一种银杏叶提取物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种银杏叶提取物及其制备方法和应用。本发明专利技术所述的银杏叶提取物中总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为30％～70％(w/w)，原花青素含量为20％～60％(w/w)，总银杏萜内酯％+总黄酮％+原花青素％>90％，且总黄酮醇苷含量20％～50％(w/w)，其可作为制备用于预防或治疗神经系统疾病，如糖尿病性白内障、糖尿病性视神经病变或糖尿病性视网膜脂血症的食品、保健食品或药品。其制备方法包括：乙醇水溶液提取银杏叶，提取液浓缩至稠膏，冷水浸提稠膏，过滤后，滤液用大孔树脂吸附分离，洗脱液浓缩干燥后得银杏叶提取物。

【技术实现步骤摘要】
一种银杏叶提取物及其制备方法和应用
本专利技术涉及天然植物提取物，具体涉及从一种银杏叶提取物及其制备方法和应用。
技术介绍
各国药典中收载的银杏叶提取物活性成分为黄酮和内酯，如《中国药典》2010年第一版收载银杏叶提取物含量测定仅限定总黄酮醇苷和银杏内酯的含量分别不得低于0.40％、0.25％。但近年来，越来越多的报道提示原花青素是植物界中抗氧化能力最强的成分之一，对心脑血管疾病、神经系统疾病等的预防和治疗均具有很好的作用。而且，银杏叶中含有资源丰富的原花青素，其在银杏叶干品中的含量可达0.5％～4％，甚至更高。因此，从银杏叶中同时提取黄酮、内酯、原花青素用于开发药物具有良好的发展前景。但目前为止，银杏叶中的原花青素开发利用还比较缺乏，大部分文献研究仍然集中在提高总黄酮、内酯的含量方面，提取物中原花青素的含量仍然偏低，如CN1660224公开了一种葡萄提取物1-99％、银杏叶提取物1-99％的抗氧化组合物，葡萄提取物含有原花青素(葡萄籽中的原花青素成分与银杏叶中的原花青素成分不同，后者抗氧化能力强于前者)和白藜芦醇，银杏叶提取物含有黄酮类物质，或同时含有黄酮类物质和内酯类物质；CN100421680公开了银杏叶提取物及其制备方法和应用，银杏叶提取物中银杏总黄酮>64％，银杏总内酯>11％，原花青素类化合物含7-10％。因此，开发一种原花青素、黄酮、内酯含量都较高的银杏叶提取物，对于银杏叶的综合利用、疾病的治疗都具有重要的价值。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供了一种银杏叶提取物及其制备方法和应用，该提取物中银杏萜内酯、黄酮和原花青素三者的含量超过90％，其中，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为30％～70％(w/w)，原花青素含量为20％～60％(w/w)，且总黄酮醇苷含量20％～50％(w/w)。为了获得更好的药理活性，上述银杏叶提取物中，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为40％～60％(w/w)，原花青素含量为30％～50％(w/w)，且总黄酮醇苷含量24％～32％(w/w)，原花青素/总黄酮醇苷含量比值1～2。本专利技术的另一目的是提供了一种银杏叶提取物的制备方法，具体制备步骤如下：1)银杏叶经粉碎后，用乙醇溶液30～90％(v/v)提取，共2～3次，每次1～3小时，每次乙醇溶液用量为银杏叶的3～10倍，获得提取液；2)回收提取液至黑色黏稠状浸膏；3)浸膏冷却至低于30℃，用水浸提浸膏，水的用量为浸膏的3～10倍，浸提时间为1～48小时；4)浸提液过滤，滤液用大孔树脂吸附分离，用乙醇溶液进行洗脱，获得洗脱液；5)洗脱液干燥后即得银杏叶提取物。作为优选方案，步骤1)中，银杏叶经粉碎后，用乙醇溶液60％(v/v)提取，共提取3次，每次1小时，每次乙醇溶液用量为银杏叶的8倍。步骤2)中，回收提取液至黑色黏稠状浸膏，该黑色黏稠状浸膏在50℃时，相对密度为1.25～1.30。步骤3)中，浸膏冷却至室温后，用4～25℃水浸提8～24h，水的用量为浸膏的6倍。步骤4)浸提液过滤，滤液用HPD417大孔树脂吸附，水洗后，用乙醇溶液50％(v/v)洗脱，获得洗脱液；步骤5)洗脱液干燥后即得银杏叶提取物。本专利技术人发现，本专利技术提供的银杏叶提取物所含的银杏原花青素含量高达20-60％(w/w)，总黄酮醇苷为20-50％(w/w)，该银杏叶提取物具有较好的抗氧化作用，可以改善模型小鼠的神经功能，可用于预防或治疗糖尿病性白内障、糖尿病性视神经病变、糖尿病性视网膜脂血症等。且当该银杏叶提取物中原花青素：黄酮醇苷含量比例在1：1～2：1之间时，上述作用更强。因此，本专利技术制备的银杏叶提取物，其可作为制备用于预防或治疗神经系统疾病的食品、保健食品或药品。本专利技术以银杏叶为原料，通过醇提、浓缩至稠膏、水浸提、树脂纯化步骤制备目标产物，获得银杏叶提取物。本专利技术取得以下有益效果：1、本专利技术提供了一种银杏叶提取物，银杏萜内酯、黄酮和原花青素三者的含量>90％，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为40％～60％(w/w)，原花青素含量为30％～50％(w/w)，且总黄酮醇苷含量24％～32％(w/w)，原花青素/总黄酮醇苷含量比值1～2，具有更好的药理活性。2、本专利技术提供了一种银杏叶提取物制备方法，包括醇提、浓缩至稠膏、水浸提、树脂纯化四个过程，操作简单，对仪器设备的要求低、成本低，适合工业化生产。3、本专利技术提供的银杏叶提取物制备方法中的步骤3回收提取液至黑色黏稠状浸膏，用水浸提该稠膏，所得浸提液可以很好的分离溶液和沉淀，仅用滤纸即可以滤清浸提液，成本低、速度快、且最大程度的保留了原花青素成分，使提取物中的原花青素含量达到20％以上，具有更好的药理活性。4、本专利技术提供了一种制备预防或治疗神经系统疾病的药物，可用于治疗糖尿病性白内障、糖尿病性视神经病变、糖尿性视网膜脂血症。具体实施方案：下面的实施例，用于进一步说明和描述本专利技术，但并不意味着本专利技术仅限于此。实施例1：原花青素、总黄酮、总黄酮醇苷、总萜内酯含量测定方法1.原花青素含量测定1.1供试品溶液：精密称取试样粉末100mg，置50ml容量瓶中，精密加甲醇30mL，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，取上清液，即得。1.2原花青素对照品标准曲线制备：取原花青素对照品30mg，精密称定，置50ml容量瓶中，精密加甲醇30mL，超声处理20min，放冷至室温后，加甲醇至刻度，摇匀，吸取原花青素对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0mL，分别置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀。分别取1ml入10ml西林瓶中，再依次加入0.2ml硫酸铁铵溶液，6ml盐酸-正丁醇(5：95，V/V)，摇匀，密封，置沸水浴水解40min，水解结束立即置冰水中冷却，于546nm波长处测吸光度值。以吸光度为纵坐标，对照品浓度为横坐标(mg/mL)，绘制标准曲线。1.3样品测定：精密吸取供试品溶液1mL，照“1.2”自“入10ml西林瓶中”起，在546nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含原花青素的浓度，计算样品中原花青素的含量。2.总黄酮含量测定2.1供试品溶液：精密称取试样粉末100mg，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇25mL，密塞，称定重量，超声处理30分钟，放冷至室温，称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，离心，取上清液作为供试品溶液。2.2芦丁对照品标准曲线制备：精密吸取芦丁对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0mL，分别置25mL量瓶中，加水至6mL，加入5％亚硝酸钠溶液1mL，摇匀，放置6min，加10％硝酸铝溶液1mL，摇匀放置6min，加氢氧化钠试液10mL，摇匀，再加水至刻度，摇匀，放置15分钟，以0.0mL对照品溶液制得的溶剂为空白，在波长510nm处分别测定吸收度值。以吸光度为纵坐标，对照品浓度为横坐标(mg/mL)，绘制标准曲线。2.3样品测定：精密吸取供试品溶液2mL，至25mL量瓶中，照“2.2”自“加水至6mL”起，在510nm波长处测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中含总黄酮的浓度，计算样品中总黄酮的含量。3.总黄酮醇苷含量测定3本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种银杏叶提取物，其特征在于，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为30％～70％(w/w)，原花青素含量为20％～60％(w/w)，总银杏萜内酯％+总黄酮％+原花青素％>90％，且总黄酮醇苷含量20％～50％(w/w)。

