一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法技术

本发明专利技术涉及干细胞制剂技术领域，特别涉及一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备方法。该巨核祖细胞制剂包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素-2和红花注射液。本发明专利技术巨核祖细胞制剂对于血小板缺乏症具有显著的改善作用，输注后的患者体内血小板含量恢复正常水平后，能在体内维持较长一段时间，使用后无任何不良反应，使用安全，且制备简单，使用方便。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及干细胞制剂
，特别涉及一种巨核祖细胞制剂及其应用、制备 方法。
技术介绍
数量足够且功能正常的血小板是止血过程中不可或缺的一环，血小板的 正常值约为150~450 X 103/mm3,因此广义的说，少于15万就可称为血小板缺乏 (Thrombocytopenia)。国外曾直接从5600~9100位胎儿取用脐带血来检验血小板数，发 现新生儿血小板缺乏的比例约为0.7~0.9% (Sola et al.，2000)。血小板缺乏症也是新 生儿加护病房（NICU)中最常见的出血性疾病。如今，造血干细胞移植已广泛应用于临床治 疗恶性及非恶性血液病、实体瘤、遗传代谢性疾病、自身免疫性疾病等。在造血干细胞移植 中，受者的造血系统经预处理后严重受损，骨髓抑制，血小板减少，发生血小板缺乏症，且其 恢复较慢，易导致出血乃至死亡。 然而对于血小板缺乏症的治疗，主要是直接回输血小板，把血小板收集浓缩起来， 然后配合生理盐水，回输至患者体内，从而达到快速补充血小板数量的效果。但回输血小板 价格昂贵，而且反复输注血小板可能会面临血小板输注无效，此外，一些血小板生成刺激因 子如血小板生成素（TPO)，可能使患者出现骨髓纤维化和骨髓增生性紊乱等副作用。 巨核细胞（Megakaryocyte)是骨髓中的一种从造血干细胞分化而来的细胞，是正 常骨髓中的一种能生成血小板的成熟细胞，前身为颗粒巨核细胞。该细胞体积巨大，成熟 的巨核细胞边缘部分破裂脱落后形成血小板。每个巨核细胞平均能生成2000个（200~ 7700个）左右的血小板。巨核细胞虽然在骨髓的造血细胞中为数最少，仅占骨髓有核细胞 总数的0. 05%，但其产生的血小板却对机体的止血功能极为重要。巨核细胞是从骨髓中的 造血干细胞分化发展来的。造血干细胞首先分化生成巨核祖细胞，也称巨核系集落形成单 位（colony forming unit-megakaryocyte，CFU-Meg)。祖细胞阶段的细胞核内的染色体一 般是2-3倍体。当祖细胞是2倍体或4倍体时，细胞具有增殖能力，因此这是巨核细胞系增 加细胞数量的阶段。当巨核祖细胞进一步分化为8-32倍体的巨核细胞时，胞质开始分化， 内膜系统逐渐完备。最后有一种膜性物质把巨核细胞的胞质分隔成许多小区。当每个小区 被完全隔开时即成为血小板，血小板通过静脉窦窦壁内皮间的空隙从巨核细胞脱落，进入 血流。 有报道用脐带血巨核系祖细胞和人血清白蛋白制备成巨核祖细胞注射液，能够改 善放化疗引起的血小板减少综合症。但该注射液的治疗效果不理想，且易发不良反应。因 此，临床急需一种治疗效果显著且无不良反应的巨核祖细胞制剂。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术提供了。该巨核祖细 胞制剂对于血小板缺乏症具有显著的改善作用，输注后的患者体内血小板含量恢复正常水 平后，能在体内维持较长一段时间，使用后无任何不良反应，使用安全，且制备简单，使用方 便。 为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案： 本专利技术提供了一种巨核祖细胞制剂，包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因 子、白细胞介素-2和红花注射液。 巨核祖细胞是造血干细胞经过分化得到，也称巨核系集落形成单位（colony forming unit-megakaryocyte，CFU-Meg)。祖细胞阶段的细胞核内的染色体一般是2-3倍 体。当祖细胞是2倍体或4倍体时，细胞具有增殖能力，因此这是巨核细胞系增加细胞数量 的阶段。当巨核祖细胞进一步分化为8-32倍体的巨核细胞时，胞质开始分化，内膜系统逐 渐完备。最后有一种膜性物质把巨核细胞的胞质分隔成许多小区。