一种快速检测番茄红素的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测番茄红素的方法，包括如下步骤：步骤一，从原料中提取番茄红素；步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成多个梯度浓度的检测液；步骤三，取检测液放入NanoDrop 2000C超微量分光光度计，检测510‑520nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；步骤四，依据标准曲线换算番茄红素的含量；运用本方法只需要极少的样本量就可以精确检测出番茄红素，提高检测的效率和质量。

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测番茄红素的方法
本专利技术涉及检测领域，特别是一种检测番茄红素的方法。
技术介绍
现有的番茄红素检测方法通常是采用高效液相色谱法(HPLC)、常规紫外-可见分光光度法(UV-VIS)。HPLC方法检测过程中需要大量流动相、操作复杂、色谱柱容易堵塞渗漏、检测一个番茄红素样本一般需要30min，因此操作繁琐、耗时长、效率低。UV-VIS法检测所需样本量也很大、检测值不精确；市场需要找到一种方法能够通过少量的样本快速检测出番茄红素，本专利技术解决这样的问题。
技术实现思路
为解决现有技术的不足，本专利技术的目的在于提供一种快速检测番茄红素的方法，只需要极少的样本量就可以精确检测出番茄红素，提高检测的效率和质量。为了实现上述目标，本专利技术采用如下的技术方案：一种快速检测番茄红素的方法，包括如下步骤：步骤一，从原料中提取番茄红素；步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成多个梯度浓度的检测液；步骤三，取检测液放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测510-520nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；步骤四，依据标准曲线换算番茄红素的含量。前述的一种快速检测番茄红素的方法,步骤一，从番茄中提取番茄红素；番茄洗净去蒂，切碎后于匀浆机破壁；在番茄浆中加入三氯甲烷，充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。前述的一种快速检测番茄红素的方法，步骤一，从三孢布拉氏霉中提取番茄红素；在发酵培养后的三孢布拉氏霉菌体中加入三氯甲烷；充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。前述的一种快速检测番茄红素的方法，步骤一，从粘红酵母中提取番茄红素；将发酵培养后的粘红酵母菌体于超声波细胞粉碎仪中破壁后，加入三氯甲烷；充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。前述的一种快速检测番茄红素的方法，步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成成终浓度为1、1.5、2、2.5、5、10、20、40、80、100μg/mL的检测液。前述的一种快速检测番茄红素的方法，步骤三，取检测液放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测515nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线。前述的一种快速检测番茄红素的方法，步骤四，取原料中提取的番茄红素2μL，放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测510-520nm波长波长的吸收峰值，依据标准曲线换算番茄红素的含量，2s内得出检测结果。本专利技术的有益之处在于：本专利技术利用NanoDrop2000/2000c的紫外-可见分光光度计模块检测番茄红素的含量，相比其他检测方法的检测结果更精确、重复性更高、检测所需样本量极少仅需2μL即可2s内得出检测结果；通过实验选择最佳检测波长为515nm，提高检测精确度，避免干扰。附图说明图1是本专利技术实验一的番茄红素标准品吸收峰图；图2是本专利技术实验一的β-胡萝卜素标准品吸收峰图；图3是三种检测方法对同一样品的番茄红素含量检测结果对比图。具体实施方式以下结合附图和具体实施例对本专利技术作具体的介绍。一种快速检测番茄红素的方法，包括如下步骤：步骤一，从原料中提取番茄红素；△从番茄中提取番茄红素的步骤如下：番茄洗净去蒂，切碎后于匀浆机破壁；取番茄浆5g，加入三氯甲烷5mL，充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。作为一种优选，于超声水槽中避光超声30min，摇床180r/min转速震荡浸提萃取6h。萃取液经0.45um滤器过滤去除杂质。△从三孢布拉氏霉中提取番茄红素的步骤如下：取在发酵培养后的三孢布拉氏霉菌体5g，加入三氯甲烷5mL；充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。作为一种优选，于超声水槽中避光超声30min，摇床180r/min转速震荡浸提萃取6h,萃取液经0.45um滤器过滤去除杂质。