一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法技术

本发明专利技术公开了一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法，并具体公开了西洋参根尖愈伤组织诱导培养、继代培养和悬浮培养相关因素及组合配比；与现有技术相比，本发明专利技术所述的方法避免了因培养条件的改变导致皂甙含量的变化，使其能够稳定生产人参皂甙；同时，本发明专利技术操作简单、容易控制、方法可靠，通过对培养条件的控制，还能够实现总皂甙与单体皂甙的定向培育，为西洋参皂甙的工业化生产提供了理论依据和技术指导，对资源深度开发利用具有深远的意义。

【技术实现步骤摘要】
一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法
本专利技术涉及的是一种天然产物领域，尤其涉及的是一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法。
技术介绍
西洋参(Panaxquinquefolium)系五加科人参属多年生草本植物。西洋参是生长于北美原始森林中的古老植物，具有“活化石”之称，是一种名贵的中药，药用和经济价值颇高。我国自20世纪80年代成功大面积引种西洋参以来，已发展成为继美国、加拿大后世界第三大西洋参生产国和世界第一大消费国。西洋参味苦，性凉，入心、肺、肾经，以补益为主，可滋阴降火、益气生津。服用方法分为煮、炖、蒸食、切片含化、研成细粉冲服等。西洋参中含有皂甙、多糖、黄酮类、挥发油、微量元素等丰富的生物活性物质，对人体，在免疫调节、抗癌、抗衰老等方面具有独特效果，因此常用于保健品开发利用。无论野生或人工栽培西洋参，因自身生理特性，生长缓慢，大多需4至6年才能收获入药。并且，西洋参种子培养时间长，资源稀少，价格昂贵。因此，开展西洋参细胞培养技术研究，利用西洋参细胞悬浮培养的方法生产人参皂甙，即，工厂化生产皂甙，具有十分重要的现实意义和商业价值。西洋参细胞培养是指在无菌条件下，将离体的西洋参器官(如本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)无菌条件下，取西洋参根尖组织，将其形态学上的下端接种至诱导培养基上，然后置于暗箱中进行愈伤组织诱导培养，获得致密型愈伤组织，所述诱导培养基的配方为：在MS基础培养基中加入1.5～2.5mg/L的2，4‑D和0.5～1.0mg/L的6‑BA，灭菌前调节pH至4.5～5.8；(2)将步骤(1)的致密型愈伤组织转移至继代培养基中，然后置于暗箱中进行继代培养，获得疏松型愈伤组织，所述继代培养基的配方为：在MS基础培养基中加入1.5～2.5mg/L的2，4‑D和0.5～1.0mg/L的6‑BA，调节蔗糖浓度为20～30g/L，灭菌前调节p...

【技术特征摘要】
1.一种生产西洋参皂甙的悬浮培养方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)无菌条件下，取西洋参根尖组织，将其形态学上的下端接种至诱导培养基上，然后置于暗箱中进行愈伤组织诱导培养，获得致密型愈伤组织，所述诱导培养基的配方为：在MS基础培养基中加入1.5～2.5mg/L的2，4-D和0.5～1.0mg/L的6-BA，灭菌前调节pH至4.5～5.8；(2)将步骤(1)的致密型愈伤组织转移至继代培养基中，然后置于暗箱中进行继代培养，获得疏松型愈伤组织，所述继代培养基的配方为：在MS基础培养基中加入1.5～2.5mg/L的2，4-D和0.5～1.0mg/L的6-BA，调节蔗糖浓度为20～30g/L，灭菌前调节pH至4.5～5.8；(3)将步骤(2)的疏松型愈伤组织转移至悬浮培养基中，置于自然光照下振荡悬浮培养，获得悬浮细胞，所述悬浮培养基的配方为：在MS基础培养基中加入0.8～1.0mg/L的2，4-D、0.1mg/L的激动素KT、0.3～0.5mg/L的6-BA、0.3～0.5mg/L的NAA、调节蔗糖浓度为20～30g/L，灭菌前调节pH至4.5～5.8；(4)调节步骤(3)的悬浮培养基的激素配方，将步骤(3)的悬浮细胞进行进一步的定向培养，其中：总皂甙定向培养的悬浮培养基的配方为：在MS基础培养基中加入0.7～1.2mg/L的2，4-D、0.1～0.3mg/L的KT、0.5mg/L的6-BA、0.4～0.8mg/L的NAA，调节蔗糖浓度为20～30g/L，获得富含总皂甙的悬浮细胞；单体皂甙Rg1定向培养的悬浮培养基的配方为：在MS基础培养基中加入0.5～1.0mg/L的2，4-D、0.1mg/L的KT、0.5～1.0mg/L的...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁之恩，孙雨薇，丁昱，魏芬，陆小雨，袁艳，
申请(专利权)人：安徽农业大学，
类型：发明
国别省市：安徽;34