本发明专利技术提供一种基于氢核磁共振－模式识别技术对椰岛鹿龟酒的检测方法，用于检测椰岛鹿龟酒产品的真假、掺伪，用于研究不同加工工艺和食品非法添加剂对保健酒内在整体质量的影响，该方法是一种客观有效的用于分析椰岛鹿龟酒的整体质量的检测手段，从而避免仅仅分析复杂体系食品的个别成分指标的传统食品检验方法和技术中存在的缺陷。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种检测方法，具体地说，涉及。
技术介绍
国内奶业“三聚氰胺”等一次次食品卫生事件，使食品安全成为近期备受世人关注的问题。目前食品检验的方法和技术大都不是针对食品的整体内在质量分析而设计的，除专属性存在一定问题导致“三聚氰胺”事件的发生外，其方法本身的局限性(即仅仅分析复杂体系食品的个别成分指标)同样导致仿冒名牌产品和掺假、掺伪现象层出不穷。因此快速准确地检测食品的安全与质量已经成为广大科研人员、食品企业乃至国家工作的重中之重。氢核磁共振-模式识别(1H-NMR-PR)技术是将氢核磁共振技术对化合物成分的检测与模式识别技术对众多检测结果的科学分析完美结合的一种高新技术。该项技术中氢核磁共振可以检测任何含H的化学成分，是鉴定有机化合物的重要方法之一。以动植物为原料来源的鹿龟酒中含有复杂的有机化合物体系，如果我们采用一定方法获取到这些复杂体系中特征性化学成分(或化学成分组)的化学信息，那么该食品的化学信息与食品的质量存在严格的对应关系。因此，鉴于1H-NMR谱正是这样一种可以提供食品中丰富的成分的化学信息的技术，并且所提供的化学信息与食品内在质量之间存在着严格的对应关系，则为食品的整体质量监控奠定了良好的基础。模式识别是用机器代替人对模式即所研究的事物进行分析、描述、判断和识别的技术，属于人工智能科学的一个重要分支。它的中心任务就是识别出某个样本与那一个模式(样本)相同或相近，即在一定的度量和观测的基础上把待识别的模式划分到各自模式类中。食品的成分复杂，其1H-NMR谱能提供丰富化学成分的化学信息，但是信号的重叠使得图谱变得十分复杂，仅靠肉眼观察只能从1H-NMR谱获取很有限的信息，而模式识别方法能够从复杂的数据中最大限度的提取信息。因此，1H-NMR谱结合冊方法对食品的定性分析提供了一条新的思路和方法，也是目前食品整体质量检测的理想方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供，用于检测椰岛鹿龟酒产品的真假、掺伪，用于研究不同加工工艺和食品非法添加剂对保健酒内在整体质量的影响，该方法是一种客观有效的用于分析椰岛鹿龟酒的整体质量的检测手段，从而避免仅仅分析复杂体系食品的个别成分指标的传统食品检验方法和技术中存在的缺陷。本专利技术的技术方案一种利用氢核磁共振技术对化合物成分进行检测与模式识别的技术，根据合格椰岛鹿龟酒样品建立的氢核磁共振-模式识别数据库，通过将未知样品的检测信息导入已经建立的数据库，可鉴别该测试样品是否合格，从而检测椰岛鹿龟酒的整体质量。本专利技术涉及的合格鹿龟酒样品，主要由下述原料组成当归、白术、党参、桅子、砂仁、肉桂、熟地、黄精、制首乌、制川芎、鹿茸、鹿骨胶和龟板胶。本专利技术包括以下的分析步骤A 标准样品和测试样品的图谱处理及数据采集(1)样品的制备量取样品，取量范围为10mL-30mL，其中优选取量为20mL。在 400C -80°C温度条件下减压蒸干，其中优选温度为60°C，残渣中加入纯水溶解，纯水用量为 10mL-25mL，其中优选为17. 5mL，溶解液用水饱和的正丁醇萃取，正丁醇用量为5_20mL，其中优选用量为10mL，吸取有机层液体，取量为2mL-10mL，其中优选为5mL，在40°C _80°C温度下减压蒸干，其中优选温度为60°C，加入0. 5mL D2O溶解后，用0. 