本公开内容提供了基于miR-18b表达水平预测和/或确定受试对象是否患有癌症的方法。本公开内容还提供了基于两个时间点间的miR-18b表达水平变化确定受试对象的癌症是正在进展还是正在消退的方法。本公开内容还提供了通过给予包含miR-18b的多核苷酸和/或增强miR-18b表达的物质来治疗患有癌症的受试对象的方法。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利说明】 与相关申请的交叉引用 本申请根据U.S.C. § 119要求2012年9月19日提交的临时申请序列号 61/703,057的优先权，该临时申请的公开内容通过引用并入本文。 政府许可权利本申请是在国立卫生研宄院/国家癌症研宄所授予的基金号CA114337和CA122947的政府支持下完成的。政府对本申请有某些权利。
本公开内容提供用于癌症诊断、受试对象存活率、和/或癌症进展的方法，所述方 法基于对微小RNA(microRNA)miR-18b的表达水平的测量。本公开内容还提供通过增强miR-18b的表达治疗患有癌症的受试对象的方法。
技术介绍
黑色素瘤，一种在其晚期预后较差的威胁生命的恶性肿瘤，占了皮肤癌死亡的 80%。它在美国是第六种最常见的癌症，每年有60, 000多个新病例。黑色素瘤在实体瘤中 很独特的一点是它们很少在P53基因中带有突变。除了可导致pl4ARF缺失的CKDN2A基因 中的突变之外，P53途径在很多黑色素瘤中被抑制的机制是未知的。除手术切除原发肿瘤 外，当前还没有治愈性的标准疗法，尤其是对于更加晚期的阶段。因此，本领域长久以来需 要开发不仅能够用于追踪黑色素瘤的进展而且能够用作调节和抑制黑色素瘤进展的靶标 的分子标记物。
技术实现思路
本公开内容提供了miR_18b在癌症中的功能性作用，调节其表达的分子机制，并 将原癌基因MDM2鉴定为癌症中miR-18b作用的靶标。 本公开内容提供了预测受试对象是否患有癌症如黑色素瘤的方法，包括：（i)从 受试对象获得生物学样品，如组织活检；（ii)测量所述受试对象的生物学样品中pre-miR _18b(UGUGUUAAGGUGCAUCUAGUGCAGUUAGJGAAGCAGCUUAGAAUCUACUGCCCUAAAUGCCCCUUCUGGCA; SEQIDN0:2)或加工的 / 成熟miR-18b-5p(UAAGGUGCAUCUAGUGCAGUUAG;SEQIDN0:l(of SEQIDN0:2 的 6 至 28)、或miR-18b-3pUGCCCUAAAUGCCCCUUCUGGC;SEQIDN0:3(SEQID NO: 2的49-70))的表达水平；（iii)将所述受试对象生物学样品中的miR-18b表达水平与 来自一个或多个对照生物学样品如良性痣的组织活检的miR-18b表达水平进行比较；以及 (iv)基于与对照样品中miR-18b的平均表达水平相比具有更低的miR-18b表达水平来预测 所述受试对象是否患有癌症。另一个实施方式中，对照生物学样品或良性痣来自同一受试 对象或者不来自同一受试对象。 本公开内容提供了确定受试对象是否患有癌症的方法，包括：（i)从受试对象获 得生物学样品，如组织活检；（ii)测量所述受试对象的生物学样品中miR-18b的表达水 平；（iii)将所述受试对象生物学样品中的miR-18b表达水平与来自一个或多个对照生物 学样品如良性痣的组织活检的miR-18b表达水平进行比较；以及（iv)基于与对照样品中 miR-18b的表达水平相比具有显著更低的miR-18b表达水平来确定所述受试对象是否患有 癌症。另一个实施方式中，对照生物学样品来自同一受试对象或者来自不同受试对象。 本公开内容提供了确定受试对象的癌症如黑色素瘤是正在进展还是在康复中的 方法，包括：（i)在第一时间点从受试对象获得生物学样品，如组织活检；（ii)测量来自所 述第一时间点的受试对象生物学样品中miR-18b的表达水平；（iii)在第二时间点从受试 对象获得生物学样品，如组织活检；（iv)测量来自所述第二时间点的受试对象生物学样品 中miR-18b的表达水平；(v)比较来自所述第一时间点的miR-18b表达水平与来自所述第 二时间点的表达水平；以及（vi)基于来自所述两个时间点的miR-18b表达水平的改变来确 定癌症是正在进展还是在康复中，其中所述第一时间点和所述第二时间点之间miR_18b表 达水平的增加表示癌症在康复中，其中所述第一时间点和第二时间点之间miR-18b表达水 平的减少表示癌症正在进展。 