一种高通量鉴定烟草青枯病抗性的方法技术

技术编号:10511583 阅读:98 留言:0更新日期:2014-10-08 13:13
本发明专利技术公开了一种高通量鉴定烟草青枯病抗性的方法,包括以下步骤:将粒度为2-4mm的石英砂于121℃高温下灭菌30分钟,冷却后将其播入无菌12孔细胞培养板中,每孔10g石英砂,每孔加入4ml无菌水;将待测烤烟种子播种于12孔细胞培养板的石英砂上,播种后将12孔细胞培养板置于25℃、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下培养;待烟种发芽后,无菌条件下向培养烟苗的12孔微孔板内添加霍格兰营养液,每孔2ml,继续置于25℃、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下培养,待烟苗5-6叶期时用于抗病性鉴定;接种液制备及接种;病情调查与分级。本发明专利技术能高通量、高效率鉴定烟草青枯病抗性,且一次可以鉴定的烤烟品种多。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于作物抗病性鉴定
,具体涉及一种烟草青枯病抗性的鉴定方 法。
技术介绍
由爺科雷尔氏菌 so/aflacear腫(Smith) Yabuuchi et al)引起的烟 草青枯病是一种世界性土传细菌性病害,极具破坏性,并成为制约烟草生产的主要病害。烟 草青枯病在主要产烟省区均普遍发生。该病害是典型的维管束病害,烟草根、茎、叶各部位 均可被侵染,但主要危害植物的根和茎,其主要症状之一是叶片单边萎蔫和过早变黄。目 前,培育和应用抗病品种是防治青枯病最有效的途径。但在抗病育种相关研究中,需要快 速、准确地评价大量材料的抗性表现。常用的鉴定方法有:1)漂浮/盆栽烟苗人工接种鉴定 法。该方法培养温度不稳定,容易受环境温度变化的影响;病原菌浓度易受育苗池中水的体 积及烟盆浇水等因素的影响;近而影响烟苗的发病率和病情指数,影响烟苗抗性水平的鉴 定,鉴定结果不稳定,重复性不高。该方法所需空间大,需要搭建温室大棚、育苗池,需要购 买加热装置,管理成本高,需要人力成本高。该方法通量小,一次可以鉴定的品种较少。此 夕卜,该方法在鉴定期容易受其它病害的本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种高通量鉴定烟草青枯病抗性的方法,包括以下步骤:(1)培育无菌烟苗将粒度为2‑4mm的石英砂于121℃高温下灭菌30分钟,冷却后将其播入无菌12孔细胞培养板中,每孔10g石英砂,每孔加入4ml无菌水;将待测烤烟种子播种于12孔细胞培养板的石英砂上,播种后将12孔细胞培养板置于25℃、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下培养;(2)烟苗的日常管理待烟种发芽后,无菌条件下向培养烟苗的12孔微孔板内添加霍格兰营养液,每孔2ml,继续置于25℃、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下培养,待烟苗5‑6叶期时用于抗病性鉴定;(3)接种液制备及接种将烟草青枯菌菌株使用前在劳尔氏...

【技术特征摘要】
1. 一种高通量鉴定烟草青枯病抗性的方法,包括以下步骤: (1) 培育无菌烟苗 将粒度为2-4_的石英砂于121°C高温下灭菌30分钟,冷却后将其播入无菌12孔细胞 培养板中,每孔l〇g石英砂,每孔加入4ml无菌水;将待测烤烟种子播种于12孔细胞培养板 的石英砂上,播种后将12孔细胞培养板置于25°C、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下 培养; (2) 烟苗的日常管理 待烟种发芽后,无菌条件下向培养烟苗的12孔微孔板内添加霍格兰营养液,每孔2ml, 继续置于25°C、RH>80%、16h光照和8h黑暗交替条件下培养,待烟苗5-6叶期时用于抗病性 鉴定; (3) 接种液制备及接种 将烟草青枯菌菌株使用前在劳尔氏菌选择性培养基上活化48h,挑典型单菌落至劳尔 氏菌选择性培养基平板上,30°C培养48h,将菌苔刮...

【专利技术属性】
技术研发人员:汪汉成任学良王轶蔡刘体王茂胜陆宁王仁刚
申请(专利权)人:贵州省烟草科学研究院
类型:发明
国别省市:贵州;52

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