45 μ m的微孔滤膜过滤，滤液置于直径5mm核磁管中，用于1H-NMR检测。(2) 1H-NMR谱的分析测试将步骤⑴中获得的各样品在400MHz核磁仪上，以恒温在四1，以D2O作为内锁，扫描16-64次，其中优选扫描32次，谱宽为-1500Ηζ_8000Ηζ，采样时间为3. 73s，脉冲间隔为0. 00-3. 00s，其中优选为2. 00s，采用标准的预饱和脉冲序列 (zgpr)压制水峰信号的条件进行测定，即获得各样品的1H-NMR谱。(3)图谱处理及数据采集方法将步骤⑵中测定获得的各样品1H-NMR图谱，每张图谱按0. 02-0. 07化学位移值单位进行分段，其中优选分段单位为0. 05化学位移值单位， 分段积分，并将积分值进行标准化处理，即得到每个样本的各化学位移值段与相对应的信号峰面积积分值的数据矩阵。B 标准数据库模型的建立采用椰岛鹿龟酒合格样品作为标准样品(由椰岛鹿龟酒酒厂于2007年至2009年期间生产的椰岛鹿龟酒)，采用如上A步骤的样品处理、1H-NMR谱的分析测试以及图谱处理及数据采集方法，获得椰岛鹿龟酒合格样品的数据矩阵，对该数据矩阵进行偏最小二乘法判别(PLS-DA)分析，即得到椰岛鹿龟酒合格样品数据库模型。C 采用缺味椰岛鹿龟酒样品(其缺当归、桅子、鹿茸、鹿骨胶、龟板胶)或者市场上购买的仿制椰岛鹿龟酒产品作为待测试样品，同样采用如上A步骤的样品处理、1H-NMR谱的分析测试以及图谱处理及数据采集方法，获得缺味椰岛鹿龟酒样品或仿制鹿龟酒样品的数据矩阵，将其导入上述B获得的椰岛鹿龟酒合格样品数据库模型中，通过与标准数据库模型的数据点在图中的分布对比，即可定性鉴别缺味椰岛鹿龟酒样品或仿制椰岛鹿龟酒样品是否与椰岛鹿龟酒合格品一致。任选地，在该方法中采用与B步骤中的标准样品不同批次的、但同样由椰岛鹿龟酒酒厂生产的椰岛鹿龟酒作为椰岛鹿龟酒验证样品，采用上述步骤A获得相应的验证样品的数据矩阵，将其导入方法B所建立的椰岛鹿龟酒标准样品模型图中，来分析验证样品的数据点是否与椰岛鹿龟酒标准样品的数据点聚在了一起，以此验证标准样品与验证样品在化学成分上差异较小，产品质量合格。附图说明图1.椰岛鹿龟酒合格样品的1H-NMR-PLS-DA分析图；图2.椰岛鹿龟酒验证样品和缺味样品与椰岛鹿龟酒标准样品的1H-NMR-PLS-DA 分析图；图3.椰岛鹿龟酒仿制品样品与椰岛鹿龟酒标准样品的1H-NMR-PLS-DA分析图；实施例一1.标准样品由椰岛鹿龟酒酒厂于2007年至2009年期间生产的椰岛鹿龟酒，共 30批次，每批次量取20mL ；验证样品另取2009年11月和12月生产的合格椰岛鹿龟酒，两个批次，各20mL ；待测样品缺味椰岛鹿龟酒样品(即缺当归、桅子、鹿茸、鹿骨胶、龟板胶的椰岛鹿龟酒样品)，各2个样品，各20mL。上述各样品分别在60°C温度条件下减压蒸干，残渣中加入纯水溶解，纯水用量 17. 5mL，溶解液用水饱和的正丁醇萃取，正丁醇用量为10mL，吸取有机层液体，取量5mL，在 60°C温度下减压蒸干，加入0. 5mL D2O溶解后，用0. 45 μ m的微孔滤膜过滤，滤液置于直径 5mm核磁管中，用于1HNMR检测，即获得椰岛鹿龟酒标准样品、椰岛鹿龟酒验证样品和椰岛鹿龟酒待测样品。2.样品的1H-NMR测定和处理将步骤1中的各样品分别进行1H-NMR测定，测定条件为400MHz核磁仪，恒温在292K,以D2O作为内锁，扫描32次，谱宽为-1500Hz-8000Hz, 采样时间为3. 73s，脉冲间隔为2. 00s，采用标准的预饱和脉冲序列(zgpr)压制水峰信号， 即分别获得各椰岛鹿龟酒标准样品、椰岛鹿龟酒验证样品和椰岛鹿龟酒待测样品的1H-NMR 谱；将获得的1H-NMR图谱，每张图谱按0. 05化学位移值单位进行分段，积分，并将积分值进行标准化处理，即得到每个样品的各化学位移值段与相对本文档来自技高网...
