本发明涉及基因敲除技术，尤指一种基因敲除疟原虫的建立方法，具体包括以下步骤：(a)构建线性化的基因敲除质粒；(b)疟原虫成熟裂殖体的培养；(c)基因敲除质粒(线性化)转染；(d)基因敲除疟原虫的鉴定。本发明采用基于PCR方法的三步法扩增...