【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
产高效抗菌肽butyrisin的丁酸梭菌的筛选方法,其特征是依次进行以下步骤:1)、基于发酵菌液的抑菌活性进行初筛:以大肠杆菌和金黄色葡萄球菌为指示菌,对待测菌株进行初筛,从而筛选出对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均具有抑菌性的丁酸梭菌;2)、通过PCR验证其抗菌肽butyrisin蛋白基因的表达,依次进行以下步骤:①、基因组提取;②、PCR:根据已报道的分泌抗菌肽butyrisin的编码区进行引物设计,对提取的细菌基因组进行PCR扩增;反应体系(50μL):10×PCR Buffer5μL;dNTPs(各2.5mM)1μL;引物F(10uM/μL)1μL;引物R(10uM/μL)1μL;基因组DNA(50ng/μl)1μL;TaKaRa Ex taq酶(5U/μL)0.5μL;MgCl2(25mM)3μl;牛血清白蛋白BSA(10mM)2.5μl;加双蒸水至50μL;PCR扩增程序:94℃预变性5min;92℃变性30sec,55℃退火30sec,72℃延伸30s,进行30cycle;最后72℃延伸15min;③、琼脂糖检测:PCR产物利用1%琼脂糖凝胶电泳检测:PCR阳性的菌株为产高效抗 ...
【技术特征摘要】
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