一种类Metalnikowin抗菌肽及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一种类Metalnikowin抗菌肽及其应用，属于分子生物学技术领域。类Metalnikowin抗菌肽由23个氨基酸组成，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，分子量大小为2742.17Da。该抗菌肽能够抑制鸡大肠杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和巴氏杆菌等细菌的生长，与青霉素、链霉素、头孢唑啉钠、阿奇霉素等抗生素相比，抑菌效果相对较好，与Metalnikowin I、Metalnikowin IIA、Metalnikowin IIB等常规的Metalnikowin抗菌肽相比，具有更强的抑菌活性。该抗菌肽对沙门氏菌的最小抑菌浓度为312.5μg/mL，热稳定性良好，还能促进雏鸡增重，在抗菌性药物研制和畜牧业发展中具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种类Metalnikowin抗菌肽，以及该抗菌肽的应用，属于分子生物学

技术介绍
抗菌肽(Antibacterial peptide)是由多种生物细胞特定基因编码经外界条件诱导产生的一类小分子多肽，分子量为2000～7000Da，由20～60个氨基酸残基组成。世界上第一个抗菌肽是由瑞典科学家G.Boman等人于1980年从天蚕蛹中发现的。此后，人们在细菌、真菌、植物、昆虫、两栖类动物、鸟类、鱼类、哺乳动物乃至人类等多种生物体中陆续发现并分离了多种抗菌肽。迄今为止，国内外报道大约有2000多种抗菌肽被鉴定、分离出来，以天然抗菌肽作模板进行人工合成的模拟肽已达数千种。这些抗菌肽大多具有广谱抗细菌、真菌、病毒、原虫和抑杀肿瘤细胞等活性，而且在天然免疫中也扮演着重要角色，有些抗菌肽具有调节免疫、促中性粒细胞、T细胞的化学趋化、促进伤口愈合、诱导细胞凋亡、抑制蛋白激酶C、抑制促肾上腺皮质激素等多方面生物功能。长期、广泛、不加选择地使用抗生素药物所引发药物残留、细菌耐药性增强、机体自身免疫力下降等一系列问题，给细菌性疾病的防治带来极大的麻烦和困难，同时也给人类的健康带来潜在的威胁。而具有广谱、高效抗病原微生物等特点的抗菌肽不同于传统的抗生素药物，其独特的杀菌机制使细菌不易产生耐药性，这一发现为解决细菌对传统抗生素日益增强的耐药性这一棘手的全球性难题提供了新的途径，提示抗菌肽可作为抗生素良好的替代品在临床上得到广泛使用将是大势所趋。目前，抗菌肽已引起人们的广泛关注，其研究及应用已成为生物制药领域中的热点。随着研究的不断深入，许多抗菌肽正在被开发成药物，Metalnikowin类抗菌肽是1995年从果蝇中分离、鉴定出的一种新的由26个氨基酸组成的富含脯氨酸的免疫肽，该抗菌肽具有抗革兰氏阳性菌和真菌的活性。然而，与传统抗生素相比，天然来源的抗菌肽产量低、抗菌活性不够理想，有的甚至存在细胞毒性。因此，在揭示抗菌肽结构与功能关系及作用机制的基础上，以性质优良的抗菌肽为模板，对已有抗菌肽进行人工改造和设计新抗菌肽分子已成为抗菌肽开发的一个重要内容。与天然来源的抗菌肽相比，人工设计的抗菌肽往往具有更好的靶细胞特异性和抗菌活性，而且具有低溶血活性和对蛋白酶降解作用的低敏感性等特点。因此，开发具有结构简单、抗菌活性高、化学合成容易的抗菌肽成为当前抗菌药物开发迫切的需求。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种类Metalnikowin抗菌肽。同时，本专利技术还提供一种类Metalnikowin抗菌肽的应用。为了实现以上目的，本专利技术所采用的技术方案是：一种类Metalnikowin抗菌肽，其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。抗菌肽的分子量为2742.17Da。所述抗菌肽包含Metalnikowin V-D-K-P-D-Y-R-P-R-P抗菌活性结构，R-P-R-P-W-P-R-P基本结构单元构成双侧疏水性α-螺旋结构。同时富含精氨酸(R)残基(带正电荷)，可吸引细菌表面的负电荷。上述类Metalnikowin抗菌肽可通过人工合成，即多肽固相合成的方法或基因工程方法获得。一种类Metalnikowin抗菌肽的应用，包括类Metalnikowin抗菌肽在制备抗菌性药物方面的应用。