一种用于抑制流感病毒感染的制剂制造技术

本发明专利技术公开了一种用于抑制流感病毒感染的制剂。本发明专利技术提供了一种制剂在如下(1)或(2)中的应用：(1)制备用于抑制流感病毒感染的产品；(2)用于抑制流感病毒感染；所述制剂主要由表没食子儿茶素没食子酸酯、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述表没食子儿茶素没食子酸酯、所述单宁酸和所述黄芪多糖的质量配比为(0.5-1.0)：(0.5-1.0)：(0.5-1.5)。本发明专利技术所提供的复合配方制剂的细胞毒性不高于已经获得安全许可的对照样品利巴韦林，较为安全。在安全的使用浓度下，预防性使用本发明专利技术所提供的制剂可以有效的抑制甲型H1N1流感病毒感染，具有进一步研发为流感病毒感染抑制剂的商业价值。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物
，涉及一种用于抑制流感病毒感染的制剂。
技术介绍
流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染，也是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是：急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期，所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起，可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型，甲型病毒经常发生抗原变异，感染性强，传播迅速，极易发生大范围流行。甲型H1N1也是甲型流感病毒的一种。本病具有自限性，但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发症而导致死亡。人类面临病毒性传染病的现实和潜在威胁日益严峻，人类应对突发传染病的防控压力日感倍增，但愈来愈多的实际情况表明：当病毒发生突变或出现新型病毒而导致传染病疫情暴发时，原来的特异性防治药物难以发挥应有防控效果，甚至毫无疗效，而人类认知水平和科研周期的限制，又使具有显著疗效的新一代特异性预防和治疗药物难以在短时间内推出，极易导致疫情的迅速扩散和局部地区的灾难性暴发，不仅对当地的公共卫生服务造成极大的破坏，同时也对社会的政治和经济造成巨大的冲击。因此，依据病毒的基本生物学特性，针对病毒侵染宿主细胞的共性靶点，研发新型病毒感染抑制剂，对于应对病毒性传染病疫情的持续挑战具有重要意义。植物化合物被称为“第七类营养素”，广泛存在于日常食物，是一类对人体健康具有特殊作用的非营养性化学物质。相关研究发现部分植物化合物具有抑制病毒感染的生物活性，并逐渐成为抗病毒研究的热点之一。初步的研究结果显示：植物化合物的生物学效应主要表现在其对细胞膜生物学特性的影响和局部微环境平衡的改变等方面，部分植物化合物通过直接嵌入细胞膜脂质双层结构，改变细胞膜正常的功能性流动和电势电位差，进而发挥一定的生物学效应。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种抑制流感病毒感染的制剂及其应用。本专利技术所提供的应用具体为一种制剂在如下(1)或(2)中的应用：(1)制备用于抑制流感病毒感染的产品；(2)用于抑制流感病毒感染；所述制剂主要由表没食子儿茶素没食子酸酯、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述表没食子儿茶素没食子酸酯、所述单宁酸和所述黄芪多糖的质量配比为(0.5-1.0)：(0.5-1.0)：(0.5-1.5)。在本专利技术的一个实施例中，所述用于抑制病毒感染的制剂具体由表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、所述单宁酸和所述黄芪多糖的质量配比为1：1：1.5。在本专利技术中，所述抑制流感病毒感染为如下(a)或(b)：(a)预防流感病毒感染；(b)在与流感病毒同时作用于宿主或宿主细胞时，抑制所述流感病毒对所述宿主或所述宿主细胞的感染。更加具体的，在本专利技术的实施例中，所述制剂对所述流感病毒感染的抑制作用具体体现为：以哺乳动物细胞作为流感病毒感染对象，在流感病毒感染细胞的同时或者在流感病毒感染细胞前施用所述制剂，所述制剂对流感病毒的半数抑制浓度与抑制病毒感染的阳性对照药物相比显著降低。所述阳性对照药物具体为利巴韦林(Ribavirin)。在本专利技术中，所述哺乳动物细胞(或(b)中所述的宿主细胞)具体为犬肾细胞(MDCK细胞)。