本公开内容提供了预测患有癌症如黑色素瘤的受试对象的存活率的方法，包括 (i)在第一时间点从受试对象获得生物学样品；（ii)测量来自所述第一时间点的受试对象 生物学样品中miR-18b的表达水平；（iii)在第二时间点从受试对象获得生物学样品；（iv) 测量来自所述第二时间点的受试对象生物学样品如组织活检中miR-18b的表达水平；(v) 比较来自所述第一时间点的miR-18b表达水平与来自所述第二时间点的表达水平；以及 (vi)基于来自所述两个时间点的miR-18b表达水平的改变来预测受试对象的存活率，其中 所述第一时间点和第二时间点之间miR-18b表达水平的增加表示受试对象有较好的存活 率，其中所述第一时间点和第二时间点之间miR-18b表达水平的减少表示受试对象有较差 的存活率。 本公开内容提供了治疗受试对象的癌症如黑色素瘤的方法，包括：给予有效量 的增强miR-18b表达的物质。一个实施方式中，本公开内容提供了一种方法，其中增强miR-18b表达的物质是表达miR-18b的载体，所述载体含有SEQIDN0:1或与SEQIDN0:1 至少98 %相同的序列。一个实施方式中，所述载体是复制型逆转录病毒载体如MLV(参见 例如，国际公开号W0 2010/036986,其公开内容并入本文）或腺病毒载体。其他实施方式 中，载体可以是复制缺陷型载体。在又另外的实施方式中，可使用包含双链RNA结合结构 域和蛋白转导结构域（参见，例如，美国专利出版号20090093026-A1，其公开内容通过引 用并入本文）或可中和miR-18b阴离子电荷的纳米颗粒的递送系统。在又一实施方式中， miR-18b表达的增强导致抑制或防止癌细胞增殖。在另一实施方式中，miR-18b表达的增 强导致癌细胞中MDM2表达的减少。在又一实施方式中，额外的治疗剂与包含miR-18b的 多核苷酸和/或增强miR-18b表达的物质组合给药。额外的治疗剂的例子包括但不限 于，铂类似物，烷化剂，烷基磺酸酯，雄激素，抗肾上腺素药，抗雄激素药，抗生素，抗雌激 素药，芳香酶抑制性4(5)-咪挫，抗代谢药，叶酸类似物，氮杂环丙烷类（ethylenimines) 和甲基蜜胺类（methylamelamines)，叶酸补充剂，氮芥，亚硝基脲，嗓呤类似物，喃啶类似 物，拓扑异构酶抑制剂，胸苷酸合成酶抑制剂，抗癌抗体，化疗剂，靶向治疗剂如威罗菲尼 (vemurafenib)、达拉非尼（dabrafenib)、曲美替尼（trametinib)、厄洛替尼（erlotinib) 和格列卫（Gleevec)，以及去甲基化剂。在一个具体的实施方式中，额外治疗剂是顺铂。 本公开内容提供了一个或多个实施方式，表示在所附的附图和以下说明书中。鉴 于本公开内容的说明书和附图以及权利要求，本专利技术的其他特点、目的和优势将是显而易 见的。【附图说明】 图1A-C显示，miR-18b的表达在黑色素瘤中被抑制。（A)miRNA-定量分析显示 与痣样品相比，一组黑色素瘤样品中miR-18b的表达被显本文档来自技高网...
【技术保护点】
提供对于受试对象是否患有癌症的诊断或预测的方法，包括：(i)从受试对象获得生物学样品；(ii)测量所述受试对象样品中miR‑18b的表达水平；(iii)将所述受试对象样品中miR‑18b的表达水平与来自一个或多个对照生物学样品的miR‑18b平均表达水平进行比较；(iv)基于与所述对照中miR‑18b的平均表达水平相比具有更低的(或更高的)miR‑18b表达水平来提供所述受试对象可能患有癌症的预测。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：M·卡沙尼萨比特，A·A·达尔，
申请(专利权)人：萨特西湾医院，
类型：发明
国别省市：美国;US
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