一种提取DNA的方法和解离染色质的方法以及高氯酸盐的用途技术

技术编号:13006233 阅读:119 留言:0更新日期:2016-03-10 18:06
本发明专利技术提供了一种解离染色质的方法,该方法包括:将含有染色质的样品与解离剂混合;其中,所述解离剂含有高氯酸锂。本发明专利技术还提供了一种提取DNA的方法,其中,该方法包括如下步骤:(1)将含有染色质的样品与解离剂混合均匀,得到解离后的物料;(2)将所述解离后的物料与蛋白抽提液混合均匀,分离得到蛋白抽提后的上清液;(3)将所述蛋白抽提后的上清液与DNA沉淀剂混合,得到DNA沉淀;其中,所述解离剂含有高氯酸锂。本发明专利技术还提供了一种高氯酸盐在提取DNA中的用途,其中,所述高氯酸盐为高氯酸锂。本发明专利技术的方法具有重复性好,稳定性高的优点,同时避免了蛋白酶K法需要较高温度加热及长时间消化的劣势。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及生物
,具体地,涉及一种解离染色质的方法、一种提取DNA的方法和高氯酸盐的用途。
技术介绍
染色质是遗传物质的载体。染色质是指间期细胞核内由DNA、组蛋白、非组蛋白及少量RNA组成的线性复合结构,是间期细胞遗传物质存在的形式。核小体是组成染色质的基本组成单位,由基因组DNA和5种组蛋白H1、H2A、H2B、H3和H4共同组成。2分子的H2A、H2B、H3和H4共同构成八聚体的核心组蛋白,DNA双螺旋缠绕在这一核心上形成核小体的核心颗粒。核心颗粒间由DNA和组蛋白H1构成的连接区而连接成串珠样结构。在哺乳动物基因组DNA的提取环节中,无论是经典提取方法(酚抽提法、异丙醇沉淀法和甲酰胺裂解法)还是后期改良的方法,通常都是利用表面活性剂,如十二烷基硫酸钠(SDS)来裂解细胞,利用蛋白酶K来降解核小体中的组蛋白,从而实现基因组DNA的分离。然而,由于利用蛋白酶K对组蛋白进行酶解消化,经典方法不仅需要加热设备(如水浴锅),而且增加了操作步骤,环节繁琐,实本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种解离染色质的方法,该方法包括:将含有染色质的样品与解离剂混合;其特征在于,所述解离剂含有高氯酸锂。

【技术特征摘要】
1.一种解离染色质的方法,该方法包括:将含有染色质的样品与解离
剂混合;其特征在于,所述解离剂含有高氯酸锂。
2.根据权利要求1所述的方法,其中,将含有染色质的样品与解离剂
混合后,高氯酸锂的终浓度为0.1-3.9mol/L,优选为0.25-3.5mol/L,更优选
为2-3mol/L。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其中,所述解离剂含有高氯酸锂
的水溶液;所述高氯酸锂的水溶液中,高氯酸锂的浓度不低于0.2mol/L且不
高于饱和浓度。
4.根据权利要求1所述的方法,其中,所述含有染色质的样品中含有
裂解液;所述裂解液含有表面活性剂。
5.一种提取DNA的方法,所述DNA在提取前存在于染色质中;其中,
该方法包括如下步骤:
(1)将含有染色质的样品与解离剂混合均匀,得到解离后的物料;
(2)将所述解离后的物料与蛋白抽提液混合均匀,分离得到蛋白抽提
后的上清液;
(3)将所述蛋白抽提后的上清液...

【专利技术属性】
技术研发人员:陆聪儿董伟仁杜雯林项春生戴玲华
申请(专利权)人:杭州易文赛生物技术有限公司河北易文赛生物技术有限公司
类型:发明
国别省市:浙江;33

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