一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法技术

本发明专利技术公开了一种高纯莫西克汀的膜分离制备方法，属于药物化学技术领域。该方法将预提纯的尼莫克汀溶液经膜过滤；然后通过二氯甲烷萃取后，采用常规浓缩除去溶剂；将浓缩物依次通过上保护反应、氧化反应、肟化反应、去保护反应得到莫西克汀粗品溶液；采用膜分离技术过滤去除杂质；采用膜浓缩技术得到高纯度莫西克汀浓缩液。本发明专利技术的方法由于使用了膜分离技术，代替柱层析和大孔树脂吸附分离方法，该技术不仅稳定可控、简单易行、容易工业化，节省了溶剂用量，及其物料溶液高温溶剂脱除过程，从而降低产物的降解风险，提高产品纯度、质量和收率的同时，节约能源，降低了生产成本。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及药物化学
，具体涉及一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法。
技术介绍
莫西克汀(INN：Moxidectin)是一种大环内酯类的农用抗生素，主要用于治疗牛羊等动物体内的寄生虫病，可通过链霉菌发酵产生尼莫克汀(INN：Nemadectin)，再通过化学反应得到，尼莫克汀和莫西克汀的结构式如式(1)。美国专利US4916154A公开了一种制备莫西克汀的方法，即将链霉菌发酵后产生的发酵液经过固液分离，浸取后得到的尼莫克汀溶液通过萃取，硅胶柱层析，凝胶层析得到纯度90％以上(HPLC)的尼莫克汀，将提纯的尼莫克汀通过上保护、氧化、脱保护和肟化反应得到莫西克汀，在经过硅胶柱层析得到，但该方法工艺复杂，需要操作及控制都繁琐的硅胶凝胶层析，该层析溶剂用量较大，对进入硅胶柱的上柱物无水要求高，反复使用性低，致使该层析收率降低，成本较高。申请号为200810126358.3的中国专利公开了一种用大孔吸附树脂柱分离的方式代替硅胶凝胶层析方式，但是树脂吸附分离的方法仍旧需要使用大量有机溶剂，同时还需要对大量的有机溶剂再处理，程序复杂、投资成本和生产成本较高。上述两种方法，提纯后的料液需要真空脱除有机溶剂，能耗高，产物收率低。
技术实现思路
为克服现在技术存在的不足之处，本专利技术的目的在于提供一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，该方法由于使用了膜分离技术，代替硅胶层析和大孔树脂吸附分离，该方法简便易行、能耗低、提高产品纯度、质量和收率、同时降低了生产成本和投资成本。为实现上述目的，本专利技术技术方案如下：一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，该方法包括如下步骤：(1)将预提纯的尼莫克汀溶液依次经微滤膜和超滤膜过滤，去除尼莫克汀溶液中糖类、蛋白质及大部分脂溶性杂质；过滤后的尼莫克汀溶液浓度为50～60wt.％；该步骤中，所用微滤膜为非离子交换、非极性膜，且选择1-2万截留分子量的中空纤维微滤膜(是指所用微滤膜应选择1-2万截留分子量的中空纤维微滤膜，同时该微滤膜既不能是离子交换膜，也不能是极性膜)；或者，所述微滤膜为非离子交换膜，且选择1500-3000截留分子量的卷式微滤膜(是指所用微滤膜应选择1500-3000截留分子量的卷式微滤膜，同时该微滤膜为非离子交换膜)；所述超滤膜为非离子交换、非极性膜，且选择2000-20000截留分子量的中空纤维或者卷式超滤膜(是指所用超滤膜应选择2000-20000截留分子量的中空纤维或者卷式超滤膜，同时该超滤膜既不能是离子交换膜，也不能是极性膜)。(2)采用纳滤膜将经步骤(1)过滤后的尼莫克汀溶液进行浓缩，得尼莫克汀浓缩液；该步骤中，所述纳滤膜为非离子交换膜，且为200截留分子量的卷式纳滤膜。