的氨
基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：3的第94至102位残基的氨基酸序列，以及三个重链
可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：2的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含SEQ
IDNO：2的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：2的第99至106位残
基的氨基酸序列。
14.权利要求1至13任一项的方法，其中所述抗体是嵌合抗体或人源化抗体。
15.权利要求14的方法，其中所述抗体是人源化抗体。
16.权利要求14的抗体，其中所述抗体是IgG1亚型。
17.一种治疗被诊断患有阿尔茨海默氏病并且相对于总斑块来说紧密斑的比例比弥散
斑的比例更高的患者的方法，所述方法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表
位结合并且相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案。
18.权利要求17的方法，其中紧密斑的比例为总斑块的至少40％。
19.权利要求17的方法，其中紧密斑和弥散斑相对于总斑块的比例通过正电子发射断
层(PET)扫描来测定。
20.权利要求19的方法，其中PET扫描包括检测选自[18F]AV-14、[18F]AV-144、[11C]
AZD2995、[18F]-AZD4694和[18F]-SMIBR-W372的PET配体。
21.权利要求17的方法，其中所述抗体对Aβ的中央表位具有特异性。
22.权利要求21的方法，其中所述抗体是266抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，
15C11抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者22D12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形
式。
23.权利要求22的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区互补决定区(CDR)，其中
CDRL1包含SEQIDNO：4的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：5的氨基酸序列，并且CDR
L3包含SEQIDNO：6的氨基酸序列，以及三个重链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：7
的氨基酸序列，CDRH2包含SEQIDNO：8的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：9的氨
基酸序列。
24.权利要求22的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：14的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：14的第55至61位残基的
氨基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：14的第94至101位残基的氨基酸序列，以及三个重
链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：15的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含
SEQIDNO：15的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：15的第99至
101位残基的氨基酸序列。
25.权利要求22的方法，其中所述抗体包含：22D12的三个轻链可变区CDR和22D12的三
个重链可变区CDR。
26.权利要求17的方法，其中所述抗体对Aβ的C端表位具有特异性。
27.权利要求26的方法，其中所述抗体是2G3抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，14C2
抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者21F12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式。
28.权利要求27的方法，其中所述抗体包含：2G3的三个轻链可变区互补决定区(CDR)和
2G3的三个重链可变区CDR。
29.权利要求27的方法，其中所述抗体包含：14C2的三个轻链可变区CDR和14C2的三个
重链可变区CDR。
30.权利要求27的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：3的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：3的第55至61位残基的氨
基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：3的第94至102位残基的氨基酸序列，以及三个重链
可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：2的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含SEQ
IDNO：2的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：2的第99至106位残
基的氨基酸序列。
31.权利要求17至30任一项的方法，其中所述抗体是嵌合抗体或人源化抗体。
32.权利要求31的方法，其中所述抗体是人源化抗体。
33.权利要求31的方法，其中所述抗体是IgG1亚型。
34.一种治疗被诊断患有阿尔茨海默氏病并具有癫痫发作症状的患者的方法，所述方
法包括向所述患者施用与Aβ的第12-43位残基内的表位结合并且相对于弥散斑来说优先结
合紧密斑的抗体的有效方案。
35.权利要求34的方法，其中总淀粉样斑块负担降低并且癫痫发作症状减轻。
36.权利要求34的方法，其中所述抗体对β-淀粉样肽的中央表位具有特异性。
37.权利要求36的方法，其中所述抗体是266抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，
15C11抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者22D12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形
式。
38.权利要求37的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区互补决定区(CDR)，其中
CDRL1包含SEQIDNO：4的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：5的氨基酸序列，并且CDR
L3包含SEQIDNO：6的氨基酸序列，以及三个重链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：7
的氨基酸序列，CDRH2包含SEQIDNO：8的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：9的氨
基酸序列。
39.权利要求37的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：14的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：14的第55至61位残基的
氨基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：14的第94至101位残基的氨基酸序列，以及三个重
链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：15的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含
SEQIDNO：15的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：15的第99至
101位残基的氨基酸序列。
40.权利要求37的方法，其中所述抗体包含：22D12的三个轻链可变区CDR和22D12的三
个重链可变区CDR。
41.权利要求34的方法，其中所述抗体对Aβ的C端表位具有特异性。
42.权利要求41的方法，其中所述抗体是2G3抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，14C2
抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者21F12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式。
43.权利要求42的方法，其中所述抗体包含：2G3的三个轻链可变区互补决定区(CDR)和
2G3的三个重链可变区CDR。
44.权利要求42的方法，其中所述抗体包含：14C2的三个轻链可变区CDR和14C2的三个
重链可变区CDR。
45.权利要求42的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：3的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：3的第55至61位残基的氨
基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：3的第94至102位残基的氨基酸序列，以及三个重链
可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：2的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含SEQ
IDNO：2的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：2的第99至106位残
基的氨基酸序列。
46.权利要求34至45任一项的方法，其中所述抗体是嵌合抗体或人源化抗体。
47.权利要求46的方法，其中所述抗体是人源化抗体。
48.权利要求46的方法，其中所述抗体是IgG1亚型。
49.一种治疗被诊断患有阿尔茨海默氏病的患者的方法，所述方法包括：
(a)向所述患者施用相对于弥散斑来说优先结合紧密斑的抗体的有效方案，其中所述
抗体对Aβ的中央或C端表位具有特异性；以及
(b)使用PET扫描监测所述患者的脑中紧密斑的一种或多种特性。
50.权利要求49的方法，其中使用放射性示踪剂PiB来鉴定所述紧密斑的一种或多种特
性。
51.权利要求49的方法，其中所述一种或多种特性包括相对于以前的PET扫描来说一个
或多个紧密斑的尺寸减小。
52.权利要求49的方法，其中所述抗体对Aβ的中央表位具有特异性。
53.权利要求52的方法，其中所述抗体是266抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，
15C11抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形式，或者22D12抗体或其嵌合、人源化或镶嵌的形
式。
54.权利要求53的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区互补决定区(CDR)，其中
CDRL1包含SEQIDNO：4的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：5的氨基酸序列，并且CDR
L3包含SEQIDNO：6的氨基酸序列，以及三个重链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：7
的氨基酸序列，CDRH2包含SEQIDNO：8的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：9的氨
基酸序列。
55.权利要求53的方法，其中所述抗体包含：三个轻链可变区CDR，其中CDRL1包含SEQ
IDNO：14的第24至39位残基的氨基酸序列，CDRL2包含SEQIDNO：14的第55至61位残基的
氨基酸序列，并且CDRL3包含SEQIDNO：14的第94至101位残基的氨基酸序列，以及三个重
链可变区CDR，其中CDRH1包含SEQIDNO：15的第26至35位残基的氨基酸序列，CDRH2包含
SEQIDNO：15的第50至66位残基的氨基酸序列，并且CDRH3包含SEQIDNO：15的第99至
101位残基的氨基酸序列。
56.权利要求53的方法，其中所述抗体包含：22D12的三个轻链可变区CDR和22D12的三
个重链可变区CDR。
57.权利要求49的方法，其中所述抗体对Aβ的C端表位具有特异性。
58.权利要求57的方法，其中所述抗体是...

【专利技术属性】
技术研发人员：曼纽尔·布蒂尼，陈明，希拉·加尔道伊，
申请(专利权)人：杨森阿尔茨海默氏症免疫治疗公司，惠氏有限责任公司，
类型：发明
国别省市：爱尔兰;IE