本发明专利技术公开了鉴别番鸭蛋的分子标记及其应用。本发明专利技术提供了一种鉴别番鸭蛋的分子标记，该分子标记为如下(1)-(3)中任意一种：(1)SEQ ID No.1的第57-572所示的516bp的DNA片段；(2)SEQ ID No.1的第57-447所示的391bp的DNA片段；(3)SEQ ID No.1的第470-572所示的103bp的DNA片段。利用本发明专利技术的鉴别番鸭蛋的分子标记及鉴别或辅助鉴别鸭蛋是否为番鸭蛋的方法能够快速、准确地筛选出番鸭蛋，提高了番鸭育种的选择效率，加快了育种进程。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及生物
中与鸭蛋种类的鉴别相关的分子标记及其应用，特别涉 及。
技术介绍
番鸭又名麝香鸭、瘤头鸭，原产于中、南美洲热带地区，现在我国江、浙、沪、皖、闽 等地均有分布。番鸭体型呈梭型，大小鉴于鹅和普通家鸭之间，成年公鸭体重3. 0kg，母鸭 1. 8-2. 0kg。该品种耐粗饲，生长快，屠宰率高，皮下脂肪薄，腹脂少，是我国鸭肉和肥肝生产 的主要品种之一。但是，番鸭的产蛋性能较差，年产蛋仅100-110枚。较低繁殖性能决定了 番鸭蛋的价格较普通鸭蛋高，以种蛋的价格为例，一枚番鸭种蛋售价在3. 0元左右，而一枚 家鸭种蛋的价格仅为1. 5-2. 0元。在高价格、高利润的诱使下，一些不法商家存在用普通家 鸭蛋冒充番鸭蛋出售的虚假销售的行为，而仅从蛋的外部特征方面我们又无法区分这两种 鸭蛋，这给不法商家留下了可乘之机，也使得有关部门对这一欺诈行为无法进行有效的监 管。为了维持公平的市场秩序、保护买方市场的合法权益，现需要一种能够快速、准确的方 法来保证有关部门能够对番鸭蛋和家鸭蛋进行高效地鉴别。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何鉴别鸭蛋是否为番鸭蛋。 为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种鉴别番鸭蛋的分子标记，该分子标记 为如下（1)-(3)中任意一种： (1)SEQIDNo. 1 的第 57-572 所示的 516bp的DNA片段； (2)SEQIDNo. 1 的第 57-447 所示的 391bp的DNA片段； (3)SEQIDNo. 1 的第 470-572 所示的 103bp的DNA片段。 本专利技术根据上述鉴别番鸭蛋的分子标记开发了一种鉴别或辅助鉴别离体鸭蛋是 否为番鸭蛋的方法。 上述方法为检测待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中是否含有上述（1)-(3)中任一 所述DNA片段；如果待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中含有（1)-(3)中任意一种DNA片段， 所述鉴别离体鸭蛋为番鸭蛋或候选为番鸭蛋；如果待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中不含有 (1) - (3)中任意一种DNA片段，所述待鉴别离体鸭蛋为非番鸭蛋或候选为非番鸭蛋。 上述方法包括如下步骤：以待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA为模板，采用与SEQID No. 1的第57位上游特异结合的单链DNA为正向引物，与SEQIDNo. 1的第572位下游特异 结合的单链DNA为反向引物，进行扩增，根据得到的扩增产物按照下述方法确定所述待鉴 别离体鸭蛋是否为番鸭蛋： 如果上述待鉴别离体鸭蛋的扩增产物含有所述（1)-(3)中任意一种DNA片段，上 述待鉴别离体鸭蛋为番鸭蛋或为候选为番鸭蛋；如果上述待鉴别离体鸭蛋的扩增产物不含 有所述（1)-(3)中任意一种DNA片段，上述待鉴别离体鸭蛋为非番鸭蛋或为候选为非番鸭 蛋。 其中，所述SEQIDNo. 1的第57位上游不包括SEQIDNo. 1第57位，所述SEQID No. 1的第572位下游不包括SEQIDNo. 1第572位。 上述方法中，所述扩增为PCR扩增。 上述方法中，所述正向引物只要与SEQIDNo. 1的第57位上游特异结合即可， 在本专利技术的实施例中，所述正向引物的序列为SEQIDNo. 1的第1-19位，其序列具体是 5' -CGAAGTCTGTACTTGCAAA-3' ；所述反向引物只要与SEQIDNo. 1的第572位下游特异结 合即可，在本专利技术的实施例中，所述反向引物的序列为与SEQIDNo. 1的第663-683位反向 互补的单链DNA，其序列具体是5' -CTCTGCGCACTCCAAATCTGG-3'。 本专利技术根据上述鉴别番鸭蛋的分子标记还开发了另一种鉴别或辅助鉴别离体鸭 蛋是否为番鸭蛋的方法，包括如下步骤：以待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA为模板，以SEQID No. 1的第1-19位所示的DNA单链为正向引物，与SEQIDNo. 