在抗菌性药物中，类Metalnikowin抗菌肽可按常规方法制成不同药物剂型，如片剂、散剂、注射针剂等。类Metalnikowin抗菌肽为抗菌活性成分，在药物中，类Metalnikowin抗菌肽的含量范围为0.2～50％。所述的菌为鸡大肠杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、巴氏杆菌中的一种或多种。具体的，类Metalnikowin抗菌肽在制备抗沙门氏菌药物方面的应用。类Metalnikowin抗菌肽对沙门氏菌的抗菌性尤佳，MIC(最小抑菌浓度)值为312.5μg/mL，且经121℃高温高压处理后仍对沙门氏菌有抑菌作用，热稳定性良好。一种类Metalnikowin抗菌肽的应用，还包括类Metalnikowin抗菌肽在制备雏鸡饲料和/或饲料添加剂方面的应用。在雏鸡饲料和/或饲料添加剂中，按饲料重量添加0.1～0.5‰的类Metalnikowin抗菌肽，即每吨饲料添加类Metalnikowin抗菌肽100～500克。本专利技术的有益效果：本专利技术根据抗菌肽的作用机理和氨基酸组成的特点，同时参照Metalnikowin抑菌活性结构，设计一种类Metalnikowin抗菌肽，由23个氨基酸组成，分子量为2742.17Da。该抗菌肽能够抑制鸡大肠杆菌、猪大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和巴氏杆菌等细菌的生长，与青霉素、链霉素、头孢唑啉钠、阿奇霉素等抗生素相比，抑菌效果相对较好，与Metalnikowin I、Metalnikowin IIA、Metalnikowin IIB等常规的Metalnikowin抗菌肽相比，具有更强的抑菌活性。该抗菌肽对沙门氏菌的最小抑菌浓度为312.5μg/mL，热稳定性良好，还能促进雏鸡增重，在抗菌性药物研制和畜牧业发展中具有良好的应用前景。附图说明图1为本专利技术试验例1中类Metalnikowin抗菌肽对五种细菌体外抑菌活性试验结果；图2为类Metalnikowin抗菌肽与常用抗生素体外抑菌活性试验结果；图3为类Metalnikowin抗菌肽对沙门氏菌最小抑菌浓度测定结果；图4为类Metalnikowin抗菌肽热稳定性测定结果。具体实施方式下述实施例仅对本专利技术作进一步详细说明，但不构成对本专利技术的任何限制。实施例1本实施例中类Metalnikowin抗菌肽，其氨基酸序列为:VDKPDYRPRPRPWPRPPNMGG PR(同SEQ ID NO.1所示)，分子量为2742.17Da。所述抗菌肽包含Metalnikowin V-D-K-P-D-Y-R-P-R-P抗菌活性结构，R-P-R-P-W-P-R-P基本结构单元构成双侧疏水性α-螺旋结构，抗菌肽富含精氨酸(R)残基(带正电荷)，可吸引细菌表面的负电荷。本实施例中类Metalnikowin抗菌肽由上海楚肽生物科技有限公司采用固相合成法合成，纯度大于95％。实施例2本实施例中类Metalnikowin抗菌肽在制备抗菌性药物方面的应用，所述抗菌肽的氨基酸序列为:VDKPDYRPRPRPWPRPPNMGGPR，分子量为2742.17Da。采用常规方法将类Metalnikowin抗菌肽制成类Metalnikowin多肽菌素片剂，主药类Met本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种类Metalnikowin抗菌肽，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.一种类Metalnikowin抗菌肽，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.根据权利要求1所述的类Metalnikowin抗菌肽，其特征在于：所述抗菌肽的分子
量为2742.17Da。
3.一种如权利要求1所述的类Metalnikowin抗菌肽的应用，其特征在于：所述抗菌
肽在制备抗菌性药物方面的应用。
4.根据权利要求3所述的类Metalnikowin抗菌肽的应用，其特征在于：所述抗菌肽
为抗菌活性成分，其含量为0.2～50％。
5.根据权利要求3或4所述的类Metalnikowin抗菌...

【专利技术属性】
技术研发人员：王臣，李小康，郭香玲，牛明媚，吴庭才，
申请(专利权)人：河南科技大学，
类型：发明
国别省市：河南;41