一种与植物抗逆性相关蛋白及其编码基因GsCHX19与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种与植物抗逆性相关蛋白及其编码基因GsCHX19与应用。该蛋白是如下(a)或(b)的蛋白质：(a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；(b)将序列表中序列2的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且能提高植物抗逆性的蛋白质。本发明专利技术通过实验证明，本发明专利技术提供的蛋白具有提高植物抗逆性的功能，该蛋白在植物育种方面具有重要应用价值。

【技术实现步骤摘要】
一种与植物抗逆性相关蛋白及其编码基因GsCHX19与应用
本专利技术属于生物
，具体涉及一种与植物抗逆性相关蛋白及其编码基因GsCHX19与应用。
技术介绍
目前，土壤盐碱化严重制约我国东北地区乃至全国的农业生产、生态环境以及可持续发展，是我国乃至世界农业发展所面临的重大问题。据统计，全世界有1/3的土地是盐碱地，我国约有盐碱地9913万hm2，仅黑龙江省盐碱地面积就高达1740余万亩。随着经济的飞速发展和城市化进程的快速推进，优良耕地资源日益减少。为确保我国粮食安全，全国耕地面积必须保证在18亿亩以上，但耕地面积逐年减少，目前已逼近这一红线。因此，开发利用盐碱地越来越受到人们的重视。随着分子生物学的快速发展和基因工程技术的日臻成熟，通过转基因分子育种改良作物耐盐碱性、提高作物产量，已成为可能。然而，其实现的重要前提是挖掘耐盐碱关键调控基因。
技术实现思路
本专利技术的一个目的是提供一种蛋白质。本专利技术提供的蛋白质是如下a)或b)的蛋白质：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与植物抗逆性相关的蛋白质。本专利技术还提供了与上述蛋白质相关的生物材料，为下述B1)至B6)中的任一种：B1)编码上述所述蛋白质的核酸分子；B2)含有B1)所述核酸分子的表达盒；B3)含有B1)所述核酸分子的重组载体、或含有B2)所述表达盒的重组载体；B4)含有B1)所述核酸分子的重组质粒、或含有B2)所述表达盒的重组质粒；B5)含有B1)所述核酸分子的重组菌、或含有B2)所述表达盒的重组菌、或含有B3)所述重组载体的重组菌；B6)含有B1)所述核酸分子的转基因植物细胞系、或含有B2)所述表达盒的转基因植物细胞系、或含有B3)所述重组载体的转基因植物细胞系。上述生物材料中，B1)所述核酸分子的核苷酸序列如序列表中序列1所示。上述生物材料中，B6)所述转基因植物细胞系不包括繁殖材料。本专利技术另一个目的是提供上述所述蛋白质或上述所述相关生物材料在提高植物抗逆性中的应用。上述应用中，所述抗逆性为抗盐碱胁迫。本专利技术最后一个目的是提供一种构建转基因植物的方法。本专利技术提供的构建转基因植物的方法包括如下步骤：使上述所述蛋白质在出发植物中过表达，进而使植物的抗逆性提高。上述方法中，所述使上述所述蛋白质在受体植物中过表达的方法为：向出发植物中导入上述所述蛋白质的编码基因，得到转基因植物；转基因植物与出发植物相比，抗逆性提高。上述方法中，所述蛋白质的编码基因序列如序列表中序列1所示。上述方法中，所述抗逆性为抗盐碱胁迫。上述方法中，所述出发植物为单子叶植物或双子叶植物；所述双子叶植物具体为拟南芥。本专利技术提供了一种与植物耐盐碱性相关蛋白及其编码基因GsCHX19与应用。本专利技术通过实验证明，本专利技术的蛋白具有提高植物抗逆性的功能，该蛋白在植物育种方面具有重要应用价值。附图说明图1为GsCHX19蛋白在植物细胞内的亚细胞定位分析。图2为GsCHX19基因在盐碱胁迫条件下的表达模式分析。图2A为碱胁迫表达模式；图2B为盐胁迫表达模式。图3为转基因拟南芥与野生型拟南芥萌发期在盐胁迫下的生长情况比较。图3A为GsCHX19基因超量表达促进盐胁迫下种子的萌发；图3B为盐胁迫下种子的萌发率统计。其中，WT代表野生型植株；﹟2、﹟5和﹟6代表转基因拟南芥植株。图4为转基因拟南芥与野生型拟南芥幼苗期在盐碱胁迫下的生长情况比较。图4A为GsCHX19基因超量表达增强幼苗期碱胁迫耐性；图4B为GsCHX19基因超量表达增强幼苗期盐胁迫耐性；图4C为碱胁迫下根长统计；图4D为盐胁迫下根长统计。其中，WT代表野生型植株；﹟2和﹟6代表转基因拟南芥植株。图5为转基因拟南芥与野生型拟南芥成苗期在盐碱胁迫下的生长情况比较。