当每个小区被完全隔开 时即成为血小板，血小板通过静脉窦窦壁内皮间的空隙从巨核细胞脱落，进入血流。 人血白蛋白为人血液制品，原料来自人血，适应症包括：1.失血创伤、烧伤引起的 休克；2.脑水肿及损伤引起的烦压升高；3.肝硬化及肾病引起的水肿或腹水；4.低蛋白血 症的防治；5.新生儿高胆红素血症；6.用于心肺分流术、烧伤的辅助治疗、血液透析的辅助 治疗和成人呼吸窘迫综合征。 干细胞生长因子（Stem Cell Growth Factors)是一种具有刺激自体内源性干细 胞生长的高效蛋白质、酶组合，也是体外培养干细胞必不可少的各种细胞生长因子的组合， 富含表皮生长因子（EGF)、纤维细胞生长因子（FGF)、神经生长因子（NGF)、肝细胞生长因 子（HGF)、脑源性神经营养因子（BDNF)、血小板源性生长因子（PDGF)、血管内皮生长因子 (VEGF)、转化生长因子（TGF)等多重有效成分。动物实验证明干细胞生长因子可以快速激 活休眠的干细胞并促使其生长，同时可以调节机体内微环境，为干细胞提供有利的生长条 件。 白细胞介素_2是趋化因子家族的一种细胞因子，它是由多细胞来源（主要由活化 T细胞产生），又具有多向性作用的细胞因子（主要促进淋巴细胞生长、增殖、分化）；对机 体的免疫应答和抗病毒感染等有重要作用，能刺激已被特异性抗原或致丝裂因数启动的T 细胞增殖；能活化T细胞，促进细胞因子产生；刺激NK细胞增殖，增强NK杀伤活性及产生细 胞因子，诱导LAK细胞产生；促进B细胞增殖和分泌抗体；激活巨噬细胞。可用于临床研究 和肿瘤治疗。 红花注射液的主要成分是红花，具有活血化瘀的功效，用于治疗闭塞性脑血管疾 病，冠心病，脉管炎。它能够很好的抗血小板聚集，提高血小板作用效果。 本专利技术巨核祖细胞制剂将巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介 素-2和红花注射液联合应用后，通过静脉回输到体内，循环于血液系统，分化成巨核细胞， 最终分化成血小板，进而对经过放、化疗或者其他原因造成的血小板缺乏症发挥着重要作 用，效果明显好于血小板制剂及市面上同类产品，而且无任何副作用。 作为优选，巨核祖细胞制剂中包括： CN 105126083 A 说明书 3/12 页 优选地，巨核祖细胞制剂中包括： 在本专利技术提供的一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： 在本专利技术提供的另一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： 在本专利技术提供的另一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： CN 105126083 A I兄明"fb 4/12 页 作为优选，巨核祖细胞制剂中还包括葡萄糖注射液。葡萄糖注射液的适应症为：补 充能量和体液；用于各种原因引起的进食不足或大量体液丢失（如呕吐、腹泻等），全静脉 内营养，饥饿性酮症；低糖血症；高钾血症；高渗溶液用作组织脱水剂；配制腹膜透析液；药 物稀释剂；静脉法葡萄糖耐量试验；供配制GIK (极化液）用。 作为优选，巨核祖细胞制剂中包括： 优选地，巨核祖细胞制剂中包括： 在本专利技术提供的一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： CN 105126083 A I兄明"fb 5/12 页 在本专利技术提供的另一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： 在本专利技术提供的另一些实施例中，巨核祖细胞制剂中包括： 本专利技术还提供了该巨核祖细胞制剂在制备治疗血小板缺乏症药物中的应用；该巨 核祖细胞制剂包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素_2和红花注射 液；作为优选，巨核祖细胞制剂中包括： 优选地，巨核祖细胞制剂中包括： 作为优选，巨核祖细胞制剂中还包括葡萄糖注射液本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种巨核祖细胞制剂，其特征在于，包括巨核祖细胞、人血白蛋白、干细胞生长因子、白细胞介素‑2和红花注射液。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：葛啸虎，陈海佳，王一飞，曾维杰，李平，
申请(专利权)人：广州赛莱拉干细胞科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：广东;44