一种细胞接种方法技术

本发明专利技术提供了一种细胞接种方法，属于微藻养殖领域，在微藻的附着培养过程中，解决了养殖载体只能局限于多孔多绒毛材料的问题，扩宽了养殖载体的材料选择范围，还能够使得一些耐用性强、成本低廉的载体材料也可以适用于微藻养殖。所述方法包括：制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液；预置载体；将待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上，其中，所述制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液包括：将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，和/或在将待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上之前，所述方法包括：对所述载体进行增加所述载体的可附着性的预处理。本发明专利技术可用于细胞接种。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及微藻养殖领域，尤其涉及一种细胞接种方法。
技术介绍
微藻的大规模、高产养殖是制约微藻产业化发展的瓶颈，低成本、高效培养方式的开发是规模化生产的关键。为此，人们积极探索出一种极具放大潜力的新的培养方式-“附着培养”，所述附着培养是使微藻附着在介质上，从而进行固定化培养的一种方式。对附着培养来说，藻细胞在介质表面生长，其关键问题在于细胞是否可以牢固地附着在养殖载体上，附着强度不好会造成细胞的脱落进而影响养殖产量。附着性问题制约了养殖过程中藻种和载体材料的选择及应用范围，为使细胞牢固地附着在载体上，现有阶段通常采用具有多孔、多绒毛等性质的载体材料，但这种材料一般多局限于棉、布等，耐用性差，因此载体材料的限制也制约了微藻养殖的产业化发展。
技术实现思路
本专利技术提供了一种细胞接种方法，在微藻细胞的附着培养过程中，解决了养殖载体只能局限于多孔多绒毛材料的问题，扩宽了养殖载体的材料选择范围，还能够使得其它一些耐用性强、成本低廉的载体材料也可以适用于微藻养殖。为达到上述目的，本专利技术采用如下技术方案：本专利技术提供一种细胞接种方法，所述方法包括：制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液；预置载体；将所述待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上，其中，所述制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液包括：将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，和/或在将所述待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上之前，所述方法包括：对所述载体进行增加所述载体的可附着性的预处理。其中，所述载体为在日光和水环境下化学性质稳定的非棉材料，所述非棉材料包括硬质板类材料和不包括棉织物的非棉织物类材料。具体地，所述硬质板类材料包括木质板、金属板、玻璃板、水泥板或塑料板；所述非棉织物类材料包括涤纶、锦纶、氨纶、腈纶、氯纶。具体地，所述将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期的判断方法为：在培养过程中取细胞液置于显微镜下观察，若观察到细胞周围及表面出现絮状物，此时细胞处于分泌粘性物质的时期。可选地，所述将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期的判断方法为：所述细胞为小球藻、丝状藻、蓝藻或绿藻的细胞，以大于或等于1g/L的初始浓度培养5-8天，此时细胞处于分泌粘性物质的时期；或者，所述细胞为杜氏藻、栅藻或雨生红球藻的细胞，以大于或等于2g/L的初始浓度培养5-10天，此时细胞处于分泌粘性物质的时期。其中，所述预处理包括增加载体表面的粘性、和/或增加载体表面的粗糙度、和/或增加载体表面的亲水性。优选地，所述增加载体表面的粘性包括将水中粘合剂涂抹于所述载体上。可选地，所述水中粘合剂主要包括树脂、水中固化剂和填料。其中，所述树脂为环氧树脂、聚氨酯、氰基丙烯酸酯，所述水中固化剂为酮亚胺、改性胺，所述填料为氧化钙、氯化钙、氧化铝和氧化镁。可选地，所述增加载体表面的粗糙度包括根据所述载体的特性对所述载体进行下述处理的一种或几种：摩擦、刮划、液体冲刷、气体冲刷、反复低温高温、射线照射或室外暴晒。可选地，所述增加载体表面的亲水性包括根据所述载体的特性对所述载体进行下述任意一种改性：表面活性剂改性、接枝亲水性单体、共聚亲水单体、表面氧化法改性。本专利技术提供了一种细胞接种方法，在微藻的附着培养过程中，为使细胞能够牢固地附着在养殖载体上，现有技术基本都只能局限于诸如棉、布等的多孔多绒毛材料，与现有技术相比，本专利技术通过在制备细胞液的过程中将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，利用细胞自身分泌的粘性物质增强了细胞与载体之间的附着强度；或者在接种前对载体预先进行预处理，通过增加载体的可附着性增强了细胞与载体之间的附着强度，这样就能够使得养殖载体不用再限制为多孔多绒毛的材料，其它在本专利技术之前原本并不适用的材料也能够用作养殖载体，扩大了载体材料的选择范围。具体实施方式下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术实施例提供了一种细胞接种方法，所述方法具体可以包括：制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液；预置载体；将所述待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上，其中，所述制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液包括：将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，和/或在将待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上之前，所述方法可以包括：对所述载体进行增加所述载体的可附着性的预处理。具体地，在接种前通常先将待接种的微藻细胞制备成具有一定浓度的细胞液，浓度越高越有利于使相对更多的细胞附着在载体上，提高养殖产量。例如在本专利技术实施例中，采用水体培养的方式将细胞培养至0.5-300g/L，例如，0.6、0.8、1.0、2.0、3.0、5.0、8.0、10、15、20g/L等。水体培养简单方便，而且在培养之后一般还可以通过后处理，例如离心、过滤、蒸发、气浮、絮凝等方式进一步提高细胞液的浓度，即先通过初步培养得到小浓度的细胞液，然后通过离心、过滤等得到浓度相对较大的细胞液，这样通过“水体培养+后处理”就得到了待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液。在培养过程中，当细胞培养至某一阶段时会分泌粘性物质，此阶段为细胞自身分泌粘性物质的时期，此时接种细胞，所分泌的粘性物质可以增加细胞与载体之间的附着强度。可以理解的是，载体的可附着性是指载体可以使细胞牢固地附着在载体上的能力，可附着性越大，相应地越能够使细胞牢固地附着在载体上。本专利技术实施例提供的一种细胞接种方法，在微藻的附着培养过程中，为使细胞能够牢固地附着在载体上，现有技术基本都只能局限于诸如棉、布等的多孔多绒毛材料，与现有技术相比，本专利技术通过在制备细胞液的过程中将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，利用细胞自身分泌的粘性物质增强了细胞与载体之间的附着强度；或者在接种前对载体预先进行预处理，通过增加载体的可附着性增强了细胞与载体之间的附着强度，使得养殖载体不用再限制为多孔多绒毛的材料，其它在本专利技术之前原本并不适用的材料也能够用作养殖载体，扩大了载体本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞接种方法，其特征在于，所述方法包括：制备待接种浓度为0.5‑300g/L的细胞液；预置载体；将所述待接种浓度为0.5‑300g/L的细胞液附着至所述载体上，其中，所述制备待接种浓度为0.5‑300g/L的细胞液包括：将细胞培养至自身分泌粘性物质的时期，和/或在将所述待接种浓度为0.5‑300g/L的细胞液附着至所述载体上之前，所述方法包括：对所述载体进行增加所述载体的可附着性的预处理。