(3)将步骤(2)所得尼莫克汀浓缩液通过二氯甲烷萃取，萃取后通过减压蒸馏浓缩除去二氯甲烷溶剂，得尼莫克汀浓缩物；(4)将所述尼莫克汀浓缩物依次通过上保护反应、氧化反应和肟化反应后结晶，再经过去保护反应得到莫西克汀粗品；(5)将所述莫西克汀粗品加入到极性有机溶剂和水的混合溶剂中，配制成莫西克汀粗品的溶液，然后将莫西克汀粗品的溶液经过超滤膜过滤(其目的是将步骤(4)中反应副产物除去)，得到莫西克汀纯品溶液；该步骤中，所用超滤膜为非离子交换、非极性膜，且为600-800截留分子量的卷式超滤膜。(6)将所述莫西克汀纯品溶液用纳滤膜浓缩，浓缩后溶液浓度为20～40wt.％；该步骤中，所用纳滤膜为非离子交换、非极性膜，且为200-500截留分子量的卷式纳滤膜。(7)将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液通过直接干燥即得到所述高纯度莫西克汀，或者将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液采用浓缩结晶技术从溶液中分离出所述高纯度莫西克汀。上述步骤(1)中所述预提纯的尼莫克汀溶液是指将链霉菌发酵后产生的发酵液依次经过固液分离和浸取后得到的尼莫克汀溶液。上述步骤(1)、(2)和(6)中，对含有莫西克汀的溶液采用微滤膜、超滤膜和纳滤膜进行过滤或浓缩前，先在含有莫西克汀的溶液中加入极性有机溶剂和水的混合溶剂，配成莫西克汀的极性有机溶液，然后再对其进行过滤或浓缩；所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯；所述混合溶剂中，极性有机溶剂含量为45～75vol.％，优选为40-60vol.％；所述莫西克汀的极性有机溶液中，莫西克汀含量为0.1～20wt.％，。上述步骤(5)中，所述极性有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮或乙酸乙酯；所述混合溶剂中，极性有机溶剂含量为45～75vol.％，优选为40-60vol.％；所述莫西克汀粗品的溶液中，莫西克汀含量为0.1～20wt.％。本专利技术设计思想如下：膜技术是近些年新兴的一种分离提纯技术，文献[Pobert J.Petersen.Composite reverse osmosis and nanofiltration membranes.J.Membrane Sci.1993,83:81]指出，膜分离技术与常规分离技术相比较，具有操作过程简单、无相分离、分离系数大、节能、高效、无二次污染、可常温连续操作、无需外加其他物质等优点，能够实现清洁生产，可直接放大，是一项高新技术，在生物工程，医药领域中得到广泛应用。本专利技术针对浸取后固液分离得到的尼莫克汀提取液，首先将大部分发酵液残留糖类、蛋白质及其大部分脂溶性杂质经过微滤、超滤膜去除。初步提纯的尼莫克汀纯度在50～60wt.％。该组分经过对硝基苯甲酰氯上保护、氧化、肟化化学修饰和常规的结晶方法后，去保护反应物纯度在40～60wt.％。再经过微滤脱除反应和溶液中部分剩余小分子杂质物质，得到93～95wt.％的莫西克汀溶液，最后经过纳滤膜在低温浓缩得到莫西克汀产品浓溶液，再通过常规的干燥或浓缩结晶把莫西克汀从溶液中分离出来，所得莫西克汀产品的纯度为90-95％。本专利技术涉及的预提纯尼莫克汀的制备方法参见：THE JOURNAL OF ANTIBIOTICS(4,1988,519-528)，其固形物所含尼莫克汀3～25wt.％。本专利技术涉及的化学修饰方法参见：CN90107676.7。