一种蛹虫草腺苷的提取方法，其提取方法的具体步骤为：（1）超微粉碎：（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取、酶解提取。本发明专利技术的一种蛹虫草腺苷的提取方法，应用酶解技术破除了蛹虫草坚硬的细胞壁，有利于细胞内容物的溶出，有利于提取过程的顺利进行，在保证腺苷的生物活性的同时，提高腺苷的提职率，减少浪费；应用该方法提取得到的腺苷，不仅提取率高，易于后续的分离纯化，而且易于吸收，能够充分发挥腺苷在体内的功效。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物提取
，尤其涉及一种蛹虫草腺苷的提取方法。
技术介绍
蛹虫草又名北冬虫夏草、北虫草等，与冬虫夏草同属异种，是虫草属的模式种，属于子囊菌亚门虫草属，是其寄生在昆虫纲鳞翅目夜蛾科昆虫蛹体上所长出的子座与僵死蛹体的复合体。多年的研究表明蛹虫草具有免疫调节、抗肿瘤、抗病毒、抗感染等多种药理活性，广泛用于肿瘤、免疫功能低下、包括艾滋病毒感染等多种疾病中。腺苷是一种内源性嘌呤核苷酸，具有广泛的生理活性，蛹虫草中腺苷的含量与冬虫夏草相似，甚至更高，多在0.01%以上。至今已从虫草及发酵菌丝中分离鉴定有11个核苷类化合物，包括腺嘌呤、腺苷、尿嘧啶、尿苷、鸟嘌呤、鸟苷、次黄嘌呤、次黄嘌呤核苷、胸腺嘧啶、胸腺嘧啶脱氧核苷及尿嘧啶脱氧核苷等。虫草素是蛹虫草中主要活性成分，也是第一个从真菌中分离出来的核苷类抗生素，又称虫草菌素、蛹虫草菌素。虫草素的分子式为C10H13N5O3，相对分子质量为251。蛹虫草是在目前已报道的300余种虫草菌中唯一能大量形成虫草素的菌种。天然冬虫夏草或发酵菌丝体中虫草素不存在或极其微量。目前国内外针对其结构及药理作用已经进行了详细的研究，研究证明虫草素具有多种生物活性，主要表现在抗菌、抗炎、抗肿瘤及免疫调节等几个方面。其中虫草素对肿瘤的抑制作用一直是广大科学家们关注的热点。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种蛹虫草腺苷的提取方法。本专利技术的目的通过以下技术方案来实现：一种蛹虫草腺苷的提取方法，其提取方法的具体步骤为：（1）超微粉碎：称取200g烘干的蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎5-15分钟；（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取、酶解提取，包括：a、按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例加入PH值为4.0-6.0的盐酸溶液，称取质量体积比为0.5~1%的破壁酶，于37℃条件下保温10~30min，然后于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干；b、再按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例向上述PH值为4.0-6.0的盐酸溶液提取，结束后自然风干的沉淀中加入pH为6~7.5，浓度为0.1mol/L的磷酸钠缓冲溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干收集上清液，沉淀自然风干；c、最后向自然风干的沉淀中加入6~30倍体积，每g物料加入1ml的提取剂，PH值为8.0~9.0氢氧化钠碱性溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，弃去沉淀；d、合并三次上清液，过0.45um的水系膜后取100ul加超纯水稀释至1000ul，过0.22um的水系膜后，于高效液相色谱仪中测定腺苷的含量，得到蛹虫草腺苷。本专利技术具有以下有益效果1.该方法模拟人体胃肠道酸碱环境进行蛹虫草腺苷的提取，所获得的腺苷易于加工成各种类型的药剂；在生产加工成口服液或其他类型的剂型之后，可确保蛹虫草有效成分的直接吸收，减轻肠胃负担；2.该方法提取蛹虫草腺苷含量高，腺苷的含量可达到每g原药材提取得到2.825mg的量，最终活性成分的提取率可高达0.304%，比其他的常规提取方法提取率都高，且质量可控，料损少，生产周期短，适合大规模生产，市场潜力巨大；3.酶解技术破除了蛹虫草坚硬的细胞壁，有利于细胞内容物的溶出，有利于提取过程的顺利进行，在保证腺苷的生物活性的同时，提高腺苷的提职率，减少浪费；4.应用该方法提取得到的腺苷，不仅提取率高，易于后续的分离纯化，而且易于吸收，能够充分发挥腺苷在体内的功效。具体实施方式实施例1一种蛹虫草腺苷的提取方法，其提取方法的具体步骤为：（1）超微粉碎：称取200g烘干的蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎10分钟。（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取加酶解提取，包括：a、按照料液比（每g物料加入1ml的提取剂）为15(m/v)的比例加入PH值为5.0的盐酸溶液，称取质量体积比为0.5%的破壁酶，于37℃条件下保温20min，然后于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干；b、再按照料液比（每g物料加入1ml的提取剂）为15(m/v)的比例向上述PH值为5.0的盐酸溶液提取。