【技术特征摘要】
1.一种细胞接种方法，其特征在于，所述方法包括：
制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液；
预置载体；
将所述待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上，
其中，
所述制备待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液包括：将细胞培养至
自身分泌粘性物质的时期，和/或
在将所述待接种浓度为0.5-300g/L的细胞液附着至所述载体上之
前，所述方法包括：对所述载体进行增加所述载体的可附着性的预处
理。
2.根据权利要求1所述的细胞接种方法，其特征在于，所述载体
为在日光和水环境下化学性质稳定的非棉材料，所述非棉材料包括硬
质板类材料和不包括棉织物的非棉织物类材料。
3.根据权利要求2所述的细胞接种方法，其特征在于，所述硬质
板类材料包括木质板、金属板、玻璃板、水泥板或塑料板；所述非棉
织物类材料包括涤纶、锦纶、氨纶、腈纶、氯纶。
4.根据权利要求1所述的细胞接种方法，其特征在于，所述将细
胞培养至自身分泌粘性物质的时期的判断方法为：
在培养过程中取细胞液置于显微镜下观察，若观察到细胞周围及
表面出现絮状物，此时细胞处于分泌粘性物质的时期。
5.根据权利要求1所述的细胞接种方法，其特征在于，所述将细
胞培养至自身分泌粘性物质的时期的判断方法为：
所述细胞为小球藻、丝状藻、蓝藻或绿藻的细胞，以大于或等于

【专利技术属性】
技术研发人员：石蕾，程小雪，陈昱，王琳，崔春莉，白雪梅，
申请(专利权)人：新奥科技发展有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13