1的第663-683位反向互补的 单链DNA为反向引物，进行PCR扩增，检测PCR扩增产物大小，根据PCR扩增产物大小按照 下述方法确定所述待鉴别离体鸭蛋是否为番鸭蛋： 如果所述待鉴别离体鸭蛋的PCR扩增产物经电泳检测条带位置在500_750bp之 间，所述待鉴别离体鸭蛋为番鸭蛋或候选为番鸭蛋；如果所述待鉴别离体鸭蛋的PCR扩增 产物电泳检测条带在100-250bp之间，所述待鉴别离体鸭蛋为非番鸭蛋或候选为非番鸭 蛋。 在本专利技术实施例中，所述PCR扩增采用的PCR反应程序为：94°C预变性5min;94°C 变性30s，58°C退火30s，72°C延伸30s，33个循环；72°C延伸5min。 上述两种方法中，所述待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA提取自待鉴别离体鸭蛋的胚 盘。 所述待鉴别离体鸭蛋的胚盘是通过如下方法分离获得的； (1)选取待鉴别离体鸭蛋在4°C条件下冷藏6-10h或6h，得到预冷处理的待鉴别离 体鸭蛋； (2)从所述预冷处理的待鉴别离体鸭蛋中吸取所述胚盘，得到所述待鉴别离体鸭 蛋的胚盘。 上述两种方法中，用眼科剪刀剪开胚盘处的卵黄膜，用移液器吸取得到上述待鉴 别离体鸭蛋的胚盘。 上述两种方法中，所述待鉴别离体鸭蛋的胚盘为受精鸭蛋的胚盘或未受精鸭蛋的 胚盘。 上述两种方法中，可采用DNA提取试剂盒、CTAB法或SDS法从待鉴别离体鸭蛋的 胚盘中提取所述待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA。 本专利技术根据上述鉴别番鸭蛋的分子标记还开发了番鸭蛋特异引物对，由正向引物 和反向引物组成，所述正向引物为与SEQIDNo. 1的第57位上游特异结合的单链DNA，反向 引物为与SEQIDNo. 1的第572位下游特异结合的单链DNA。 其中，所述SEQIDNo. 1的第57位上游不包括SEQIDNo. 1第57位，所述SEQID No. 1的第572位下游不包括SEQIDNo. 1第572位。 上述引物对中，所述正向引物的序列为SEQIDNo. 1的第1-19位，所述反向引物 的序列为与SEQIDNo. 1的第663-683位反向互补的单链DNA。 本专利技术根据上述鉴别番鸭蛋的分子标记还开发了一种鉴别或辅助鉴别鸭蛋是否 为番鸭蛋的试剂或试剂盒，所述试剂或试剂盒中含有上述鉴别或辅助鉴别鸭蛋是否为番鸭 蛋的引物对。 本专利技术根据上述鉴别番鸭蛋的分子标记还开发了一种技术方案是1)或2)用途： 1)上述鉴别番鸭蛋的分子标记、鉴别或辅助鉴别离体鸭蛋是否为番鸭蛋的方法、 引物对、试剂或试剂盒在鉴别或辅助鉴别鸭蛋是否为番鸭蛋中的应用。 2)上述鉴别番鸭蛋的分子标记、鉴别或辅助鉴别离体鸭蛋是否为番鸭蛋的方法、 引物对、试剂或试剂盒在选育番鸭中的应用。 利用本专利技术的鉴别番鸭蛋的分子标记及鉴别或辅助鉴别鸭蛋是否为番鸭蛋的方 法能够快速、准确地筛选出番鸭蛋，提高了番鸭育种的选择效率，加快了育种进程。【附图说明】 图1为鸭蛋胚盘图。 图2为不同鸭蛋品种的基因组DNA的PCR扩增产物电泳图谱。 上排泳道从右向左依次为：Lane1-3为荆江麻鸭；Lane4-6为天府肉鸭；Lane7_9 为攸县麻鸭；Lanel〇-12 为番鸭；Lanel3 为DM2000DNAmarker(康为，CW0632D); 下排泳道从右向左依次为：Lane1-3为樱桃谷鸭；Lane4_6为金定麻鸭本文档来自技高网...
【技术保护点】
鉴别或辅助鉴别离体鸭蛋是否为番鸭蛋的方法，为检测待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中是否含有(1)‑(3)中任一所述DNA片段：(1)SEQ ID No.1的第57‑572位所示的516bp的DNA片段；(2)SEQ ID No.1的第57‑447位所示的391bp的DNA片段；(3)SEQ ID No.1的第470‑572位所示的103bp的DNA片段；如果待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中含有所述(1)‑(3)中任意一种DNA片段，所述待鉴别离体鸭蛋为番鸭蛋或候选为番鸭蛋；如果待鉴别离体鸭蛋的基因组DNA中不含有所述(1)‑(3)中任意一种DNA片段，所述待鉴别离体鸭蛋为非番鸭蛋或候选为非番鸭蛋。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：王哲鹏，蒙国华，刘瑞芳，杜宇，
申请(专利权)人：西北农林科技大学，
类型：发明
国别省市：陕西;61
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