一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条及其制备方法，包括横向水平设置的条形的硝酸纤维素膜垫，所述硝酸纤维膜垫上纵向间隔且相互平行的分别设置有条形的检测线和条形的质控线，其中所述硝酸纤维素膜垫靠近质控线一端抵接有一横向水平设置的条形的吸水垫，所述硝酸纤维素膜垫靠近检测线的一端抵接有一横向水平设置的条形的结合垫，所述结合垫远离硝酸纤维素膜垫的一端抵接有一横向水平设置的条形的样品垫；所述结合垫内含有由胶体金或荧光微球标记的抗人PTH抗体，所述检测线包被有可与PTH特异性结合的检测抗体，质控线包被有可与游离的抗人PTH抗体特异性结合的质控抗体。其检测结构精确度高。

A portable test strip for detecting human parathyroid hormone and its preparation method

The invention discloses a portable test strip for detecting human parathyroid hormone and a preparation method thereof, including a horizontal strip of cellulose nitrate film cushion, which is vertically spaced and parallel to each other and is respectively provided with a strip of detection line and a strip of quality control line. The cellulose nitrate film cushion is connected at one end of the quality control line with a horizontal arrangement. A strip-shaped water absorbent pad is arranged, and one end of the nitrocellulose membrane pad near the detection line is butted with a strip-shaped bonding pad horizontally arranged, and one end of the bonding pad far from the nitrocellulose membrane pad is butted with a strip-shaped sample pad horizontally arranged; the bonding pad contains anti-human PTH antibody labeled by colloidal gold or fluorescent microspheres, and the detection line is coated with PTH antibody. Specifically bound antibodies were detected, and the quality control wire was coated with a quality control antibody that could specifically bind to free anti-human PTH antibody. Its detection structure has high accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条及其制备方法
本专利技术涉及一种生化诊断试纸条，尤其涉及一种便携式检测甲状旁腺激素的试纸条及其制备方法。
技术介绍
甲状腺癌是头颈部最常见的恶性肿瘤，也是近年来发病率增长速度最快的恶性肿瘤之一，甲状腺癌已经成为女性第五大常见恶性肿瘤。甲状腺癌的治疗主要以外科手术治疗为主，行甲状腺全切术后应尽快确定甲状旁腺功能情况，采取针对性措施进行防治甲状旁腺功能减退。手术时如果意外切除了甲状旁腺，患者的血钙浓度会明显降低，引发手足抽搐，甚至危及生命。文献报道甲状腺术后暂时性低钙血症的发生率为0.3～86％，永久性的低钙血症为0～13％。PTH是由甲状旁腺主细胞分泌，具有调节和保持血清钙在正常水平的作用。如何在手术过程中有效避免损伤甲状旁腺是一大难题。甲状旁腺术中保护技术包括甲状旁腺的识别、精细化甲状旁腺保护操作技术、补救性甲状旁腺自体移植技术三方面。甲状旁腺的识别是术中甲状旁腺保护最关键的一步。由于甲状旁腺体体积小，其周围有甲状腺、脂肪、淋巴结、胸腺、肌肉等组织，在术中辨认存在困难。即使有经验的外科医生肉眼识别的准确率也只有近70％，甲状腺术中存在高达9～19％的甲状旁腺意外切除率。目前病理仍是鉴别甲状旁腺的金标准。但这需要切除部分甲状旁腺组织，术中等待时间长，费用贵，还存在1.3％错误率，细针穿刺组织洗脱液的甲状旁腺激素(PTH)检测，用于术前和术中鉴别甲状旁腺的方法，已有文献报道。