△从粘红酵母中提取番茄红素的步骤如下：称取发酵培养后的粘红酵母菌体5g，于超声波细胞粉碎仪中破壁后，破壁条件为80W，超声1min，间歇1min，加入三氯甲烷5mL；充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。作为一种优选，于超声水槽中避光超声30min，摇床180r/min转速震荡浸提萃取6h,萃取液经0.45um滤器过滤去除杂质。步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成成终浓度为1、1.5、2、2.5、5、10、20、40、80、100μg/mL的检测液。步骤三，取检测液放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测510-520nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；步骤四，取原料中提取的番茄红素2μL，放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测510-520nm波长的吸收峰值，依据标准曲线换算番茄红素的含量：m番(μg/g菌体)＝A吸收峰值×0.0241-0.0484，2s内得出检测结果。实验一，吸收峰的选择实验：将番茄红素、β-胡萝卜素标准品溶于三氯甲烷，取2μL进行检测，以三氯甲烷作为空白对照，得到峰图。如图1番茄红素标准品吸收峰图：番茄红素有三个吸收峰，对应的波长分别为456nm、484nm、515nm。如图2β-胡萝卜素标准品吸收峰图：β-胡萝卜素有三个吸收峰，波长分别为442nm、461nm、489nm。为了避免β-胡萝卜素的干扰，选取515nm作为番茄红素的检测波长。作为一种实施例步骤，步骤三，取检测液放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测515nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线。实验二，三种方法检测番茄红素的精确度验证实验：通过三孢布拉氏霉提取色素；称取发酵培养后的三孢布拉氏霉菌体5g，加入三氯甲烷5mL，于超声水槽中避光超声30min，摇床180r/min转速震荡浸提萃取6h，萃取液经0.45um滤器过滤去除杂质，得到检测液。检测实验2-1：常规紫外-可见分光光度法(UV-VIS)检测番茄红素含量；将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成终浓度为1、1.5、2、2.5、5、10、20、40、80、100μg/mL的检测液；取1mL检测液于紫外-可见分光光度计检测502nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；取所得的检测液1mL于紫外-可见分光光度计检测，依据标准曲线换算番茄红素含量。检测实验2-2：高效液相色谱法(HPLC)检测番茄红素含量；将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成终浓度为1、1.5、2、2.5、5、10、20、40、80、100μg/mL的检测液，然后经0.22μm滤器过滤后取10μL进行高效液相色谱法(HPLC)检测。色谱柱为DiamonsilC18co本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种快速检测番茄红素的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，从原料中提取番茄红素；步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成多个梯度浓度的检测液；步骤三，取检测液放入NanoDrop 2000C超微量分光光度计，检测510‑520nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；步骤四，依据标准曲线换算番茄红素的含量。

【技术特征摘要】
1.一种快速检测番茄红素的方法，其特征在于，包括如下步骤：步骤一，从原料中提取番茄红素；步骤二，将番茄红素标准品溶于三氯甲烷，并配置成多个梯度浓度的检测液；步骤三，取检测液放入NanoDrop2000C超微量分光光度计，检测510-520nm波长的吸收峰值，绘制标准曲线；步骤四，依据标准曲线换算番茄红素的含量。2.根据权利要求1所述的一种快速检测番茄红素的方法，其特征在于，步骤一，从番茄中提取番茄红素；番茄洗净去蒂，切碎后于匀浆机破壁；在番茄浆中加入三氯甲烷，充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。3.根据权利要求1所述的一种快速检测番茄红素的方法，其特征在于，步骤一，从三孢布拉氏霉中提取番茄红素；在发酵培养后的三孢布拉氏霉菌体中加入三氯甲烷；充分搅拌混匀，于超声水槽中避光超声25-35min，摇床170-190r/min转速震荡浸提萃取5-7h；萃取液经0.40-0.50um滤器过滤去除杂质。4.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：王燕龙，
申请(专利权)人：济宁医学院，
类型：发明
国别省市：山东,37