一种快速检测婴儿食品中肉毒杆菌毒素的试剂盒制造技术

本实用新型专利技术提供了一种对婴幼儿食品中肉毒杆菌毒素进行快速测定的检测试剂盒，该试剂盒为方形塑料空心盒(1)，内部平行固定有一条样品测定板(2)和一条对照板(3)，以及取样器(4)；所述样品测定板是依次由点样区(5)、胶体金标记板(6)、硝酸纤维素板(7)和吸水板(8)，以及位于四者下面的支撑板(9)组成的样品测定板。采用本实用新型专利技术的检测试剂盒，可以实现对食品尤其是婴幼儿食品中肉毒杆菌毒素的快速和灵敏检测，且降低了操作的难度，适宜于大规模的普遍检测。（*该技术在2023年保护过期，可自由使用*）

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本技术提供了一种对婴幼儿食品中肉毒杆菌毒素进行快速测定的检测试剂盒，该试剂盒为方形塑料空心盒(1)，内部平行固定有一条样品测定板(2)和一条对照板(3)，以及取样器(4)；所述样品测定板是依次由点样区(5)、胶体金标记板(6)、硝酸纤维素板(7)和吸水板(8)，以及位于四者下面的支撑板(9)组成的样品测定板。采用本技术的检测试剂盒，可以实现对食品尤其是婴幼儿食品中肉毒杆菌毒素的快速和灵敏检测，且降低了操作的难度，适宜于大规模的普遍检测。【专利说明】一种快速检测婴儿食品中肉毒杆菌毒素的试剂盒
本技术提供了一种快速检测婴幼儿奶制品中微量肉毒杆菌毒素的试剂盒，属于生物物理和生物化学检测
。
技术介绍
近日来，新西兰恒天然公司生产的婴幼儿奶粉因受到肉毒杆菌污染而成为公众关注的焦点，已经在世界范围内引起了轩然大波。肉毒杆菌是一种生长在缺氧环境下的细菌，在罐头食品及密封腌溃食物中具有极强的生存能力，是毒性最强的毒素之一。肉毒杆菌在繁殖过程中分泌肉毒素，是毒性最强的蛋白质之一，人体的胃肠道是一个良好的缺氧环境，适于肉毒杆菌居住。肉毒杆菌属于厌氧菌，严格厌氧，在胃肠道内既能分解葡萄糖、麦芽糖及果糖，产酸产气，又能消化分解肉渣，使之变黑，腐败恶臭。在厌氧环境中，此菌能分泌强烈的肉毒毒素，能引起特殊的神经中毒症状，致残率、病死率极高。肉毒素实际上是肉毒杆菌毒素的俗称，又称肉毒杆菌内毒素，英文称为“Botox”和“Myobloc”，具有很强的神经毒性，能破坏生物的神经系统，使人出现头晕、呼吸困难、肌肉乏力等症状；根据所产生毒素的抗原性不同，肉毒杆菌分为A、B、Ca、Cb、D、E、F、G这8个型，能引起人类疾病的有A、B、E、F型，其中以A、B型最为常见。摄食肉毒杆菌和肉毒菌素的食品可引发食物中毒，如pH > 4.6的低酸性罐头食品(含铁罐，玻璃罐)或香肠、火腿。人感染肉毒杆菌后会出现视觉模糊、呼吸困难、肌肉乏力等症状，如病情严重可能导致死亡。对于普通人而言，由于肠道内存在多种复杂的微生物，因而极少量的肉毒杆菌往往对于成年人来说危害不算太大，不会成为优势菌株，如果在食用之前充分高温消毒，使肉毒杆菌毒素失活后，少量的肉毒杆菌在体内会受到正常肠道菌群的竞争抑制，一般不致于产生致命危害。但对于婴幼儿来说，尤其是I岁以下的婴幼儿来说，肉毒杆菌中毒则是非常严重的事情，因为婴幼儿肠道微生态屏障尚未完全形成，正常菌群还不够强健，肉毒杆菌芽孢进入婴幼儿肠道后，容易定植并释放肉毒杆菌毒素，进入到血液后还可能导致婴幼儿神经痉挛或麻痹等症状。而婴幼儿奶粉、米粉、饮料等食品由于其酸性不强，并且为了避免污染，往往制成密闭包装，因而较适宜肉毒杆菌的生长繁殖，存在较大的隐患。因肉毒杆菌毒素在食品中含量一般甚少，常规化学检测方法对于微量物质的检测灵敏度存在一定的局限，目前，检测肉毒杆菌毒素的方法主要是高效液相色谱法(HPLC)Jf相色谱串联质谱法(LC-MSMS)等方法，这些方法对微量物质的检测灵敏度较高，但检测过程复杂耗时、操作不便，且对仪器要求较高，在实际生产中难以推广应用。
技术实现思路