【技术保护点】
１．一种基于氢核磁共振－模式识别技术对椰岛鹿龟酒的检测方法，该方法步骤如下：Ａ：标准样品和测试样品的图谱处理及数据采集：（１）样品的制备：量取样品，取量范围为１０ｍＬ－３０ｍＬ，在４０℃－８０℃温度条件下减压蒸干，残渣中加入纯水溶解，纯水用量为１０ｍＬ－２５ｍＬ，溶解液用水饱和的正丁醇萃取，正丁醇用量为５－２０ｍＬ，吸取有机层液体，取量为２ｍＬ－１０ｍＬ，在４０℃－８０℃温度下减压蒸干，加入０．５ｍＬ Ｄ２Ｏ溶解后，用０．４５μｍ的微孔滤膜过滤，滤液置于直径５ｍｍ核磁管中，用于１Ｈ－ＮＭＲ检测；（２）１Ｈ－ＮＭＲ谱的分析测试：将步骤（１）中获得的各样品在４００ＭＨｚ核磁仪上，以恒温在２９２Ｋ，以Ｄ２Ｏ作为内锁，扫描１６－６４次，谱宽为－１５００Ｈｚ－８０００Ｈｚ，采样时间为３．７３ｓ，脉冲间隔为０．００－３．００ｓ，采用标准的预饱和脉冲序列（ｚｇｐｒ）压制水峰信号的条件进行测定，即获得各样品的１Ｈ－ＮＭＲ谱；（３）图谱处理及数据采集方法：将步骤（２）中测定获得的各样品１Ｈ－ＮＭＲ图谱，每张图谱按０．０２－０．０７化学位移值单位进行分段，分段积分，并将积分值进行标准化处理，即得到每个样本的各化学位移值段与相对应的信号峰面积积分值的数据矩阵；Ｂ：标准数据库模型的建立采用椰岛鹿龟酒合格样品作为标准样品（由椰岛鹿龟酒酒厂于２００７年至２００９年期间生产的椰岛鹿龟酒），采用如上Ａ步骤的样品处理、１Ｈ－ＮＭＲ谱的分析测试以及图谱处理及数据采集方法，获得椰岛鹿龟酒合格样品的数据矩阵，对该数据矩阵进行偏最小二乘法判别（ＰＬＳ－ＤＡ）分析，即得到椰岛鹿龟酒合格样品数据库模型；Ｃ：采用缺味椰岛鹿龟酒样品（其缺当归、栀子、鹿茸、鹿骨胶、龟板胶）或者市场上购买的仿制椰岛鹿龟酒产品作为待测试样品，同样采用如上Ａ步骤的样品处理、１Ｈ－ＮＭＲ谱的分析测试以及图谱处理及数据采集方法，获得缺味椰岛鹿龟酒样品或仿制鹿龟酒样品的数据矩阵，将其导入上述Ｂ获得的椰岛鹿龟酒合格样品数据库模型中，通过与标准数据库模型的数据点在图中的分布对比，即可定性鉴别缺味椰岛鹿龟酒样品或仿制椰岛鹿龟酒样品是否与椰岛鹿龟酒合格品一致；所述椰岛鹿龟酒合格样品主要由下述原料组成：当归、白术、党参、栀子、砂仁、肉桂、熟地、黄精、制首乌、制川芎、鹿茸、鹿骨胶和龟板胶。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄静，
申请(专利权)人：海南椰岛集团股份有限公司，
类型：发明
国别省市：66
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