The present invention provides a method for evaluating cold resistance of camphor embryogenic callus. Camphor embryogenic callus is treated under low temperature stress, and the contents of proline, soluble sugar, malondialdehyde MDA and the activities of superoxide dismutase SOD, catalase CAT and peroxidase POD in camphor embryogenic callus are determined. When the contents of proline and soluble sugar are relatively high, the activities of SOD, CAT and POD are determined. When the content of MDA is relatively low, the cold resistance of the corresponding camphor embryogenic callus is relatively strong; on the contrary, the cold resistance of the corresponding camphor embryogenic callus is relatively weak. The invention not only confirms that embryogenic callus can be used as a good material for identifying cold resistance of camphor, but also reveals the expression pattern of embryogenic callus under low temperature stress as well as the changes of physiological and biochemical indexes, and screens and obtains the most acute time and sensitive physiological indexes of the material in response to low temperature stress.
【技术实现步骤摘要】
香樟胚性愈伤组织抗寒性评价方法
本专利技术涉及一种香樟胚性愈伤组织抗寒性评价方法。
技术介绍
香樟(Cinnamomumcamphora)作为亚热带地区重要的材用和特种经济树种,不仅发挥着重要的园林绿化价值,且其材质上乘,是贵重家具、造船和雕刻等的重要用材,此外,樟树皮、果和根等具有一定的药用价值。本申请人前期从香樟中分离得到4个CcCBF基因,命名为CcCBFa、CcCBFb、CcCBFc和CcCBFd(GenBank登录号分别为KJ958932、KJ958933、KP336741和KP336742,以下简称CcCBFs基因)。欲在香樟中研究CcCBFs基因功能,然而,由于木本植物本身的特殊性,使其遗传转化和再生周期较长,通过获得转基因香樟植株研究CcCBFs基因功能不切实际。因此,发掘快速准确基因功能研究材料,具有重要意义。胚性愈伤组织分裂活性强,且具备胚胎发生能力,研究发现以香樟胚性愈伤组织作为受体,能获得较理想的转化效果,香樟胚性愈伤组织可能是抗寒基因功能验证的好材料。然而,目前尚不清楚香樟胚性愈伤组织能否准确快速的响应低温胁迫。
技术实现思路
为了解决现有技术中存在的问题,本专利技术提供了香樟胚性愈伤组织抗寒性评价方法。本专利技术通过荧光定量PCR技术,分析香樟胚性愈伤组织在分子水平上感知低温胁迫的能力,筛选获得胚性愈伤组织相对表达量反应最剧烈的时刻;并通过测定渗透调节物质、膜代谢产物以及酶活性等指标,分析其在植物组织水平响应低温胁迫的能力,筛选获得胚性愈伤组织应对低温较敏感的生理指标及对应的时刻,从而建立香樟胚性愈伤组织抗寒性鉴定体系。本专利技术提 ...
【技术保护点】
1.香樟胚性愈伤组织抗寒性评价方法,其特征在于:将香樟胚性愈伤组织进行低温胁迫处理,测定香樟胚性愈伤组织中脯氨酸、可溶性糖、丙二醛MDA含量以及超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和过氧化物酶POD的活力;当脯氨酸、可溶性糖含量相对较高,SOD、CAT和POD活力相对较强,MDA含量相对较低时,则对应的香樟胚性愈伤组织的抗寒性相对较强;当脯氨酸、可溶性糖含量相对较低,SOD、CAT和POD活力相对较弱,MDA含量相对较高时,则对应的香樟胚性愈伤组织的抗寒性相对较弱。
【技术特征摘要】
1.香樟胚性愈伤组织抗寒性评价方法,其特征在于:将香樟胚性愈伤组织进行低温胁迫处理,测定香樟胚性愈伤组织中脯氨酸、可溶性糖、丙二醛MDA含量以及超氧化物歧化酶SOD、过氧化氢酶CAT和过氧化物酶POD的活力;当脯氨酸、可溶性糖含量相对较高,SOD、CAT和POD活力相对较强,MDA含量相对较低时,则对应的香樟胚性愈伤组织的抗寒性相对较强;当脯氨酸、可溶性糖含量相对较低,SOD、CAT和POD活力相对较弱,MDA含量相对较高时,则对应的香樟胚性愈伤组织的抗寒性相对较弱。2.根据权利要求1所述的评价方法,其特征在于:所述低温胁迫处理是在4℃和/或-4℃下处理0.5-24h。3.根据权利要求2所述的评价方法,其特征在于:所述处理时的光照强度为3000lx,光照时间16h·d-1。4.根据权利要求1-3任一项所述的评价方法,其特征在于...
【专利技术属性】
技术研发人员:杜丽,周婵,王建格,刘译朗,王圣,韩贝贝,
申请(专利权)人:南阳师范学院,
类型:发明
国别省市:河南,41
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