其中，WT代表野生型植株；﹟2、﹟5和﹟6代表转基因拟南芥植株。具体实施方式下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。实验材料为野生大豆G07256种子，在文献“MingzheSun,XiaoliSun,YangZhao,HuaCai,ChaoyueZhao,WeiJi,HuiziDuanMu,YangYu,YanmingZhu.EctopicexpressionofGsPPCK3andSCMRPinMedicagosativaenhancesplantalkalinestresstoleranceandmethioninecontent.PLOSONE20149(2):e89578”中公开过，公众可以从黑龙江八一农垦大学或东北农业大学获得。pBSK-eGFP载体在文献“XiaoliSun,WeiJi,XiaodongDing,XiBai,HuaCai,ShanshanYang,XueQian,MingzheSun,YanmingZhu.GsVAMP72,anovelGlycinesojaR-SNAREprotein,isinvolvedinregulatingplantsalttoleranceandABAsensitivity.PlantCellTissOrganCult2013,113:199–215”中公开过，公众可以从黑龙江八一农垦大学或东北农业大学获得。pCAMBIA330035Su载体在文献“XiaoliSun,WeiJi,XiaodongDing,XiBai,HuaCai,ShanshanYang,XueQian,MingzheSun,YanmingZhu.GsVAMP72,anovelGlycinesojaR-SNAREprotein,isinvolvedinregulatingplantsalttoleranceandABAsensitivity.PlantCellTissOrganCult2013,113:199–215”中公开过，公众可以从黑龙江八一农垦大学或东北农业大学获得。实施例1、野生大豆中耐盐碱相关基因GsCHX19的获得1、植物材料的处理选取饱满的野生大豆G07256种子，用浓H2SO4处理10min，无菌水冲洗3～4次，25℃暗培养2-3d催芽。待芽长到1～2cm时，将其转移至1/4Hogland营养液中，置于人工气候箱中培养。2、植物总RNA的提取取3周龄野生大豆幼苗的根，采用RNApreppure试剂盒(TIANGEN)提取总RNA。3、cDNA第一链的合成以OligodT为引物进行cDNA第一条链的合成，方法参见Invitrogen公司SuperScriptTMⅢReverseTranscriptase说明书。4、目的基因GsCHX19的扩增以野生大豆总cDNA为模板，采用GsCHX19-S和GsCHX19-AS引物PCR扩增目的基因GsCHX19。引物序列如下：GsCHX19-S：5'-ATGATGGCGACGAGTAACAACGC-3'；GsCHX19-AS：5'-TTAACTCGTTGGTGTGTCTGGCATATC-3'。将大小符合要求的目的基因电泳条带回收、克隆至pEASY-T载体，转化大肠杆菌DH5α(全式金，CD201-01)后送本文档来自技高网...

【技术保护点】
蛋白质，是如下a)或b)的蛋白质：a)由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；b)将序列表中序列2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加得到的且与植物抗逆性相关的蛋白质。

【技术特征摘要】
2015.01.15 CN 20151002043951.如下任一所述在提高植物抗逆性中的应用；所述抗逆性为抗盐碱胁迫；1）蛋白质，由序列表中序列2所示的氨基酸序列组成的蛋白质；2）与1）所述蛋白质相关的生物材料，为下述B1）至B5）中的任一种：B1）编码1）所述蛋白质的核酸分子；B2）含有B1）所述核酸分子的表达盒；...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙晓丽，朱延明，杨克军，贾博为，
申请(专利权)人：黑龙江八一农垦大学，东北农业大学，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23