蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法及该化合物的应用技术

技术编号:10372309 阅读:115 留言:0更新日期:2014-08-28 14:23
本发明专利技术公开了蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法即该化合物的应用,包括提取浸膏、冷藏陈放后硅胶拌样、层析柱色谱分离、薄层色谱法分析和常压柱色谱分离提取各个化合物等步骤;通过该方法得到了两类5个来源于节肢动物蝼蛄中的生物碱类化合物,均是在节肢动物中首次报道发现的新化合物。该组分被测试有广谱的抗菌性能,可以作为广谱抗菌消毒剂或新的抗菌剂开发,本发明专利技术公开的新发现的来自于昆虫或节肢动物生物碱成分,将为该古老的传统药材提供一个新的用途。

【技术实现步骤摘要】
蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法及该化合物的应用
本专利技术属于中药有效成分提取
,主要涉及一种蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法及该化合物的应用。
技术介绍
目前,天然产物方面的研究主要集中于陆生植物和海洋生物,而昆虫和无脊椎动物天然产物研究刚刚开始。另一方面,陆生药源日渐减少,而昆虫源中蕴藏的大量的生物活性物质,成为可发掘利用的宝贵资源。近年来由于现代分离、检测技术在天然产物化学研究中的快速发展,昆虫及无脊椎动物天然产物化学研究探索的问题不但可成功得到解决,而且提高了天然产物研究中微量成分、及复杂结构成分的发现几率和研究效率,因此昆虫天然产物的研究探索已引人瞩目。据中医药记载,蝼蛄为昆虫类药物,历史悠久。蝼蛄在分类上属昆虫纲,直翅目,蝼蛄科,在我国有关蝼蛄种类的分类不一,根据形态和分布,有的分为4种,有的分为3种。《本草纲目药物彩色图谱》提出有6种。常见的分布较广的为(非洲峻蛄africana Pal.de Beau vois,又称东方峻蛄)华东峻蛄{GryI1talpauni spina Sauss),其次为台湾峻蛄/hr麗Shiraki,还有分布较少的金秀矮免 Gryllotalpa.jinxiuensis You et Lin,河南峻蛄 G henana Cai et Niu 和普通峻蛄Gryllotalpa.gryllotal palinnaeus。形成药材的主要为前两种。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法,通过该方法从蝼蛄中的含氮生物碱类化合物属于黄杨属含氮留体类生物碱化合物的衍生物,被测试有广谱抗菌性能,可以作为广谱抗菌消毒剂或新的抗菌剂开发,为该古老的传统药材提供一个新的用途。本专利技术实现上述目的采用的技术方案是:蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法,包括以下步骤: 步骤一、取蝼蛄原材料,干燥,粉碎,得到蝼蛄粉,备用;在温度为30-50 °C条件下,向蝼蛄粉中加入蝼蛄粉重量5-20倍的二氯甲烷脱除虫蜡,经固液分离后,将得到的虫渣风干,再向干燥的虫渣中加入虫渣重量10-20倍的质量浓度为70%的甲醇,在30-50°C条件下,超声辅助提取和过滤,将滤液蒸发浓缩,得到浸膏状物,备用; 步骤二、将步骤一得到的浸膏状物用质量浓度为70%的甲醇溶剂溶解,然后在-4°C条件下冷陈12h,冷陈结束后除去不溶物,并将得到的清液在50°C温度下减压浓缩,得到的浓缩液加入硅胶进行拌样,搅拌均匀后置于通风处干燥,得到拌料样品,备用; 步骤三、取步骤二得到的拌料样品以及拌料样品重量25-30倍的硅胶,先将硅胶装入层析柱,再将拌料样品进行湿法上样,然后依次用体积比为9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的氯仿和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱,洗脱得到的馏分均采用TLC进行分析,合并相似馏分,共得到的馏分段1-15,备用;步骤四、将步骤三得到的馏分段5运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1和7:3的氯仿-甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为7:3的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,然后将有固体析出的馏分进行过滤,得到固体化合物,固体化合物进一步经环己烷-丙酮重结晶后即得到白色固体粉末,即化合物II ; 将步骤三得到的馏分段7运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3和1:1的氯仿-甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为1:1的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体,将白色固体重结晶后得到白色固体粉末,即化合物III ; 将步骤三得到的馏分段9运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7: 3、1:1和3:7的氯仿-甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为3:7的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体和母液,将白色固体重结晶后得到白色固体粉末,即化合物IV ;将母液放置28h,二次固体析出,经固液分离,得到白色粉末为化合物V ; 将步骤三得到的馏分段11运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿-甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为3:7的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体,即化合物I ; 所述的化合物1、I1、II1、IV和V的结构式分别为:本文档来自技高网...