与现有技术中的方法相比较，本专利技术的优点及有益效果如下：本专利技术方法由于使用了膜分离技术，代替硅胶层析和大孔树脂吸附分离，该方法简便易行、能耗低、提高产品纯度、质量和收率、同时降低了生产成本和投资成本。具体实施方式下面通过实施例进一步说明本专利技术。应该理解的是，本专利技术实施例的制备方<本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，其特征在于：该方法包括如下步骤：(1)将预提纯的尼莫克汀溶液依次经微滤膜和超滤膜过滤，去除尼莫克汀溶液中糖类、蛋白质及大部分脂溶性杂质；过滤后的尼莫克汀溶液浓度为50～60wt.％；(2)采用纳滤膜将经步骤(1)过滤后的尼莫克汀溶液进行浓缩，得尼莫克汀浓缩液；(3)将步骤(2)所得尼莫克汀浓缩液通过二氯甲烷萃取，萃取后通过减压蒸馏浓缩除去二氯甲烷溶剂，得尼莫克汀浓缩物；(4)将所述尼莫克汀浓缩物依次通过上保护反应、氧化反应和肟化反应后结晶，再经过去保护反应得到莫西克汀粗品；(5)将所述莫西克汀粗品加入到极性有机溶剂和水的混合溶剂中，配制成莫西克汀粗品的溶液，然后将莫西克汀粗品的溶液经过超滤膜过滤，得到莫西克汀纯品溶液；(6)将所述莫西克汀纯品溶液用纳滤膜浓缩，浓缩后溶液浓度为20～40wt.％；(7)将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液通过直接干燥即得到所述高纯度莫西克汀，或者将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液采用浓缩结晶技术从溶液中分离出所述高纯度莫西克汀。

【技术特征摘要】
1.一种高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，其特征在于：该方法包括如下
步骤：
(1)将预提纯的尼莫克汀溶液依次经微滤膜和超滤膜过滤，去除尼莫克汀
溶液中糖类、蛋白质及大部分脂溶性杂质；过滤后的尼莫克汀溶液浓度为
50～60wt.％；
(2)采用纳滤膜将经步骤(1)过滤后的尼莫克汀溶液进行浓缩，得尼莫克
汀浓缩液；
(3)将步骤(2)所得尼莫克汀浓缩液通过二氯甲烷萃取，萃取后通过减压
蒸馏浓缩除去二氯甲烷溶剂，得尼莫克汀浓缩物；
(4)将所述尼莫克汀浓缩物依次通过上保护反应、氧化反应和肟化反应后
结晶，再经过去保护反应得到莫西克汀粗品；
(5)将所述莫西克汀粗品加入到极性有机溶剂和水的混合溶剂中，配制成
莫西克汀粗品的溶液，然后将莫西克汀粗品的溶液经过超滤膜过滤，得到莫西克
汀纯品溶液；
(6)将所述莫西克汀纯品溶液用纳滤膜浓缩，浓缩后溶液浓度为
20～40wt.％；
(7)将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液通过直接干燥即得到所述高
纯度莫西克汀，或者将经步骤(6)浓缩后的莫西克汀纯品溶液采用浓缩结晶技
术从溶液中分离出所述高纯度莫西克汀。
2.根据权利要求1所述的高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，其特征在
于：步骤(1)中所述预提纯的尼莫克汀溶液是指将链霉菌发酵后产生的发酵液
依次经过固液分离和浸取后得到的尼莫克汀溶液。
3.根据权利要求1所述的高纯度莫西克汀的膜分离制备方法，其特征在
于：步骤(1)中，所述微滤膜为非离子交换、非极性膜，且选择1-2万截留分
子量的中空纤维微滤膜；或者，所述微滤膜为非离子交换膜，且选择1500-3000
截...

【专利技术属性】
技术研发人员：李贺先，戴耀，王维新，赵丹阳，王荣良，
申请(专利权)人：大连九信生物化工科技有限公司，
类型：发明
国别省市：辽宁;21