枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺制造技术

本发明专利技术涉及一种枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺，包括以下步骤：a、将枳实粉碎等量分装于1号和2号渗滤罐；1号罐中加入稀酸溶液浸泡、搅拌、渗滤，流出液加入2号罐与1号罐同样的操作；合并渗滤液，真空浓缩后上树脂柱吸附辛弗林，用稀氨水解吸收集解吸液，真空干燥得辛弗林干品；b、枳实渣用清水洗至中性，用稀强碱溶液浸泡、搅拌、渗滤，真空浓缩，加无水甲醇或无水乙醇，静置，过滤，滤液真空浓缩回收醇后，得到母液；c、将母液上树脂柱，过层析柱吸附PMFs，用甲醇或乙醇静压过柱解吸，收集解吸液，真空浓缩回收洗脱剂得PMFs；通过树脂的流出液，经盐酸酸化，静置析晶，得橙皮甙干品。

【技术实现步骤摘要】
枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺
本专利技术涉及一种联合提取辛弗林、橙皮甙和多甲氧基黄酮（PMFs）的生产工艺，特别是涉及一种从中药枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的低成本高效生产工艺，属于生物分离工程领域。
技术介绍
枳实为芸香科植物酸橙（CitrusaurantiumL.）及其栽培变种或甜橙（CitrussinensisOsbeck）的干燥幼果。枳实作为传统中药，因其性温，味苦、辛、酸，归脾、胃经，具有破气消积、化痰散痞的功效，而被广泛应用于结胸、胃下垂、脱肛、积滞内停、痞满胀痛、泻痢后重、大便不通、痰滞气阻胸痹、子宫脱垂等症。现代中药化学研究表明，枳实的主要有效成分为挥发油类、生物碱类以及黄酮类成分，特别是辛弗林（生物碱）、橙皮甙（黄酮类）和多甲氧基黄酮（PMFs，主要成分为川橙皮素和橘红素）。辛弗林具有强心、利尿、收缩血管、升高血压和较强的扩张气管和支气管的作用，近年来的研究发现辛弗林能够提高新陈代谢、增加能量水平，氧化脂肪，是一种天然兴奋剂，无副作用。辛弗林临床用于治疗支气管哮喘，手术和麻醉时低血压、虚脱及休克、体位性低血压等。近年来，研究发现辛弗林可氧化脂肪，作用温和，无副作用，因此成为一些减肥药物的有效成分，在治疗因肥胖引起的轻度和中度抑郁症也显示了良好的疗效。目前，辛弗林广泛应用于医药、食品、饮料等保健行业。橙皮甙（Hesperidin）是枳实（含陈皮）中最丰富的黄酮类化合物，也是指标性成分。橙皮甙的生物学效应包括：（1）预防心血管疾病。橙皮甙通过消除细胞内过氧亚硝酸盐防止纤维细胞损伤、降低血管脆性、缩短出血时间、维持血管正常渗透压、防止心脑神经细胞退性型病变。具有降血脂和防治动脉粥样硬化的作用。可作用于临床心血管疾病辅助治疗。（2）对胃肠功能及平滑肌作用。橙皮甙对胃肠有兴奋作用，是健胃消食类药物的主要成分之一。（3）维生素C样作用。橙皮甙能改善由于维生素C缺乏导致的疾病，如提高肾上腺、脾及白细胞中抗坏血酸的含量，防治眼球结膜血管内红细胞凝聚和毛细血管抵抗力降低等。（4）抗过氧化和清除羟自由基作用。橙皮甙能够抑制羟自由基引起的红细胞膜质过氧化，保护羟自由基引起的红细胞膜氧化损伤。（5）其他：如镇静、催眠作用，抗肿瘤，广谱抗菌作用，降胆固醇，治疗风湿，抑制皮肤色素沉积，防止骨质诉讼等。多甲氧基黄酮(Polymethoxylatednavones,PMFs)是一类仅存在于柑桔属水果中的黄酮化合物,在柑桔果皮部位含量丰富,它具有抗癌、抗炎症、抗突变、抗血小板凝集、降胆固醇水平及抗菌活性等生理功能,同时它可作为柑桔品种来源、杂种初筛等园艺分类学上的标识物,也可用来评价橙汁是否存在掺假情况。由于PMFs的重要生理功能,美国SourceOne公司已商品化生产一种基于柑桔PMFs和棕搁果萃取物的保健品,产品名为“sytrinol”,经临床试验表明,该产品可同时降低总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三脂(TG),并可增加高密度脂蛋白(HDL),是一强抗氧化剂并兼有抗炎症效果,且无药物交互作用,对心脑血管疾病具有很好疗效。