【技术特征摘要】
1.一种银杏叶提取物，其特征在于，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为30％～70％(w/w)，原花青素含量为20％～60％(w/w)，总银杏萜内酯％+总黄酮％+原花青素％>90％，且总黄酮醇苷含量20％～50％(w/w)。2.根据权利要求1所述的一种银杏叶提取物，其特征在于，总银杏萜内酯的含量为6％～12％(w/w)，总黄酮含量为40％～60％(w/w)，原花青素含量为30％～50％(w/w)，总银杏萜内酯％+总黄酮％+原花青素％>90％，且总黄酮醇苷含量24％～32％(w/w)，原花青素/总黄酮醇苷的含量比值为1～2。3.根据权利要求2所述的一种银杏叶提取物，其特征在于，银杏叶提取物中总银杏萜内酯的含量为8％(w/w)，总黄酮含量为39％(w/w)，原花青素含量为48％(w/w)，且总黄酮醇苷含量24％(w/w)。4.权利要求1或2或3所述的一种银杏叶提取物的制备方法，其特征在于，1)银杏叶经粉碎后，用乙醇溶液30～90％(v/v)提取，共2～3次，每次1～3小时，每次乙醇溶液用量为银杏叶的3～10倍，获得提取液；2)回收提取液至黑色黏稠状浸膏；3)浸膏...

【专利技术属性】
技术研发人员：乔洪翔，王如伟，胡江宁，陈琳，何厚洪，瞿伟，陈玲芳，吕丽丽，
申请(专利权)人：浙江康恩贝制药股份有限公司，浙江康恩贝药品研究开发有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33