【技术保护点】
蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:步骤一、取蝼蛄原材料,干燥,粉碎,得到蝼蛄粉,备用;在温度为30‑50 ℃条件下,向蝼蛄粉中加入蝼蛄粉重量5‑20倍的二氯甲烷脱除虫蜡,经固液分离后,将得到的虫渣风干,再向干燥的虫渣中加入虫渣重量10‑20倍的质量浓度为70%的甲醇,在30‑50℃条件下,超声辅助提取和过滤,将滤液蒸发浓缩,得到浸膏状物,备用;步骤二、将步骤一得到的浸膏状物用质量浓度为70%的甲醇溶剂溶解,然后在‑4℃条件下冷陈12h,冷陈结束后除去不溶物,并将得到的清液在50℃温度下减压浓缩,得到的浓缩液加入硅胶进行拌样,搅拌均匀后置于通风处干燥,得到拌料样品,备用;步骤三、取步骤二得到的拌料样品以及拌料样品重量25‑30倍的硅胶,先将硅胶装入层析柱,再将拌料样品进行湿法上样,然后依次用体积比为9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的氯仿和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱,洗脱得到的馏分均采用TLC进行分析,合并相似馏分,共得到的馏分段1‑15,备用;步骤四、将步骤三得到的馏分段5运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1和7:3的氯仿‑甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为7:3的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,然后将有固体析出的馏分进行过滤,得到固体化合物,固体化合物进一步经环己烷‑丙酮重结晶后即得到白色固体粉末,即化合物Ⅱ;将步骤三得到的馏分段7运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3和1:1的氯仿‑甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为1:1的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体,将白色固体重结晶后得到白色固体粉末,即化合物Ⅲ;将步骤三得到的馏分段9运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿‑甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为3:7的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体和母液,将白色固体重结晶后得到白色固体粉末,即化合物Ⅳ;将母液放置28h,二次固体析出,经固液分离,得到白色粉末为化合物Ⅴ;将步骤三得到的馏分段11运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1、7:3、1:1和3:7的氯仿‑甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为3:7的氯仿‑甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,将有固体析出的馏分进行离心得到白色固体,即化合物Ⅰ;所述的化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和Ⅴ的结构式分别为:化合物Ⅰ;化合物Ⅱ;化合物Ⅲ;化合物Ⅳ;化合物Ⅴ。...

【技术特征摘要】
1.蝼蛄中生物碱类化合物的提取方法,其特征在于:包括以下步骤: 步骤一、取蝼蛄原材料,干燥,粉碎,得到蝼蛄粉,备用;在温度为30-50 °C条件下,向蝼蛄粉中加入蝼蛄粉重量5-20倍的二氯甲烷脱除虫蜡,经固液分离后,将得到的虫渣风干,再向干燥的虫渣中加入虫渣重量10-20倍的质量浓度为70%的甲醇,在30-50°C条件下,超声辅助提取和过滤,将滤液蒸发浓缩,得到浸膏状物,备用; 步骤二、将步骤一得到的浸膏状物用质量浓度为70%的甲醇溶剂溶解,然后在_4°C条件下冷陈12h,冷陈结束后除去不溶物,并将得到的清液在50°C温度下减压浓缩,得到的浓缩液加入硅胶进行拌样,搅拌均匀后置于通风处干燥,得到拌料样品,备用; 步骤三、取步骤二得到的拌料样品以及拌料样品重量25-30倍的硅胶,先将硅胶装入层析柱,再将拌料样品进行湿法上样,然后依次用体积比为9:1、7:3、1:1、3:7和1:9的氯仿和甲醇的混合溶液进行梯度洗脱,洗脱得到的馏分均采用TLC进行分析,合并相似馏分,共得到的馏分段1-15,备用; 步骤四、将步骤三得到的馏分段5运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比为9:1和7:3的氯仿-甲醇溶液,收集馏分,并将馏分在室温下放置,经洗脱剂为7:3的氯仿-甲醇溶液洗脱出的馏分有固体析出,然后将有固体析出的馏分进行过滤,得到固体化合物,固体化合物进一步经环己烷-丙酮重结晶后即得到白色固体粉末,即化合物II ; 将步骤三得到的馏分段7运用常压柱色谱进行分离,梯度洗脱剂依次为体积比...

【专利技术属性】
技术研发人员:尹卫平牛兰岚高嘉屿曹冉冉李海迪
申请(专利权)人:河南科技大学
类型:发明
国别省市:河南;41

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