本发明专利技术涉及急性心肌梗死相关基因SERPINB13及其应用。发明专利技术人通过研究发现SERPINB13基因在急性心肌梗死患者外周血中高表达，并设计了SERPINB13的干扰RNA，所述干扰RNA能有效抑制SERPINB13基因的表达，可用于制备治疗急性心肌梗死药物。本发明专利技术为临床诊治AMI提供了新的解决方案，具有重要的应用价值。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及急性心肌梗死相关基因SERPINB13及其应 用。
技术介绍
近年来，随着生活环境和生活方式的改变及人口老龄化进程的加快，冠状动脉粥 样硬化性心脏病己成为严重危及人类健康的疾病之一。特别是冠状动脉粥样硬化性心脏病 的最严重临床类型--急性心肌梗死（AcuteMyocardialInfarction，AMI)。如何能降低 冠心病及急性心肌梗死的发生率和死亡率，提高冠心病患者的生活质量，减少个人和社会 的经济负担，己成为医学界的一大难题。随着人类基因组计划完成和基因芯片技术的发展， 许多单基因疾病的致病基因被发现，并应用到疾病的诊断与治疗当中。而AMI作为一种受 多种遗传与环境因素影响的疾病，遗传学在AMI发病中的作用仍未明确。具体是哪些基因， 通过何种细胞过程，有哪些通路参与了AMI过程尚未明确。 本研究通过AMI的外周血RNA表达谱差异分析，来研究具体有哪些基因参与了AMI 过程，为将来AMI早期基因诊断奠定基础。专利技术人对6例急性心肌梗死病例组和6对照组 血液样本进行高通量测序，结合生物信息学方法进行基因筛选，在差异表达明显的基因中 挑选出高表达的候选基因SERPINB13,现有研究中并没有SERPINB13和急性心肌梗死相关 的报道，进一步，专利技术人进行了分子验证，证实了SERPINB13在急性心肌梗死组中高表达， SERPINB13抑制剂可用于制备治疗急性心肌梗死药物。本专利技术提供了一种新的急性心肌梗 死的监测治疗靶点，具有重要的临床应用价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种急性心肌梗死诊断制剂，所述急性心肌梗死诊断制剂 检测SERPINB13基因和/或SERPINB13基因的表达产物。 进一步，所述急性心肌梗死诊断制剂采用荧光定量PCR试剂盒、基因芯片、免疫 方法检测急性心肌梗死组织或外周血中SERPINB13基因的表达，优选的，所述的荧光定 量PCR试剂盒中含有一对特异性扩增SERPINB13基因的引物；所述的基因芯片中包括与 SERPINB13基因的核酸序列杂交的探针，更优选的，荧光定量PCR试剂盒内含有特异性检测 SERPINB13基因的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQIDN0.9，下游引物序列为SEQ IDNO. 10 〇 进一步，直接检测急性心肌梗死组织或外周血中SERPINB13基因和/或基因的表 达产物。 进一步，所述的急性心肌梗死的诊断制剂采用免疫方法检测急性心肌梗死组织或 外周血中SERPINB13基因的表达产物，优选的，所述免疫方法为ELISA检测和/或胶体金检 测。 进一步，所述检测SERPINB13表达产物的ELISA法为使用ELISA检测试剂盒。所 述试剂盒中的抗体可采用市售的SERPINB13单克隆抗体。进一步，所述的试剂盒包括：包被SERPINB13单克隆抗体的固相载体，酶标抗体，酶的底物，蛋白标准品，阴性对照品，稀释液， 洗涤液，酶反应终止液等。 进一步，所述检测SERPINB13蛋白的胶体金法为使用检测试剂盒，所述的抗体可 采用市售的SERPINB13单克隆抗体。进一步，所述的胶体金检测试剂盒采用胶体金免疫层 析技术或胶体金渗滤法。进一步，所述的胶体金检测试剂盒硝酸纤维素膜上的检测区（T) 喷点有抗SERPINB13单克隆抗体、质控区（C)喷点有免疫球蛋白IgG。 本专利技术的目的在于提供上述急性心肌梗死诊断制剂在制备急性心肌梗死诊断工 具中的应用。 本专利技术的目的在于提供一种治疗急性心肌梗死的制剂，所述制剂中含有抑制 SERPINB13基因的转录或表达的试剂或化合物。 