【技术实现步骤摘要】
【技术保护点】
一株产聚3‑羟基丁酸酯的重组大肠杆菌的构建方法,其特征是包括如下步骤:(1)设计以SEQ ID NO.1所示的代号为RBS5的核糖体结合位点,将Escherichia coli JM109的sdaA基因的启动子和核糖体结合位点序列置换为以SEQ ID NO.33所示的组成型启动子trc及RBS5,构建工程菌株SD01;(2)设计以SEQ ID NO.2所示的核糖体结合位点RBS1、以SEQ ID NO.3所示的核糖体结合位点RBS2、以SEQ ID NO.4所示的核糖体结合位点RBS3和以SEQ ID NO.5所示的核糖体结合位点RBS4;(3)将RBS1和SEQ ID NO.36所示的基因pgk编码序列连接成片段1、将RBS2和SEQ ID NO.37所示的基因serA编码序列连接成片段2、将RBS3和SEQ ID NO.38所示的基因serB编码序列连接成片段3、将RBS4和SEQ ID NO.39所示的基因serC编码序列连接成片段4;(4)将片段1、片段2、片段3和片段4通过重叠‑延伸PCR融合为操纵子PSer,与SEQ ID NO.32所示的含启动子的转录调控序列Trc‑16 ...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员:陈涛,林振泉,张妍,刘巧洁,王智文,赵学明,
申请(专利权)人:天津大学,
类型:发明
国别省市:天津;12
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