【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种抗牛奶且与水牛奶蛋白无交叉反应的β -酪蛋白单抗制备方法，其生产的抗体可用于免疫印记和酶联免疫法检测水牛奶中是否掺假牛奶，属于食品质量安全检测领域。
技术介绍
水牛奶中总固形物、脂肪和蛋白含量均高于牛奶，奶品质优良，营养价值高，越来越受到消费者的青睐。目前，生鲜水牛奶及其奶制品的市场售价高于牛奶，这导致一些不法的生产经营者为了获取更多的经济利益，存在向水牛奶中掺假牛奶的现象。为此，国内外许多学者采用红外光谱法、毛细管电泳法、液相色谱法、质谱法等技术探索了奶掺假的研究，并找到了一些可用于掺假检测的标记分子，但因所需仪器设备昂贵、操作繁杂及费时等方面的原因，目前未能在生产中得到应用。酪蛋白是牛奶、水牛奶等反刍动物奶中主要的蛋白组分，其含量约为总蛋白含量的35%左右。酪蛋白与asl、as2和κ -酪蛋白形成胶束结构，对奶的稳定性及物理化学性质的保持具有重要作用。因此，以牛奶中酪蛋白为标记分子，用于检测奶混合物中牛奶含量，具有易于检测的特点。但是，因牛奶和水牛奶酪蛋白的氨基酸序列存在97.8%相似度，这极容易导致抗牛奶酪蛋白抗体与水牛奶酪蛋白发...
【技术保护点】
抗牛奶且与水牛奶蛋白无交叉反应的β‑酪蛋白单抗制备方法，包括以下步骤：(1)以牛奶β‑酪蛋白作为抗原，定期皮下免疫Balb/c雌性小鼠；(2)加强免疫后，取血并分离血清，用ELISA方法检测血清中多抗效价；(3)选择效价达到10000以上的小鼠，分离脾脏并破碎以获取脾细胞，将脾细胞与SP2/0细胞混合，采用PEG法进行融合，然后加入小鼠胸腺细胞，用灭菌半固体培养基进行筛选培养；(4)挑选细胞单克隆，培养于用胸腺细胞铺板的细胞培养皿中；(5)采用ELISA方法第一次筛选单克隆细胞以获取抗牛奶中β‑酪蛋白的细胞株，以β‑酪蛋白为底物筛选阳性杂交瘤细胞株；(6)在第一次筛选的基础...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨永新，赵小伟，潘孝成，黄冬维，齐云霞，程广龙，赵辉玲，
申请(专利权)人：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所，
类型：发明
国别省市：安徽;34
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