本发明专利技术涉及一种用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂，该吸附剂由苦柯胺B连接在具有良好血液相容性的载体的表面。该吸附剂可有效的从人体血液中吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖，从而达到清除诱发脓毒症的病原体相关分子的目的，发挥治疗脓毒症的作用，具有重要的临床价值。
【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂，该吸附剂由苦柯胺B连接在具有良好血液相容性的载体的表面。该吸附剂可有效的从人体血液中吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖，从而达到清除诱发脓毒症的病原体相关分子的目的，发挥治疗脓毒症的作用，具有重要的临床价值。【专利说明】用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂和制备方法及用途
本专利技术属于医药
，特别涉及用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂和制备方法及用途。
技术介绍
脓毒症是感染引发的全身性炎症反应综合征。脓毒症的发生是由于病原体侵入人体后，病原体含有的病原体相关分子被机体天然免疫系统中的模式识别受体识别，导致炎症反应细胞活化，释放大量炎症介质，从而引发全身性炎症反应，造成组织器官损伤甚至死亡。导致脓毒症的病原体90%以上为细菌，而细菌所含的病原体相关分子主要包括细菌内毒素(脂多糖)、DNA和肽聚糖等。因此，若能够拮抗这些致病因子就能对脓毒症取得良好的治疗效果。多年来，人们针对上述病原体相关分子开发了许多拮抗剂，如多粘菌素B、类脂A单克隆抗体、杀菌/通透性增加蛋白等，但是均未取得成功或仍处于研究阶段。近年来,血液净化治疗被认为有望成为脓毒症新的治疗手段。该疗法的原理是利用特定的吸附剂对患者血液进行灌流，以吸附和除去患者血中的病原体相关分子，发挥治疗作用。目前，最常见的吸附剂是将可吸附细菌内毒素的药物多粘菌素B连接在一定的载体上而制成。比如，日本研究者将多粘菌素B通过共价结合连接在纤维素载体上制成细菌内毒素吸附剂(商品名Toraymyxin)，已在日本(1994年)和欧洲(2002年)上市，并正在美国开展III期临床试验。临床研究结果显示，在常规治疗基础上使用Toraymyxin能够一定程度改善腹腔内革兰氏阴性菌感染所致的重症脓毒症或脓毒性休克患者的血流动力学和器官功能障碍，并降低 28 天死亡率(Cruz DN, Antonelli M, Fumagalli R, et al.Early useof polymyxin B hemoperfusion in abdominal septic shock:the EUPHAS randomizedcontrolled trial.JAMA.2009; 301 (23): 2445-2452.)。此外，中国专利技术专利 ZL03144383.4公布了一种以天然或合成高分子材料为载体，二甲基胺为配体制成的细菌内毒素吸附剂。中国专利技术专利ZL 200710012501.1公布了一种以琼脂糖凝胶为载体，偶联季铵盐阳离子和疏水分子的细菌内毒素吸附剂。中国专利技术专利201110113987.4公布了一种以分子簇为功能基的细菌内毒素吸附剂。但是，上述吸附剂仅能吸附细菌内毒素，不能同时有效吸附细菌DNA和肽聚糖。而在由细菌感染引发的脓毒症中，细菌DNA和肽聚糖同内毒素一样也是分布广、毒力强的病原体相关分子，上述吸附剂只清除细菌内毒素，细菌DNA和肽聚糖仍残留血中，不足以完全解决脓毒症的根源问题，这是目前有报道(王亮，马晓春.固定多粘菌素B纤维灌流器吸附内毒素的研究进展.中国血液净化，2010，9:451-453.)称其临床疗效仍然有限的重要原因。中国专利技术专利201010156503.X公布了苦柯胺B用于制备预防和治疗脓毒症及自身免疫性疾病药物的用途。已有的研究结果(Liu X, Zheng X，Wang N, et al.KukoamineB，a novel dual inhibitor of LPS and CpG DNAj is a potential candidate for sepsistreatment.Br J Pharmacol.2011; 162 (6):1274-1290.)显示，苦柯胺 B 在脓毒症模型动物体内对细菌内毒素和DNA均具有良好的中和作用，能够显著改善各项病理生理指标，降低死亡率。尽管苦柯胺B通过体内静脉给药的方式进行治疗可取得较好效果，但仍然不能制备成可同时有效吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂并用于脓毒症血液净化治疗。