在本专利技术中，所述流感病毒为甲型流感病毒。更加具体的，所述甲型流感病毒为H1N1亚型流感病毒，如H1N1亚型流感病毒A/Beijing/501/2009(H1N1)株。本专利技术以甲型H1N1流感病毒为实验对象，采用观察细胞病变的方法，在不同的感染条件下，分别分析了表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)、单宁酸和黄芪多糖这三种植物化合物单体及其混合制剂抑制流感病毒感染的规律和特点。结果证实：本发明所提供的三种植物化合物单体和复合配方混合物的细胞毒性均不高于已经获得安全许可的对照样品利巴韦林，较为安全。在安全的使用浓度下，预防性使用EGCG和单宁酸等植物化合物单体以及植物提取物复合配方混合物，可以有效的抑制甲型H1N1流感病毒的感染。本专利技术所提供的制剂具有进一步研发为流感病毒感染抑制剂的商业价值。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。下述实施例中涉及的定量实验数据以均数±标准差(±s)表示，采用SPSS17.0统计软件运用单因素水平方差分析的方法对组间比较数据进行统计处理。细胞株：犬肾细胞(MDCK细胞)为ATCC产品，编号为ATCCCCL-34。细胞按常规方法传代培养。病毒：甲型H1N1流感病毒(A/Beijing/501/2009(H1N1)株)，记载于“XiaopingKang,TaoJiang,YongqiangLi,FangLin,HongLiu,GuohuiChang,QingyuZhu,EdeQin,ChengfengQinandYinhuiYang.Aduplexreal-timeRT-PCRassayfordetectingH5N1avianinfluenzavirusandpandemicH1N1influenzavirus.VirologyJournal,2010,7:113”一文，公众可从申请人处获得，仅用于重复本专利技术实验使用。培养液：1)、细胞生长培养液：以DMEM培养基(Glibo公司产品)为母液，分别加入10％(体积分数)胎牛血清(Sigma公司产品)，0.2mg/ml谷氨酰胺(Glibo公司产品)，100U/ml青霉素，链霉素。2)、细胞维持培养液，胎牛血清含量为2％(体积分数)，其余与1)均相同。3)、病毒增殖培养液：加入2μg/mlTPCK-Trypsin(Sigma公司产品)，其余成分与1)中的细胞生长培养液相同。表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)：Sigma公司产品(分析纯度>95％)，产品编号为E4143，CAS#989-51-5。单宁酸(Tannin)：Sigma公司产品(分析纯度>99％)，产品编号为V900190；CAS#1401-55-4。黄芪多糖(APS)：上海金穗生物科技有限公司产品(2-(Chloromethyl)-4-(4-nitrophenyl)-1,3-thiazole)(分析纯度>70％)，产品编号为JS11328；CAS#89250-26-0。阳性对照本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种制剂在如下(1)或(2)中的应用：(1)制备用于抑制流感病毒感染的产品；(2)用于抑制流感病毒感染；所述制剂主要由表没食子儿茶素没食子酸酯、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述表没食子儿茶素没食子酸酯、所述单宁酸和所述黄芪多糖的质量配比为(0.5‑1.0)：(0.5‑1.0)：(0.5‑1.5)。

【技术特征摘要】
1.一种制剂在如下(1)或(2)中的应用：
(1)制备用于抑制流感病毒感染的产品；
(2)用于抑制流感病毒感染；
所述制剂主要由表没食子儿茶素没食子酸酯、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述
表没食子儿茶素没食子酸酯、所述单宁酸和所述黄芪多糖的质量配比为(0.5-1.0)：
(0.5-1.0)：(0.5-1.5)。
2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述制剂由表没食子儿茶素没食
子酸酯、单宁酸和黄芪多糖混合而成；所述表没食子儿茶素没食子酸酯、所述单宁...

【专利技术属性】
技术研发人员：常国辉，刘京梅，杨益，黄留玉，罗丽晓，李瑾惠，罗彦军，孙走南，唐玥，苏文莉，张洁，刘璇，
申请(专利权)人：中国人民解放军疾病预防控制所，
类型：发明
国别省市：北京;11