一种自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物及其用途制造技术

本发明专利技术涉及生物制药领域，提供一种新的治疗肿瘤的药物复合物，具体涉及一种自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物及其用途；该药物复合物用于治疗肿瘤。该药物复合物能在体外显著增强精氨酸酶的抗肿瘤活性；能减少人重组精氨酸酶的免疫原性，延长精氨酸酶在体内的半衰期。本发明专利技术提供了多聚唾液酸修饰的精氨酸酶，该多聚唾液酸修饰的精氨酸酶由活化的多聚唾液酸在氰基硼氢化钠存在的情况下与精氨酸酶反应成偶联物；本发明专利技术的药物复合物可增强精氨酸酶对肿瘤的杀伤作用，增强精氨酸酶的疗效，尤其是治疗黑色素瘤和乳腺癌的疗效。

【技术实现步骤摘要】
一种自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物及其用途
本专利技术属医药
，涉及新的治疗肿瘤的药物复合物；具体涉及一种自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物及其用途；该药物复合物用于治疗肿瘤，尤其治疗黑色素瘤和肝癌。
技术介绍
精氨酸酶是哺乳动物肝脏中参与尿素循环的一种关键酶，在尿素循环中将精氨酸转化为鸟氨酸和尿素。现有技术公开了精氨酸是维持部分肿瘤细胞生长的必需氨基酸，肿瘤细胞内精氨酸水平低于一定值后，将导致细胞死亡。精氨酸酶能在体内外特异高效的降解精氨酸。精氨酸在人体的正常生理功能中具有重要作用，是一种半必须氨基酸，正常体细胞能够通过尿素循环将其他氨基酸转化为精氨酸，从而抵消外源性精氨酸缺乏；然而，对于部分精氨酸依赖的肿瘤细胞，由于缺乏尿素循环过程中的关键酶，在外源性精氨酸剥夺时，无法自身合成精氨酸，最终导致细胞死亡。精氨酸酶能够在体内外降解精氨酸，导致精氨酸依赖的肿瘤细胞死亡，而对正常细胞无影响。有研究在体外试验中，发现精氨酸酶能显著杀伤肝癌细胞、黑色素瘤细胞、胰腺癌细胞以及白血病细胞等[①LamTL，WongGK，ChongHC，ChengPN，ChoiSC，ChowTL，etal.Recombinanthumanarginaseinhibitsproliferationofhumanhepatocellularcarcinomabyinducingcellcyclearrest.Cancerletters.2009；277：91-100.②HernandezCP，MorrowK，Lopez-BarconsLA，ZabaletaJ，SierraR，VelascoC，etal.PegylatedarginaseI：apotentialtherapeuticapproachinT-ALL.Blood.2010；115：5214-21.③HsuehEC，KnebelSM，LoWH，LeungYC，ChengPN，HsuehCT.Deprivationofargininebyrecombinanthumanarginaseinprostatecancercells.Journalofhematology＆oncology.2012；5：17.]精氨酸酶治疗肝癌的一期临床结果显示了其良好的成药性能[YauT，ChengPN，ChanP，ChanW，ChenL，YuenJ，etal.Aphaseldose-escalatingstudyofpegylatedrecombinanthumanarginasel(Peg-rhArgl)inpatientswithadvancedhepatocellularcarcinoma.Investigationalnewdrugs.2012.]，据了解，精氨酸酶用于肝癌的治疗用研究已经完成二期临床试验，表现出良好的应用前景；皮肤恶性黑素瘤(cutanousmalignantmelanoma，CMM)发病率呈上升趋势，据美国国家癌症研究中心网上数据表明：美国白人CMM发病率从1973年的7.5/100000上升到2001年的22.5/100000。在我国，黑色素瘤发病率成增高趋势，尽管多数早期患者通过手术能够得到治愈，但对于进展期患者，化疗通常效果不佳，因而寻找新的治疗策略尤为重要。但精氨酸酶在体内低亲和力和较短的半衰期等因素影响了药物的抗肿瘤疗效。因此，进一步提高精氨酸酶体内的抗肿瘤活性将有助于其抗肿瘤应用。