多项研究表明甲状旁腺穿刺组织洗脱液的PTH值明显高于非甲状旁腺组织，通过细针穿刺组织洗脱液的PTH检测在术中鉴别甲状旁腺组织，操作简单，敏感性和特异性高，并十分安全。目前PTH的检测一般是通过电化学发光进行，需大型的检测设备，检测时间加上运送时间需半小时以上，如此推广应用有难度。免疫层析法(Immunochromatography)是近几年来兴起的一种快速诊断技术，其原理是将特异的抗体先固定于硝酸纤维素膜或醋酸纤维素膜的某一区带，当干燥的纤维素一端浸入样品(组织液或血液)后，由于毛细管作用，样品将沿着该膜向前移动，当移动至固定有抗体的区域时，样品中相应的抗原即与该抗体发生特异性结合，型成肉眼可见的检测带。现有的免疫层析试纸条产品常用的示踪标记粒子有纳米金、纳米硒、彩色胶乳等等，其中纳米金应用最为广泛，纳米金也称为胶体金。以胶体金作为示踪标记物的免疫层析技术特称为免疫胶体金技术(Immunecolloidalgoldtechnique，GICT)。胶体金是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗环血酸、枸橼酸钠、鞣酸等作用下，聚合成为特定大小的金颗粒，并由于静电作用成为一种稳定的胶体状态而得名。胶体金在弱碱环境下带负电荷，可与蛋白质分子的正电荷基团型成牢固结合，由于这种结合式静电结合，所以不影响蛋白质的生物特性。胶体金除了与蛋白质结合以外，还可以与许多其他生物大分子结合，如SPA、PHA、ConA。根据胶体金的一些物理性状，如高电子密度、颗粒大小、型状及颜色反应，加上结合物的免疫和生物学特性，因而使胶体金广泛地应用于免疫学、组织学、病理学和细胞生物学等领域。与现有血凝法、放免法(RIA)、免放法(IMA)以及法学发光法检测相比，免疫层析法检测的优点主要包括：(1)使用方便快速，便于基层使用和现场使用，所有反应能在20分钟内完成；(2)成本低，不需要特殊的仪器设备；(3)应用范围广，可适应多种检测条件；(4)可以进行多项检测，弱阳性样本比较难获得，多项检测可以减省样品，降低成本；(5)标记物稳定，标记样品在4℃储存两年以上，无信号衰减现象；(6)胶体金本身为红色，不需要加入发色试剂，省却了酶标的致癌性底物及终止液的步骤，对人体无毒害。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术的目的之一在于提供一种能快速对穿刺组织洗脱液的PTH值进行定量分析试纸条，其灵敏度高，可为临床甲状腺癌行手术前或术中准确的鉴别甲状旁腺。为了实现上述目的，本专利技术的技术方案是：一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，包括横向水平设置的条形的硝酸纤维素膜垫，所述硝酸纤维膜垫上纵向间隔且相互平行的分别设置有一个条形的检测线和一个条形的质控线，所述检测线和质控线的两端分别与所述硝酸纤维素膜垫的两侧边平齐，其中所述硝酸纤维素膜垫靠近质控线一端抵接有一横向水平设置的条形的吸水垫，所述硝酸纤维素膜垫靠近检测线的一端抵接有一横向水平设置的条形的结合垫，所述结合垫远离硝酸纤维素膜垫的一端抵接有一横向水平设置的条形的样品垫，所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜垫和吸水垫的两侧边均平齐；所述结合垫内含有由胶体金或荧光微球标记的抗人PTH抗体，所述检测线包被有可与PTH特异性结合的检测抗体，所述质控线包被有可与游离的抗人PTH抗体特异性结合的质控抗体。上述技术方案的有益效果在于：采用标记有纳米荧光微球或胶体金的抗人PTH抗体与样品中的PTH之间发生免疫反应生成纳米荧光微球/胶体金-抗人PTH抗体-PTH的复合体，并在虹吸的作用下向吸水垫一侧移动，到达检测线时PTH的另一位点与检测抗体结合，形成纳米荧光微球/胶体金-抗人PTH抗体-PTH-检测抗体的复合体，而游离的纳米荧光微球或胶体金标记的抗人PTH抗体继续向前移动至质控线，并与质控线上的质控抗体发生免疫反应形成纳米荧光微球/胶体金-抗人PTH抗体-质控抗体的复合物，其中，荧光纳米微球带有荧光，通过荧光检测装置可以检测出检测线和质控线上的荧光的深度来判断荧光纳米微球的含量，而胶体金带有橘红色，会在检测线和质控线上分别形成橘红色的线条，根据橘红色线条颜色的深浅即可判断其中PTH含量的多少。上述技术方案中所述样品垫是由处理液处理的玻璃纤维膜于室温相对湿度为15-30％的条件下干燥并密封保存而得到的，其中所述处理液包括0.01MPBS、0.1wt％Tween-20、1wt％牛血清白蛋白、10wt％蔗糖。上述技术方案的有益效果在于：所述样品垫适用于体液/血清/血浆中PTH的检测。上述技术方案中所述样品垫包括经红细胞单抗处理后的纤维玻纤膜和滤血膜，所述滤血膜一端与所述结合垫对应端抵接，所述纤维玻纤膜设置在所述滤血膜远离结合垫的一端，且所述纤维玻纤膜靠近所述滤血膜的一端压覆在所述滤血膜上端,或所述纤维玻纤膜一端与所述结合垫对应端抵接，所述滤血膜设置在所述纤维玻纤膜远离结合垫的一端，且所述滤血膜靠近所述纤维玻纤膜的一端压覆在所述纤维玻纤膜上端，将所述样品垫置于室温相对湿度为15-30％的条件下干燥并密封保存备用。其中，不论是纤维玻纤膜在上或是滤血膜在上，二者叠合处的长度优选的2-4mm,且全血样品滴加在远离结合垫的滤血膜或纤维玻纤膜上。