技术实现思路
本专利技术的目的在于解决现有吸附剂只能吸附细菌内毒素的问题，提供一种用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂，该吸附剂可同时吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖。采用动物血液进行模拟实验，其结果表明该吸附剂可有效的从血中吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖，从而达到清除诱发脓毒症的病原体相关分子的目的，发挥治疗脓毒症的作用，具有重要的临床价值。本专利技术的技术方案是:用于清除细菌内毒素、DNA和肽聚糖的吸附剂，将苦柯胺B通过共价结合连接在具有良好血液相容性的载体的表面。所述载体为琼脂糖凝胶、聚乙烯醇、纤维素、聚苯乙烯中的任意一种。吸附剂中苦柯胺B与载体的质量比为1:0.001?0.01。上述吸附剂的制备方法，有以下步骤:I)有机溶剂中活化载体，洗涤、抽滤至干；2)取苦柯胺B溶于50ml 0.1M NaHCO3溶液中，与经步骤I)活化的载体混合，25°C振荡反应24小时，用超纯水洗涤，抽滤至干，得到用于清除脓毒症致病因子的吸附剂。当载体为聚苯乙烯时，苦柯胺B与活化的载体混合振荡反应后，用超纯水洗涤，抽滤至干；将硼氢化钠溶于IOml 0.1M的磷酸缓冲液(pH=7.4)，加入抽干的固体物中，25°C振荡反应2小时，用超纯水洗涤，抽滤至干，得到用于清除脓毒症致病因子的吸附剂。步骤I)所述的有机溶剂为环氧氯丙烷或戊二醛。琼脂糖凝胶、聚乙烯醇、纤维素载体的活化方法是:取载体，洗涤，抽滤至干，加入0.5M NaOH溶液10ml、环氧氯丙烷10ml，40°C振荡反应5小时。聚苯乙烯载体活化的方法是:取氨甲基化聚苯乙烯，加入25%的戊二醛溶液5ml，40°C反应2小时。本专利技术所述吸附剂在用于制备血液净化治疗的吸附剂中的用途。当苦柯胺B连接琼脂糖凝胶时，得到琼脂糖凝胶一苦柯胺B吸附剂，其中每克载体连接有3.00?5.0Omg苦柯胺B。当苦柯胺B连接聚乙烯醇时，得到聚乙烯醇一苦柯胺B吸附剂，其中每克载体连接有3.00?5.0Omg苦柯胺B。当苦柯胺B连接纤维素时，得到纤维素一苦柯胺B吸附剂，其中每克载体连接有5.00 ?10.0Omg 苦柯胺 B。当苦柯胺B连接聚苯乙烯时，得到聚苯乙烯一苦柯胺B吸附剂，其中每克载体连接有3.00?5.0Omg苦柯胺B。所述吸附剂的使用方法:将含有细菌内毒素、DNA和肽聚糖的血液与吸附剂相接触进行灌流，从而吸附其中的细菌内毒素、DNA和肽聚糖。实验结果显示:(I)苦柯胺B可与琼脂糖凝胶、聚乙烯醇、纤维素或聚苯乙烯载体连接制成吸附剂；(2)制备的吸附剂能够分别或者同时有效地吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖。细菌内毒素、DNA和肽聚糖是导致脓毒症最主要的病原体相关分子，从患者体内吸附这些分子从而达到清除致病因子的目的对脓毒症的治疗十分重要。本专利技术所述吸附剂不同于以往研制的仅能吸附细菌内毒素一种病原体相关分子的吸附剂，它能够同时吸附细菌内毒素、DNA和肽聚糖，且吸附效果良好。因此，本专利技术所述吸附剂能够将诱发脓毒症最主要的病原体相关分子一细菌内毒素、DNA和肽聚糖均有效的从血液中除去，克服了现有吸附剂仅有单一清除作用的本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：郑玥，
申请(专利权)人：郑玥，
类型：发明
国别省市：
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