一种耐高糖酵母菌及其应用制造技术

技术编号:13056348 阅读:65 留言:0更新日期:2016-03-23 19:07
本发明专利技术涉及微生物发酵技术领域,具体涉及一种耐高糖酵母菌及其应用。所述的耐高糖酵母菌为蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomyces mellis)LGL-1,其保藏编号为CCTCC No.M2015545。所述的耐高糖酵母菌延滞期相对较短,对数生长期和平衡期较长,运用于实际生产中可节约成本;特别是其具有很好的抗逆性,如可耐受浓度为70%(w/v)的总糖,耐受浓度为12%(v/v)的酒精,当pH为2.5时,所述的耐高糖酵母菌可正常快速的生长,耐酸能力较强。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微生物发酵
,具体涉及。
技术介绍
酵母是一种肉眼看不见的微小单细胞微生物,能将糖发酵转化成酒精和二氧化 碳,是一种天然发酵剂,分布于整个自然界,它有自己的生命现象,是一种典型的兼性厌氧 微生物,在有氧气和没有氧气存在的条件下都能够存活。目前,已知的酵母菌已有500多 种,共有56个属,分别属于半知菌亚门、子囊菌亚门及担子菌亚门。 随着经济的发展,酒精工业生产的新趋势是浓醪发酵,该发酵工艺最大的特点是 生成的酒精浓度较高,同时醪液中的糖浓度也高。酒精生产过程中,酒精度的提高可以降低 蒸馏时的能耗,发酵时应尽可能地提高成熟醪的酒精度。而酒精含量对酵母菌的正常生长 影响很大,在乙醇浓度超过12%左右时,普通酵母发酵会受到不同程度的抑制。不能在含糖 浓度高的条件下良好发酵的菌株,其产酒率必然大受影响。所以有必要筛选出、高糖耐受性 较高的菌株,这样可以很好的为酒精工业的生产服务。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是,为了克服现有技术中已知酵母菌的抗逆性不强的 缺点,提供一种耐尚糖酵母菌。 本专利技术所要解决的上述技术问题通过以下技术方案予以实现: -种蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL_l,其保藏编号为CCTCC No.M2015545。该菌株已于2015年9月15日保藏于中国典型培养物保藏中心(地址是中 国湖北省武汉市珞珈山武汉大学)。 本专利技术所述的蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1是专利技术人通过大 量的实验筛选出来的新的具有优异抗逆性能的酵母菌株,所述菌株能在现有酵母菌不能发 酵的条件下(如高糖、高酒精、高酸性条件)发酵生产酒精,具有了新的突破。因此,本专利技术 新菌株的应用可大幅提高酿酒工业的产酒率。 所述蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1的主要形态特征如下:细 胞形态特征为圆形,多端出芽明显,进行无性生殖;菌落特征为在固体培养基中菌落凸起偏 小、生长较慢、乳白色、表面光滑、偏干、菌落边缘整齐、平板有酒香。 所述的蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1通过如下方法筛选得 到: S1.将稀释10~1000倍的蜂蜜倒入装有麦芽汁琼脂培养基的培养皿中,在25~ 30°C的恒温条件下培养1. 5~3d,观察菌株的生长情况,挑取单菌落,于显微镜下观察,根 据酵母菌的形态特征,筛选出酵母菌;S2.将经步骤S1.筛选出来的酵母菌,于装有含糖浓度为68~75% (w/v)麦芽汁 琼脂培养基的培养皿中划线,在25~30°C的恒温条件下培养1. 5~3d,并观察菌株的生长 情况;将长出的菌株挑取单菌落划线分离1~3次,直至分离出单菌落;再将单菌落置于显 微镜下观察,根据蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL_l的形态特征,筛选出纯 的蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL_l〇 优选地,S1中所述的蜂蜜为百花蜜。 优选地,S1中的培养条件为在28°C的恒温条件下培养2d。 优选地,S2中所述麦芽汁琼脂培养基通过如下方法制备得到:将葡萄糖、麦芽汁 粉、去离子水,以及琼脂粉于沸水浴中溶解并不断搅拌即得。 更优选地,S2中所述麦芽汁琼脂培养基的含糖浓度为70% (w/v)。 