本技术针对上述存在的技术难题问题，提供了一种快速检测婴幼儿食品中微量肉毒杆菌毒素的试剂盒，从而解决了上述现有技术中存在的难题。本技术提供了一种对婴幼儿食品，尤其是奶粉中肉毒杆菌毒素进行快速测定的检测试剂盒，包括:①该试剂盒为方形塑料盒1，内部平行固定有一条样品测定板2和一条对照板3，以及取样器4 ;②所述样品测定板2是依次由点样板5、胶体金标记板6、硝酸纤维素板7和吸水板8，以及位于四者下面的支撑板9组成的支撑板9上中部覆盖硝酸纤维素板7，硝酸纤维素板7是由硝酸纤维素膜制成的光滑平板，一端和吸水板8相连，另一端和胶体金标记板6相连，胶体金标记板6外侧则是点样板5 硝酸纤维素板7上部设置有透明薄膜层10，该透明薄膜层两端分别和胶体金标记板6、吸水板8相连，并遮盖硝酸纤维素板7，且和硝酸纤维素板7之间形成空隙室16 硝酸纤维素板7上，靠近胶体金标记板6 —侧设置有一条包被肉毒杆菌毒素免疫原的实验线11和一条多克隆抗体控制线12 ；同样，在对照板3上与实验线11和控制线12横向对应的位置，也设置有两条红色对照线13和14 所述的点样区5中央设置一凹陷的样品吸收区15。检测时，首先处理样品得到分散液(牛奶等液态食物可直接滴入检测，固体食品则需要先制成溶液或分散液)，把一滴样品分散液滴入样品区5中央设置的凹陷的样品吸收区15，通过毛细管作用和虹吸作用，样品液将沿着胶体金标记板6和硝酸纤维素板7方向横向移动。控制线的意义是，当样品因毛细管和虹吸等作用横向移动至羊抗兔多克隆抗体控制线12时，无论样品中有无肉毒杆菌毒素，标记的金标探针都会与已设定好的羊抗兔多克隆抗体结合滞留，使控制线12显示红色。如果样品中含有肉毒杆菌毒素，则样品移动至包被肉毒杆菌毒素免疫原的实验线11时，胶体金标记板中的肉毒杆菌毒素多克隆抗体和样品中的肉毒杆菌毒素优先结合，因而胶体金无法滞留于实验线上，实验线11上不显示红色，而仅有控制线12显示红色，此时仅仅有一条控制线12的红色条带，结果为阴性。如果样品没有被肉毒杆菌污染，不含肉毒杆菌毒素，胶体金标记板6中的肉毒杆菌毒素多克隆抗体随样品移动到实验线11上，肉毒杆菌毒素多克隆抗体就会与肉毒杆菌毒素合成免疫原发生特异结合，使胶体金滞留于实验线11上，实验线11和控制线12两条色带均显示指示性红色，此时提示样品未受肉毒杆菌污染，结果为阴性。如果结果显示控制线12中无色带产生，则提示试剂盒已经过期失效，或操作过程错误导致结果无意义。在检测试剂盒中设置一条样品测定板和一条对照板的意义是为了更明显地判断检测结果，因为有时结果显示的颜色较为不明显，通过设置一个对照板，可以很直观地进行对照，判断两条线的颜色，从而判定结果为阳性还是阴性。所述的取样器可以为0.5mL的吸管。所述的点样区5可以由三层材料叠加组成，第一层为无纺布层51、第二层为玻璃纤维层52、第三层为无纺布层53，通过设置多层上述材料，可以增强样品的吸收和向硝酸纤维素板方向的移动，从而更快地完成测定过程。优选地，所述的胶体金标记板设置有胶体金标记的抗肉毒杆菌毒素的单克隆抗体和胶体金标记的兔抗体。所述的多克隆抗体控制线设置有羊抗兔多克隆抗体。采用本技术的技术方案，可以实现对食品尤其是婴幼儿食品中肉毒杆菌毒素的快速和灵敏检测，且降低了操作的难度，适宜于大规模的普遍检测。【专利附图】【附图说明】图1为本技术的检测盒I的俯视剖面图。图2为本技术的样品测定板2的侧面示意图。【具体实施方式】实施例1快速检测肉毒杆菌毒素的试剂盒试剂盒结构:方形塑料空心盒1，内部平行固定有一条样品测定板2和一条对照板3，以及一个0.5mL的吸管4。样品测定板2:依次由点样板5、胶体金标记板6、硝酸纤维素板7和吸水板8，以及位于四者下面的支撑板9组成。支撑板9中部覆盖硝酸纤维素板7 (由硝酸纤维素膜制成的光滑平板)，一端和吸水板8相连,另一端和胶体金标记板6相连,胶体金标记板6外侧则是点样板5。硝酸纤维素板7上部设置有透明薄膜层10，透明薄膜层10两端分别和胶体金标记本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：马万林，
申请(专利权)人：马万林，
类型：实用新型
国别省市：