多聚唾液酸是N-乙酰神经氨酸通过N-连接糖苷键多聚形成的独特碳水化合物，研究发现多聚唾液酸化多肽或蛋白质在保持活性的前提下，修饰后可显著降低肽类化合物水解，延长半衰期，降低免疫原性(GregoriadisG，FernandesA，MitalM，McCormackB：Polysialicacids：potentialinimprovingthestabilityandpharmacokineticsofproteinsandothertherapeutics.CellMolLifeSci2000；57(13-14)：1964-1969)。Fernandes等利用多聚唾液酸对L-天冬酰胺酶进行修饰，修饰后酶的抗原性和免疫原性均低于天冬酰胺酶，但修饰后酶抗胰蛋白酶的水解能力和体外半衰期明显增强(FernandesAI，GregoriadisG：Theeffectofpolysialylationontheimmunogenicityandantigenicityofasparaginase：implicationinitspharmacokinetics.IntJPharm2001；217(1-2)：215-224)；林怡等对铜锌超氧化物歧化酶进行多聚唾液酸修饰，修饰后产物的稳定性实验结果表明，多聚唾液酸修饰可提高铜锌超氧化物歧化酶的酸碱稳定性、热稳定性和抗酶降解能力(WuJR，LinY，ZhengZY，LinCC，ZhanXB，ShenYQ：ImprovementoftheCuZn-superoxidedismutaseenzymeactivityandstabilityasatherapeuticagentbymodificationwithpolysialicacids.BiotechnolLett2010；32(12)：1939-1945)。此外多聚唾液酸通过改变神经系统神经黏附分子的黏附性调节神经细胞发育，对神经细胞功能的维持起重要作用(WeberM，ModemannS，SchipperP，TrauerH，FrankeH，IllesP，GeigerKD，HengstlerJG，KleemannWJ：Increasedpolysialicacidneuralcelladhesionmoleculeexpressioninhumanhippocampusofheroinaddicts.Neuroscience2006；138(4)：1215-1223；AngataK，HuckabyV，RanschtB，TerskikhA，MarthJD，FukudaM：Polysialicacid-directedmigrationanddifferentiationofneuralprecursorsareessentialformousebraindevelopment.MolCellBiol2007；27(19)：6659-6668)。细胞自噬(autophagy)又叫II型程序性死亡(typeIIprogrammedcelldeath)，是真核生物体内常见的“自我消化”(cellulardegradation)的现象，能分解细胞内受损或多余的细胞器和蛋白产生核苷酸，氨基酸等小分子物质供细胞合成新的蛋白质，并能维持细胞内微环境的稳定。研究发现其与多种疾病，尤其是肿瘤的发展关系密切。根据细胞内底物运送到溶酶体腔内方式的不同，哺乳动物细胞自噬可分为三种方式：大自噬(macroautophagy)、小自噬(microautophagy)和分子伴侣介导的自噬(chaperone-mediatedautophagy，CMA)。主要概述的大自噬(以下简称自噬)与肿瘤发展及治疗关系最为密切本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种细胞自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物，其特征在于，由一种或多种自噬抑制剂和精氨酸酶组成；所述的细胞自噬抑制剂选自3‑MA、渥曼青霉素、LY294002、放线菌酮、巴法洛霉素A1、NH4C1、氯喹或羟基氯喹；所述的精氨酸酶选自鼠源精氨酸酶、人重组精氨酸酶或长效化修饰的精氨酸酶。

【技术特征摘要】
1.用于治疗肿瘤的细胞自噬抑制剂与精氨酸酶药物复合物，其特征在于，由一种或多种自噬抑制剂和精氨酸酶组成；所述的细胞自噬抑制剂选自3-MA、氯喹或羟基氯喹；所述的精氨酸酶选自聚乙二醇修饰的人重组精氨酸酶或多聚唾液酸修饰的人重组精氨酸酶或采用活化的多聚唾液酸末端第7位的单醛基与精氨酸酶的氨基进行反应获得化学修饰长效精氨酸酶；所述的药物中，细胞自噬抑制剂与精氨酸酶序贯使用。2.按权利要求1所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：鞠佃文，王子玉，赵舒薇，李玉彬，曾贤，范佳君，王绍飞，李力，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：上海;31