进一步，所述治疗急性心肌梗死的制剂中含有激活SERPINB13的抑制基因、激活 抑制SERPINB13表达的蛋白、导入抑制SERPINB13转录或表达的siRNA、激活促进SERPINB13 mRNA降解的microRNA、导入促进SERPINB13蛋白降解的分子、抑制促进SERPINB13表达的 因子及蛋白的表达。 优选的，所述治疗急性心肌梗死的制剂含有下列中的一组或几组siRNA :SEQ ID NO. 1和SEQ ID NO. 2、SEQ ID NO. 3和SEQ ID NO. 4、SEQ ID NO. 5和SEQ ID NO.6。更优选 的，所述治疗急性心肌梗死的制剂含有siRNA序列为SEQ ID NO. 5和SEQ ID NO.6。 本专利技术的目的在于提供上述治疗急性心肌梗死的制剂在制备急性心肌梗死治疗 药物或试剂中的应用。 为实现上述目的，本专利技术首先通过高通量测序结合生物信息学方法筛选到候选基 因SERPINB13基因，进而通过分子细胞生物学方法验证了SERPINB13基因与急性心肌梗死 的关系：SERPINB13基因在外周血中尚表达，与急性心肌梗死具有很好的相关性，可用于制 备急性心肌梗死辅助诊断制剂，具有重要的临床应用价值。 本领域人员熟知抑制基因及其表达产物的表达通常可以采用下述方法中的一种 和/或几种：通过激活目的基因的抑制基因、激活目的基因的抑制基因表达的蛋白、采用RNA干扰技术抑制目的基因表达、激活促进目的基因mRNA降解的microRNA、导入促进目的 基因编码蛋白降解的分子、抑制促进目的基因表达的因子及蛋白的表达。 RNA干扰（RNAi)是指外源性和内源性双链RNA在生物体内诱导同源靶基因的 mRNA特异性降解，导致转录后基因沉默的现象，是一种使用小的双链RNA高效、特异地阻断 体内某种特定基因的表达，促使mRNA降解，使细胞表现出特定基因缺失表型的技术。siRNA 设计完成后可以采用直接合成法或者构建siRNA表达载体，制备好的siRNA可以通过磷酸 I丐共沉淀法、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene法、显微注射或基因枪等机械法、阳离子 脂质体试剂法等途径转染细胞。 荧光定量PCR法是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针，对PCR产物进行标 记跟踪，实时在线监控反应过程，结合相应的软件可以对产物进行分析，计算待测样品模板 的初始浓度。荧光定量PCR的出现，极大地简化了定量检测的过程，而且真正实现了绝对定 量。多种检测系统的出现，使实验的选择性更强。自动化操作提高了工作效率，反应快速、 重复性好、灵敏度高、特异性强、结果清晰。 基因芯片又称为DNA微阵列（DNAmicroarray)，可分为三种主要类型：1)固定在 聚合物基片（尼龙膜，硝酸纤维膜等）表面上的核酸探针或cDNA片段，通常用同位素标记 的靶基因与其杂交，通过放射显影技术进行检测。2)用点样法固定在玻璃板上的DNA探针 阵列，通过与荧光标记的靶基因杂交进行检测。3)在玻璃等硬质表面上直接合成的寡核苷 酸探针阵列，与荧光标记的靶基因杂交进行检测。基因芯片作为一种先进的、大规模、高通 量检测技术，应用于疾病的诊断，其优点有以下几个方面：一是高度的灵敏性和准确性；二 是快速简便；二是可同时检测多种疾病。 本专利技术的目的在于提供一种检测急性心肌梗死的基因检测试剂盒，所述试剂盒检 测基因SERPINB13,采用特异的上游引物和下游引物，上游引物序列为SEQIDN0. 9,下游引 物序列为SEQIDNO. 10。 进一步，该PCR试剂盒适合于目本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种急性心肌梗死诊断制剂，其特征在于，所述急性心肌梗死诊断制剂检测SERPINB13基因和/或SERPINB13基因的表达产物。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：任静，王晓云，杨承刚，
申请(专利权)人：北京泱深生物信息技术有限公司，
类型：发明
国别省市：北京;11
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