一种快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法技术

技术编号:11245372 阅读:182 留言:0更新日期:2015-04-01 18:40
本发明专利技术公开了一种快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法,特别是一种利用SSR分子标记快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法。其利用SSR引物QYXG3或QYXG7对西瓜杂交品种荃抗绿霸及其父母本的基因组DNA进行扩增和聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,找出杂交一代与父母本差异的特征谱带,通过受检种子纯度计算,对荃抗绿霸样品进行检验,其检验的纯度经与田间种植鉴定的纯度对照比较,二者的结果高度一致。本发明专利技术的检测方法在5 h之内即可完成种子纯度鉴定工作,具有简单易行、准确快速、费用低、便于推广等特点。适用于对荃抗绿霸西瓜杂交种及其亲本真实性和品种纯度的检验。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
一种快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法,其特征在于,包括如下步骤:1)提取西瓜杂交品种荃抗绿霸样品基因组DNA;2)以西瓜杂交品种荃抗绿霸样品基因组的DNA为模板,选用SSR引物对进行PCR扩增;所述的SSR引物序列为:QYXG3F :5’‑CCCTATTGCCCATTTTTCTCA‑3’,QYXG3R :5’‑AAATTTGTGCTCTCCGTGGG‑3’;QYXG7F :5’‑CATTGCCGTTTCCATTTTCTTCAC‑3’,QYXG7R:5’‑GTAACATCCAGCAGTTCGCCAT‑3’;3)将步骤2)的扩增产物经8%的双垂直板非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,220 V稳压电泳直至溴酚蓝指示剂迁移至可以使扩增DNA片段能够被清楚识别的距离时,停止电泳;银染法染色,拍照记录待测西瓜杂交品种荃抗绿霸样品DNA的特征谱带;4) 提取西瓜杂交品种荃抗绿霸父母本样品的基因组DNA,然后重复上述步骤 2)‑3)的方法,获得父母本样品DNA的特征谱带;5)以父母本样品DNA的特征谱带作为对照,只有同时具有亲本特征谱带的单株才为真正的“荃抗绿霸”杂交种,缺少亲本任意一个特征谱带均被视为非杂交种;再采用下式计算受检样品的种子纯度:受检样品的种子纯度(%)=(供检样品株数-非杂交种株数)/供检样品株数×100。...

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:王慧张从合陈金节严志周桂香黄艳玲钱奕道杨坤方玉王林
申请(专利权)人:安徽荃银高科种业股份有限公司安徽荃银高科瓜菜种子有限公司
类型:发明
国别省市:安徽;34

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