结束后自然风干的沉淀中加入pH为7.0，浓度为0.1mol/L的磷酸钠缓冲溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干收集上清液，沉淀自然风干；c、最后向自然风干的沉淀中加入15倍体积（每g物料加入1ml的提取剂）的PH值为8.5氢氧化钠碱性溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，弃去沉淀；d、合并三次上清液，过0.45um的水系膜后取100ul加超纯水稀释至1000ul，过0.22um的水系膜后于高效液相色谱仪中测定腺苷的含量。腺苷的含量可达到每g原药材提取得到2.265mg的量，最终活性成分的提取率可高达0.272%。实施例2一种蛹虫草腺苷的提取方法，其提取方法的具体步骤为：（1）超微粉碎：称取200g烘干的蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎15分钟。（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取加酶解提取，包括：a、按照料液比（每g物料加入1ml的提取剂）为10(m/v)的比例加入PH值为5.0的盐酸溶液，称取质量体积比为1%的破壁酶，于37℃条件下保温20min，然后于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干；b、再按照料液比（每g物料加入1ml的提取剂）为10 (m/v)的比例向上述PH值为4.0-6.0的盐酸溶液提取。结束后自然风干的沉淀中加入pH为7.0，浓度为0.1mol/L的磷酸钠缓冲溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干收集上清液，沉淀自然风干；c、最后向自然风干的沉淀中加入10倍体积（每g物料加入1ml的提取剂）的PH值为8.5氢氧化钠碱性溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，弃去沉淀；d、合并三次上清液，过0.45um的水系膜后取100ul加超纯水稀释至1000ul，过0.22um的水系膜后于高效液相色谱仪中测定腺苷的含量。腺苷的含量可达到每g原药材提取得到2.825mg的量，最终活性成分的提取率可高达0.304%。本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种蛹虫草腺苷的提取方法，其特征在于：其提取方法的具体步骤为：（1）超微粉碎：称取200g烘干的蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎5‑15分钟；（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取、酶解提取，包括：a、按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例加入PH值为4.0‑6.0的盐酸溶液，称取质量体积比为0.5~1%的破壁酶，于37℃条件下保温10~30min，然后于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干；b、再按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例向上述PH值为4.0‑6.0的盐酸溶液提取，结束后自然风干的沉淀中加入pH为6~7.5，浓度为0.1mol/L的磷酸钠缓冲溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干收集上清液，沉淀自然风干；c、最后向自然风干的沉淀中加入6~30倍体积，每g物料加入1ml的提取剂，PH值为8.0~9.0氢氧化钠碱性溶液，于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，弃去沉淀；d、合并三次上清液，过0.45um的水系膜后取100ul加超纯水稀释至1000ul，过0.22um的水系膜后，于高效液相色谱仪中测定腺苷的含量，得到蛹虫草腺苷。...
【技术特征摘要】
1.一种蛹虫草腺苷的提取方法，其特征在于：其提取方法的具体步骤为：
（1）超微粉碎：称取200g烘干的蛹虫草子实体，放入超微粉碎机中粉碎5-15分钟；
（2）蛹虫草腺苷的超声仿生提取、酶解提取，包括：
a、按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例加入PH值为4.0-6.0的盐酸溶液，称取质量体积比为0.5~1%的破壁酶，于37℃条件下保温10~30min，然后于超声波中以60%~80%的功率加热l~5钟之后，以8000g~12000g的离心力于室温下离心10~30分钟，收集上清液，沉淀自然风干；
b、再按照料液比，每g物料加入1ml的提取剂，为6~25m/v的比例向上述PH值为4.0-6.0的盐酸溶液提取，结束后自...
【专利技术属性】
技术研发人员：陈喜军，
申请(专利权)人：黑龙江众生生物工程有限公司，
类型：发明
国别省市：黑龙江;23
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