本发明专利技术涉及一种防风挥发油的制备方法及其应用，其制备方法如下：（1）原料粉碎、过筛，采用生物酶发酵；（2）发酵后原料采用超临界CO2进行提取；（3）提取液再经有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得防风挥发油。本发明专利技术工艺简单、环保、提取时间短、耗能小，产品得率高且品质佳。经药效学评价，防风挥发油具有明显的抗肿瘤作用，且其毒副作用小。将防风挥发油与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂和口服液中的一种。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种防风挥发油的制备方法及其应用，其制备方法如下：（1）原料粉碎、过筛，采用生物酶发酵；（2）发酵后原料采用超临界CO2进行提取；（3）提取液再经有机溶剂萃取、无水硫酸钠干燥、减压浓缩等步骤，即得防风挥发油。本专利技术工艺简单、环保、提取时间短、耗能小，产品得率高且品质佳。经药效学评价，防风挥发油具有明显的抗肿瘤作用，且其毒副作用小。将防风挥发油与医学上可接受的辅料一起制成抗肿瘤的药物，药物的剂型为注射剂、胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂和口服液中的一种。【专利说明】一种防风挥发油的制备方法及其应用
本专利技术涉及一种防风挥发油的制备方法及其在制备抗肿瘤作用的药物中的应用。
技术介绍
防风又名屏风、风肉、茴芸、茴草，为伞形科植物的干燥根，味辛、甘，性微温，归肺、 脾、肝经。具有祛风解表、胜湿止痛、止痉的功效，主治感冒头痛、风寒湿痹、风疹瘙痒、破伤 风等。药理学的研究证明，防风中主要含有挥发油性色原酮类。香豆素类、多糖类、有机酸 类、聚乙炔类、甘油酯类等成分。现代研究表明其挥发油有镇痛活性，具有抗炎、止血作用， 有一定的自由基清除能力。 防风挥发油中特征成分之一为人参炔醇，常以其作为防风挥发油质量评价指标性 成分。现代药理学研究表明，人参炔醇具有抗癌、抑菌、镇静、镇痛、降压抗炎和神经细胞保 护等药理作用，而且对实验性迟发型超敏反应有显著的抑制作用。 国内外对防风上述一些化学成分提取工艺的研究已有相关报道，但关于防风挥发 油的提取工艺很少见报道。目前，提取挥发性成分的常规工艺是水蒸气蒸馏法、超临界萃取 法等。水蒸气蒸馏法提取温度高，时间长，易使对湿热不稳定的挥发性成分发生变化，且高 沸点的成分难以检测；而超临界流体萃取法是一种新的提取方法，提取挥发油能力强，具有 防止氧化、热解及提高挥发油品质等优点，但该工艺需要高压设备，技术要求高，设备费用 投资大，应用还不普遍。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种防风挥发油的制备方法及其在制备抗肿瘤药物中的 应用。 本专利技术包括以下步骤： a. 将防风干燥粉碎，过40目筛，加入相当于防风粉末重量1~2%的纤维素酶后溶于 〇. 5?1倍的ρΗ4. (Γ5. 0的柠檬酸/柠檬酸钠钠缓冲溶液中，密封，于4(T50°C发酵Γ6天； b. 将发酵后的原料置于超临界CO2萃取装置中，设置萃取压力为2(T30MPa、萃取温度 4(T50°C，分离釜压力1(T15 MPa、温度2(T30°C，CO2流量为20?301711，经过2?311的萃取后 收集萃取物； c. 所得萃取物用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，再经无水硫酸钠干燥脱水、减压浓 缩，即得防风挥发油。 步骤a中所述的纤维素酶的活性为4(T60U/mg。 步骤c中所述的有机溶剂为石油醚、乙醚中的任意一种。 防风挥发油可用于制备具有抗肿瘤作用的药物中，在剂型方面可采用各种剂型， 如片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂或缓释剂。 防风挥发油抗肿瘤活性实验： 1、受试提取物：防风挥发油 2、细胞株：肺癌细胞株GLC4、结肠癌细胞株COLO。 3、给药剂量和方法 防风挥发油组：l〇mg/kg/天,灌胃给药,隔一天一次,共五天。 阴性对照组：10mg/kg/天，生理盐水肌注给药，隔一天一次，共五天。 阳性对照组：30mg/kg/天，5-氟尿嘧啶肌注给药，隔一天一次，共五天。 灌胃后2h，用HPLC检测血浆药物浓度。 4、种植瘤模型的建立与给药 (1)皮下种植：分别将上述细胞培养至90%融合，收集细胞，取2X10 6细胞悬液，注射 至小鼠肋下皮下组织，于术后15天取材，称量瘤重。另取同样模型，观察30天，计算药物对 模型动物存活率的影响。 (2)肺内种植瘤肺转移模型：取2 X 10 6细胞悬液注射至小鼠肺包膜内，于术后15 天取肺，测量瘤重和肺转移数。 (3)给药方式：种植瘤细胞同时给药。 5、结果 结果如表1、表2和表3显示，防风挥发油组用药均有不同程度的抑制肿瘤生长和转移 的作用，可延长实验小鼠的生存期。 表1防风挥发油对种植瘤的抑制作用（n=20,i±S) 【权利要求】1. 一种防风挥发油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： a. 将防风干燥粉碎，过40目筛，加入相当于防风粉末重量1~2%的纤维素酶后溶于 〇. 5?1倍的ρΗ4. (Γ5. 0的柠檬酸/柠檬酸钠钠缓冲溶液中，密封，于4(T50°C发酵Γ6天； b. 将发酵后的原料置于超临界C02萃取装置中，设置萃取压力为2(T30MPa、萃取温度 4(T50°C，分离釜压力1(T15 MPa、温度2(T30°C，C02流量为20?301711，经过2?311的萃取后 收集萃取物； c. 所得萃取物用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，再经无水硫酸钠干燥脱水、减压浓 缩，即得莪术挥发油。2. 根据权利要求1所述的一种防风挥发油的制备方法，其特征在于，步骤a中所述的纤 维素酶的活性为4(T60U/mg。3. 根据权利要求1所述的一种防风挥发油的制备方法，其特征在于，步骤c中所述的有 机溶剂为石油醚、乙醚中的任意一种。4. 根据权利要求Γ3所述方法制备的防风挥发油在制备具有抗肿瘤作用的药物的应 用，特征在于防风挥发油与药学上适用载体混合，制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、丸剂或 缓释剂。【文档编号】A61P35/00GK104274506SQ201410550558【公开日】2015年1月14日 申请日期:2014年10月17日 优先权日:2014年10月17日 【专利技术者】刘东锋, 杨成东 申请人:南京帝道农业科技有限公司本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种防风挥发油的制备方法，其特征在于，包括以下步骤： a.将防风干燥粉碎，过40目筛，加入相当于防风粉末重量1~2%的纤维素酶后溶于0.5~1倍的pH4.0~5.0的柠檬酸/柠檬酸钠钠缓冲溶液中，密封，于40~50℃发酵4~6天；b.将发酵后的原料置于超临界CO2萃取装置中，设置萃取压力为20~30MPa、萃取温度40~50℃，分离釜压力10~15 MPa、温度20~30℃，CO2流量为20~30L/h，经过2~3h的萃取后收集萃取物；c.所得萃取物用有机溶剂萃取2~3次，合并萃取液，再经无水硫酸钠干燥脱水、减压浓缩，即得莪术挥发油。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：刘东锋，杨成东，
申请(专利权)人：南京帝道农业科技有限公司，
类型：发明
国别省市：江苏;32
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