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湖北大学专利技术
湖北大学共有4199项专利
一种用于筛选定向进化突变酶的快速质粒营救法制造技术
本发明提出了一种筛选定向进化突变酶的快速质粒营救法,可直接从加热处理或酸碱处理后再加热处理的平板中回收携带有突变基因的质粒,用于进一步的筛选和基因测序,筛选出定向进化突变酶。本发明实验过程简单,易操作。可把一轮的筛选过程缩短1-2天。大...
离体培养和秋水仙素处理结合选育多倍体毛泡桐的方法技术
本发明提出了以胎座为外植体的离体培养和秋水仙素处理结合选育四倍体毛泡桐的方法。它包括:a.选择亲本;b.以胎座为最佳外植体;c.胎座愈伤组织诱导;d.胎座愈伤组织加倍处理;e.处理后愈伤组织恢复培养;f.愈伤组织分化培养;g.芽苗生根培...
一种基因克隆的高效方法技术
本发明提出一种用于克隆基因组DNA的高效方法。构建的克隆载体经特定的限制性内切酶酶切后,产生的粘性末端能与Sau3A I(或Sau3A I的同尾酶)部分酶切的基因组片段补加一个碱基dGTP后的粘性末端匹配,可有效地构建基因组文库,也能克...
一种酵母基因工程菌及内切菊粉酶制剂和应用方法技术
本发明提出一种酵母基因工程菌Pichia pastoris GS115/HY005是通过PCR方法或者DNA文库杂交方法,从曲霉属菌株筛选获得内切菊粉酶基因,将其克隆并插入到毕赤酵母整合表达载体中,然后将得到的含内切菊粉酶基因表达载体导...
氨基酸与葡萄糖美拉德反应生成类黑色素的方法技术
一种氨基酸与葡萄糖美拉德反应生成类黑色素的方法,将用量为90%-99%的葡萄糖(市售的或用大米/大米碎米自制)与1-10%的氨基酸,或氨基酸复合物置于反应斧中,加温至120-150℃,2-3小时后即可生成用于食品、饮料及医药的类黑色素。...
昆虫防御素在毕赤酵母中的表达方法技术
昆虫防御素在毕赤酵母中的表达方法,其特征在于:将昆虫防御素基因与载体质粒pHBM905B重组,将重组质粒转化入毕赤酵母,经“三明治”夹心平板筛选得到含有重组质粒的防御素毕赤酵母工程菌,防御素毕赤酵母工程菌经甲醇诱导表达,表达产物直接分泌...
活体催化工程菌及利用α-酮酸生产L型非天然疏水性氨基酸的方法技术
本发明提出了一种活体催化工程菌及利用α-酮酸生产L型非天然疏水性氨基酸的方法。它是使用遗传诱变和强迫进化的方法,获得了一株能有效催化相应的α-酮酸生成L-tert-亮氨酸、δ-二甲基-戌氨酸和L-高苯丙氨酸的工程菌菌株(E.coli ...
一种新的RNA干扰载体的构建与筛选方法技术
本发明提出了一种新的RNA干扰载体的构建与筛选方法,它主要包括:载体的改造、含有干扰靶序列的DNA序列的产生和将上述含有干扰靶序列的DNA序列克隆到载体三个部分,本发明步骤繁琐,克隆效率低,适合高通量的操作。该方法不需要订购长度大于60...
一种零背景高通量定向表达克隆的方法技术
本发明提出了一种零背景、高通量、定向克隆表达的方法,它是基于特定限制性内切酶双酶切表达载体,利用T↓[4]DNA聚合酶消化经特殊设计的引物扩增的PCR产物,然后将PCR产物定向克隆到表达载体上的方法。特定的限制性内切酶可以是CpoⅠ、N...
一种高产甘露聚糖酶的糊精发酵培养基制造技术
本发明提出了一种用于生产甘露聚糖酶的糊精发酵培养基,它是在LB培养基的基础上增加了3%--10%的糊精,该糊精来源于淀粉糊精、菊粉糊精、中低分子量壳聚糖糊精、半纤维糊精、羧甲基纤维素糊精的任一种。使用该培养基培养的菌株生物量高、产酶量高...