该产品在全球各大药店均有销售,前景相当可观!我国柑桔PMFs的研究报道较少,特别在分离纯化等方面,生产能供应全球需要的合格的PMFs更是寥寥无几。基于枳实中上述化合物的重要功效和应用价值，现有技术已经能陆陆续续地分离出单体，并进入工业化生产，但仅限于一种或两种化合的分离、生产。如中国专利技术专利申请201110173777.4号公开的一种从枳实中提取橙皮甙的制备方法；文献：曾超珍等，中国食品学报，2012，12（3）：119-124；文献：梁志鸿等，食品科技：植物提取与应用，2012,37（3）：225-228；仅公开了单独提取橙皮甙。文献：廖茂梁等，现代药物与临床，2011,26（2）：129-133；中国专利技术专利申请01106994.5号公开的从中药枳实中提取辛弗林的方法，仅公开了单独提取辛弗林。中国专利技术专利申请201210024789.5号公开了一种从柠檬中提取多甲氧基黄酮的工艺、中国专利技术专利201210093926.0号公开的一种从工业生产废料中提取纯化3种多甲氧基黄酮的方法、中国专利技术专利申请201210433692.X号公开的一种从柑橘类果皮中提取高纯度川陈皮素的方法，均是仅提取PMFs。中国专利技术专利申请201310035112.6号公开的一种从枳实中提取橙皮甙和辛弗林的方法、中国专利技术专利201010609831.0号公开的一种从枳实原料中综合提取辛弗林和橙皮甙的方法，报道了联合提取辛弗林和橙皮甙。但上述公开文献中均没有同时提取和分离三种药用有效成分的报道，可见其分离和提取是多么不易，并且分离和提取过程需要浪费大量辅料和热能。特别是联合提取，既要考虑到收率与含量是否能够满足需要，又要考虑到成本与工业化生产的需求，甚至还要考虑到是否能够节约材料、是否能够回收循环利用等等因素。基于市场对辛弗林、橙皮甙和多甲氧基黄酮的大量需求、原材料枳实的数量、辅料的数量等等原因，急需提供一种能够同时提取和分离三种药用有效成分，收率与含量均有大幅提高、所需热能大幅、能耗降低、节约碳酸氢钠、氯化钙等辅料，用无水醇沉淀杂质，效果好且能回收循环利用的枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种能够同时提取和分离三种药用有效成分，收率与含量均有大幅提高、所需热能大幅、能耗降低、节约碳酸氢钠、氯化钙等辅料，用无水醇沉淀杂质，效果好且能回收循环利用的枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺。本专利技术的基本构思是：基于前期工艺中国专利技术专利申请：CN201210224593.0号公开的一种从枳实中提取辛弗林和橙皮甙的方法，改进和创新专利技术了从枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的简单化生产工艺。从枳实中联合提取不同类别高附加值中药有效成分辛弗林、橙皮甙和PMFs，以综合利用祖国中药宝贵资源，得到高品位的有效成分，实现中药现代化生产。技术方案基本按照三个步骤进行，其中步骤一是辛弗林的提取与分离。将枳实筛去石子、铁钉等杂物，淘去泥沙，风干至浸润状态，粉碎。等量分装于两个渗滤罐，编为1号和2号。先向1中加入稀酸溶液浸泡、搅拌、渗滤，流出液再加入2号罐作同样的操作。合并渗滤液，真空浓缩至原体积的70%-90%后上树脂柱（树脂已处理）解吸（与吸附相反，解吸的意思就是将树脂吸附的有效成分解吸附至解吸溶剂中。吸附和解吸是一组相反的过程）。然后水洗至中性并用稀氨水解吸、收集解吸液，真空干燥得辛弗林干品。回收氨重复使用。步骤二是PMFs与橙皮甙的同时提取。酸提后留下的枳实渣，立即用清水洗至中性，再用稀强碱溶液浸泡、搅拌、渗滤，操作过程同步骤一。