最优选地,S2中所述的含糖浓度为70% (w/v)的麦芽汁琼脂培养基通过如下方法 制备得到: 称取葡萄糖138g,麦芽汁粉13g,去离子水100mL,琼脂粉2g,于沸水浴中溶解并不 断搅拌即得。 优选地,S2中的培养条件为在28°C的恒温条件下培养2d。 所述的蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL_l在酿酒生产中的应用。 所述的蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL_l在生产工业酒精中的应 用。 有益效果:本专利技术提供了一株新颖的酵母菌菌株,其延滞期相对较短,对数生长 期和平衡期较长,运用于实际生产中可节约成本,尤其是所述菌株具有很好的抗逆性。实 施例数据显示所述菌株的延滞期为22h左右,对数生长期为20h左右,平衡期为15h左右; 可耐受浓度为70 % (w/v)的总糖,耐受浓度为12 % (v/v)的酒精,当pH为2. 5时,所述的 耐高糖酵母菌可正常快速的生长,耐酸能力较强;实施例数据还显示所述的蜂蜜接合酵母 (Zygosaecharomycesmellis)LGL_l能在高浓度糖环境下发酵产生酒精,而现有技术常用 的安琪葡萄酒活性干酵母BV818及安琪果酒专用酵母SY在同样的高糖环境下基本没有发 酵能力。【附图说明】 图1为本专利技术所菌株的生长曲线。 图2为菌株BV818的生长曲线。 图3为菌株SY的生长曲线。【具体实施方式】 以下结合具体实施例来进一步解释本专利技术,但实施例对本专利技术不做任何形式的限 定。 实施例 1 蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1 的筛选 S1.在超净工作台中,将稀释100倍的百花蜜倒入麦芽汁琼脂培养基的培养皿中, 在28°C的恒温培养箱中进行培养2d,观察菌株的生长情况,挑取单菌落,于显微镜下观察, 根据酵母菌的形态特征,筛选出酵母菌; S2.将经步骤S1.筛选出来的酵母菌,于装有含糖浓度为70% (w/v)的麦芽汁 琼脂培养基的培养皿中划线,在28°C的恒温培养箱中进行培养2d,并观察菌株的生长情 况;将长出的菌株挑取单菌落划线分离3次,直至分离出单菌落;再将单菌落置于显微镜下 观察,筛选出具有如下形态特征的菌落即为蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis) LGL-1,细胞形态特征为圆形,多端出芽明显,进行无性生殖;菌落特征为在固体培养基中菌 落凸起偏小、生长较慢、乳白色、表面光滑、偏干、菌落边缘整齐、平板有酒香。所述的含糖浓 度为70% (w/v)的麦芽汁琼脂培养基通过如下方法制备得到: 称取葡萄糖138g,麦芽汁粉13g,去离子水100mL,琼脂粉2g,于沸水浴中溶解并不 断搅拌即得。 实施例2蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1抗逆性实验 传代培养:将蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1在装有含糖浓度 为70% (w/v)麦芽汁琼脂培养基(制备方法同实施例1)的培养皿上划线,于28°C的恒温 培养箱中进行培养2d,进行传代培养,并观察菌株的生长情况,重复上述实验步骤,直至筛 选出纯蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomycesmellis)LGL-1为止,并将传代得到的菌株于含 糖浓度为70% (w/v)的麦芽汁琼脂培养基的试管中进行保存。 扩大培养:上述传代培养得到的菌株挑取两环,于盛有糖浓度为70% (w/v)的麦 芽汁培养基的试管中,于28°C的恒温培养箱中培养2d;将培养的菌悬液倒入盛有糖浓度为 70% (w/v)的麦芽汁培养基的锥形瓶中,于28°C的恒温培养箱中继续培养2d,待用。进行 下述抗逆性测试。 同时,将安琪葡萄酒活性干酵母BV818和安琪果酒专用酵母SY活化后按照上述扩 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种蜂蜜接合酵母(Zygosaecharomyces mellis)LGL‑1,其保藏编号为CCTCC No.M 2015545。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:刘功良白卫东赵文红高苏娟赵翾朱宝生姚金喜
申请(专利权)人:仲恺农业工程学院
类型:发明
国别省市:广东;44

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