自养黄色杆菌及其杀螺剂制造技术
本发明涉及一种黄色杆菌及其杀螺剂。一种杀钉螺细菌,即自养黄色杆菌(Xanthobacterautotrophicus)为自养黄色杆菌Ⅱ(Xanthobacter autotrophicusⅡ),保藏单位为中国典型培养物保藏中心(CCT...
一种高通量直接定向克隆构建重组腺病毒的方法技术
本发明提出了一种能够直接定向与用T↓[4]DNA聚合酶消化经特殊设计的引物扩增的PCR产物进行连接,然后通过抗性筛选,从而一步构建得到重组腺病毒质粒的方法。得到的重组腺病毒质粒经过限制性内切酶PacI线性化,转化哺乳动物包装细胞系,就能...
一种高通量克隆构建重组杆状病毒的方法技术
本发明提出了一种高通量克隆构建重组杆状病毒的方法。它是利用特定限制性内切酶双酶切杆状病毒载体与T↓[4]DNA聚合酶消化特殊设计的引物扩增的PCR片段连接,然后转染昆虫细胞系,从而得到成熟的杆状病毒。本发明可与目前的所有基于PCR建库的...
一种具有红莲型细胞质的光温敏水稻雄性核不育系选育方法技术
本发明提出了具有红莲型细胞质的光温敏水稻雄性核不育系的选育方法。以红莲型不育系为母本,与携带有红莲型不育系恢复基因的光温敏核不育系的父本连续回交,核代换后得到由红莲型细胞质和具有隐性核不育基因的基因组核质重组的光温敏雄性核不育系。如果以...
聚肽型转染试剂制造技术
本发明提出了一种含有阳离子型聚肽的三嵌段共聚物,该共聚物为含有聚肽段和聚乙二醇段的三嵌段共聚物。三嵌段共聚物的构型为ABA型,其中,A指阳离子型聚肽段,B指聚乙二醇段。该共聚物用pH7~8的三羟甲基氨基甲烷-HCl溶液或三羟甲基氨基甲烷...
一种靶向壳聚糖基因载体及其制备和应用制造技术
本发明提出一种以壳聚糖为母体,以透明质酸为靶向分子的基因载体的制备方法。该方法为:用透明质酸酶37℃降解天然透明质酸至所需长度,透析纯化后冷冻干燥。然后按一定质量配比,37℃经EDC催化与四种不同分子量的壳聚糖偶联,形成四种不同分子量的...
一种耐热耐碱木聚糖酶酵母工程菌及其耐热木聚糖酶的生产方法技术
本发明提出一种提高木聚糖酶热稳定性的方法和一种产耐热耐碱重组木聚糖酶的酵母基因工程菌HB148n3。是通过将来自短小芽孢杆菌的木聚糖酶XYNHB第214位的天冬酰胺突变成丙氨酸,通过在毕赤酵母表达的糖基化修饰,而使重组木聚糖酶热稳定性提...
利用细菌575处理含Cd2+、Cu2+重金属离子污水的方法技术
本发明提出一种利用能有效富集重金属离子Cd↑[2+]与Cu↑[2+]的菌株来处理富含重金属离子Cd↑[2+]与Cu↑[2+]的污水的方法。该菌株于2007年4月20日保藏在中国典型培养物保藏中心,保藏号为CCTCC NO:M20705...
一种快速高通量的基因定点诱变方法技术
本发明提出了一种快速高通量的基因定点诱变方法,其步骤为:1.构建了一个表达DpnI限制性内切酶的DNA腺嘌呤甲基化酶缺陷的用于定点诱变的菌株;2.根据需要对基因待突变的位置进行序列分析,设计部分重叠(10~16nt)的PCR诱变引物;3...
一种快速高效构建哺乳动物细胞RNA干扰载体及其验证载体的方法技术
本发明提出了一种快速高效构建哺乳动物细胞RNA干扰载体及其验证载体的方法。构建RNA干扰载体步骤为:1)插入致死基因ccdB表达单元,改造RNA干扰骨架载体;2)设计一对部分重叠,且带有针对目的基因靶序列的寡核苷酸引物;3)反向PCR、...
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