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基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法技术

技术编号:12713458 阅读:142 留言:0更新日期:2016-01-14 20:06
本发明专利技术公开了一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,包括如下步骤:采用RO-3306为同步化试剂将目标细胞同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体-外源目标基因复合物进行基因转染。本发明专利技术在基因转染过程中加入RO-3306将肿瘤细胞同步至G2/M能够很大程度上提高基因转染的效率。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于生物医学领域,尤其涉及一种细胞周期依赖激酶1的特异酶活性抑制剂R0-3306,具体来说是利用RO-3306对细胞进行细胞周期同步化再进行基因转染从而增强高分子聚合物载体基因转染的效率。
技术介绍
用于基因转染的载体可分为两大类:病毒载体和合成载体。最早使用的载体是重组病毒。使用重组病毒作为载体的优点是转染效率高,但缺点是存在一定的安全隐患。重组病毒有可能突变为野生型的具有致病性的病毒粒子,另外病毒本身具有免疫原性,有可能引发免疫反应。合成载体包括脂质体和高分子聚合物。在聚合物载体中,阳离子聚合物结构灵活,有望提供高效基因输送所需的多重功能同时维持良好的生物相容性,较低的生产成本和合适的稳定性。因此,阳离子聚合物在基因治疗上拥有很大的潜力,但是较低的转染效率限制了阳离子聚合物的临床应用。聚乙烯亚胺(PEI)是目前使用最广泛的聚合物载体。当使用PEI作为载体进行基因转染时,载体需要克服一系列的阻碍,包括PEI与DNA(或RNA)在体外包裹形成粒径几十到几本文档来自技高网...
<a href="http://www.xjishu.com/zhuanli/27/CN105238815.html" title="基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法原文来自X技术">基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法</a>

【技术保护点】
一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方法,其特征在于,包括如下步骤:采用RO‑3306为同步化试剂将目标细胞同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体‑外源目标基因复合物进行基因转染。

【技术特征摘要】
1.一种基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基因转染效率的方
法,其特征在于,包括如下步骤:采用RO-3306为同步化试剂将目标细胞
同步至G2/M边界,然后加入高分子聚合物载体-外源目标基因复合物进行
基因转染。
2.根据权利要求1所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基
因转染效率的方法,其特征在于,目标细胞同步步骤为:培养目标细胞至
细胞贴壁后加入含RO-3306的血清培养基,进行同步。
3.根据权利要求2所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基
因转染效率的方法,其特征在于,血清培养基中RO-3306浓度为8~12uM。
4.根据权利要求2所述基于细胞周期调控增强高分子聚合物载体基
因转染效率的方法,其特征在于,同步时间为12~20...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘祥瑞周雪飞刘欣祝鼎成周珠贤唐建斌申有青
申请(专利权)人:浙江大学
类型:发明
国别省市:浙江;33

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