合并渗滤液，真空浓缩至原体积的70%，加无水醇调节醇浓度70%-80%，静置4-8h，过滤，滤液真空浓缩回收醇后，母液备用。步骤三是PMFs与橙皮甙的分离。将步骤二所得母液上已处理好的树脂柱，然后解吸，收集解吸液，真空浓缩回收洗脱剂得PMFs浸膏，浸膏经真空干燥，粉碎得粉末。通过树脂的流出液，经盐酸酸化至pH值为5，静置析晶，常压干燥得橙皮甙干品。其中，步骤一中所述稀酸溶液可以是稀盐酸或者稀硫酸，其中稀盐酸浓本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺，其特征是包括以下步骤：a、将枳实筛去杂物、风干至浸润状态，然后粉碎；等量分装于两个渗滤罐，编为1号和2号；先向1号罐中加入稀酸溶液浸泡、搅拌、渗滤，所述稀酸溶液是浓度为0.08%‑0.20%的稀盐酸或者浓度为0.08%的稀硫酸，流出液再加入2号罐作进行与1号罐同样的操作；合并渗滤液，真空度控制在0.08Mpa‑0.085Mpa，温度65℃‑70℃，真空浓缩至原体积的70%‑90%后上树脂柱，渗滤液过层析柱吸附辛弗林，吸附时间6h‑14h，然后水洗至中性并用稀氨水解吸，所述解吸是指用浓度为3%‑10%的氨水溶液以6L/h的速率解吸，收集解吸液，真空干燥得辛弗林干品，所述真空干燥条件为真空度控制在0.08Mpa‑0.085Mpa，温度35℃‑45℃；b、酸提后留下的枳实渣，立即用清水洗至中性，再用稀强碱溶液浸泡、搅拌、渗滤，所述稀强碱溶液是指浓度为3%‑6%的氢氧化钠水溶液，操作过程同步骤a中所述的稀强碱溶液浸泡、搅拌、渗滤，合并渗滤液，真空浓缩至原体积的70%，加无水甲醇调节醇浓度70%‑80%或无水乙醇调节醇浓度80%，静置4‑8h，过滤，滤液真空浓缩回收醇后，得到母液备用，所述回收醇的真空条件为真空度控制在0.08Mpa‑0.085Mpa，温度65℃‑75℃；c、将步骤b中所得母液上已处理好的树脂柱，过层析柱吸附PMFs，吸附时间10h‑30h，然后用70%浓度的甲醇或70%‑80%浓度的乙醇，静压过柱解吸4‑10h，收集解吸液，真空浓缩回收解吸剂得PMFs浸膏，浓缩至母液用最低量程酒精计测不出为止，浸膏经真空干燥，所述真空干燥是指真空度控制在0.08Mpa‑0.085Mpa，温度50℃‑65℃，干燥8h，粉碎得粉末；通过树脂的流出液，经盐酸酸化至pH值为5，所述盐酸为浓度为5%的稀盐酸水溶液，静置析晶，常压70℃烘干或风干得橙皮甙干品。...

【技术特征摘要】
1.一种枳实中联合提取辛弗林、橙皮甙和PMFs的工艺，其特征是包括以下步骤：a、将枳实筛去杂物、风干至浸润状态，然后粉碎；等量分装于两个渗滤罐，编为1号和2号；先向1号罐中加入稀酸溶液浸泡、搅拌、渗滤，所述稀酸溶液是浓度为0.08％-0.20％的稀盐酸或者浓度为0.08％的稀硫酸，流出液再加入2号罐作进行与1号罐同样的操作；再向1号罐中加入稀H2SO4溶液，重复一次，合并渗滤液，真空度控制在0.08Mpa-0.085Mpa，温度65℃-70℃，真空浓缩至原体积的70％-90％后上树脂柱，渗滤液过层析柱吸附辛弗林，吸附时间6h-14h，然后水洗至中性并用稀氨水解吸，所述解吸是指用浓度为3％-10％的氨水溶液以6L/h的速率解吸，收集解吸液，真空干燥得辛弗林干品，所述真空干燥条件为真空度控制在0.08Mpa-0.085Mpa，温度35℃-45℃；b、酸提后留下的枳实渣，立即用清水洗至中性，再用稀强碱溶液浸泡、搅拌、渗滤，所述稀强碱溶液是指浓度为3％-6％的氢氧化钠水溶液，操作过程同步骤a中所述的稀酸溶液浸泡、搅拌、渗滤，合并渗滤液，真空浓缩至原体积的70％，加无水甲醇调节醇浓度70％-80％或无水乙醇调节醇浓度80％，静置4-8h，过滤，滤液真空浓缩回收醇...

【专利技术属性】
技术研发人员：夏雯，徐培东，蒋国彬，陈华英，
申请(专利权)人：四川新华康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：四川;51