上述技术方案的有益效果在于：所述样品垫适用于全血样品中PTH的检测，其中红细胞单抗处理后的纤维玻纤膜和滤血膜能将全血中的红细胞、血小板等成分截留。上述技术方案中所述检测抗体为PTH抗体，所述质控抗体为羊抗鼠IgG。上述技术方案的有益效果在于：获得容易，特异性强。上述技术方案中所述吸水垫为吸水纸。上述技术方案的有益效果在于：获得容易，吸水效果好。上述技术方案中还包括一个条形的底板，所述样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜和吸水垫沿底板长度方向依次铺设在所述底板上端。上述技术方案的有益本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，包括横向水平设置的条形的硝酸纤维素膜垫(3)，所述硝酸纤维膜垫(3)上纵向间隔且相互平行的分别设置有一个条形的检测线(4)和一个条形的质控线(5)，所述检测线(4)和质控线(5)的两端分别与所述硝酸纤维素膜垫(3)的两侧边平齐，其中所述硝酸纤维素膜垫(3)靠近质控线(5)一端抵接有一横向水平设置的条形的吸水垫(6)，所述硝酸纤维素膜垫(3)靠近检测线(4)的一端抵接有一横向水平设置的条形的结合垫(2)，所述结合垫(2)远离硝酸纤维素膜垫(3)的一端抵接有一横向水平设置的条形的样品垫(1)，所述样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜垫(3)和吸水垫(6)的两侧边均平齐；所述结合垫(2)内含有由胶体金或荧光微球标记的抗人PTH抗体，所述检测线(4)包被有可与PTH特异性结合的检测抗体，所述质控线(5)包被有可与游离的抗人PTH抗体特异性结合的质控抗体。

【技术特征摘要】
1.一种便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，包括横向水平设置的条形的硝酸纤维素膜垫(3)，所述硝酸纤维膜垫(3)上纵向间隔且相互平行的分别设置有一个条形的检测线(4)和一个条形的质控线(5)，所述检测线(4)和质控线(5)的两端分别与所述硝酸纤维素膜垫(3)的两侧边平齐，其中所述硝酸纤维素膜垫(3)靠近质控线(5)一端抵接有一横向水平设置的条形的吸水垫(6)，所述硝酸纤维素膜垫(3)靠近检测线(4)的一端抵接有一横向水平设置的条形的结合垫(2)，所述结合垫(2)远离硝酸纤维素膜垫(3)的一端抵接有一横向水平设置的条形的样品垫(1)，所述样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜垫(3)和吸水垫(6)的两侧边均平齐；所述结合垫(2)内含有由胶体金或荧光微球标记的抗人PTH抗体，所述检测线(4)包被有可与PTH特异性结合的检测抗体，所述质控线(5)包被有可与游离的抗人PTH抗体特异性结合的质控抗体。2.根据权利要求1所述的便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，所述样品垫(1)是由处理液处理的玻璃纤维膜于室温相对湿度为15-30％的条件下干燥并密封保存而得到的，其中所述处理液包括0.01MPBS、0.1wt％Tween-20、1wt％牛血清白蛋白、10wt％蔗糖。3.根据权利要求1所述的便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，所述样品垫(1)包括经红细胞单抗处理后的纤维玻纤膜和滤血膜，所述滤血膜一端与所述结合垫对应端抵接，所述纤维玻纤膜设置在所述滤血膜远离结合垫的一端，且所述纤维玻纤膜靠近所述滤血膜的一端压覆在所述滤血膜上端,或所述纤维玻纤膜一端与所述结合垫对应端抵接，所述滤血膜设置在所述纤维玻纤膜远离结合垫的一端，且所述滤血膜靠近所述纤维玻纤膜的一端压覆在所述纤维玻纤膜上端，将所述样品垫(1)置于室温相对湿度为15-30％的条件下干燥并密封保存备用。4.根据权利要求2或3所述的便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，所述检测抗体为PTH抗体，所述质控抗体为羊抗鼠IgG。5.根据权利要求4所述的便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，所述吸水垫为吸水纸。6.根据权利要求5所述的便携式检测人甲状旁腺激素的试纸条，其特征在于，还包括一个条形的底板(7)，所述样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜垫(3)和吸水垫(6)沿底板(7)长度方向依次铺设在所述底板(7)上端。7.一种如权利要求6所述的试纸条的制备方法，其特征在于，步骤如下：将样品垫(1)、结合垫(2)、硝酸纤维素膜垫(3)和吸水垫(6)依次沿底板(7)长度方向粘附在所述底板(7)上端，且样品垫(1)与结合垫(2)相互靠近一侧相互抵接，所述结合垫(2)与硝酸纤维素膜垫(3)相互靠近一端相互抵接，所述硝酸纤维素膜垫(3)与吸水垫(6)相互靠近的一端的相互抵接。8.根据权利要求7所述的试纸条的制备方法，其...

【专利技术属性】
技术研发人员：李兴睿，王珏，
申请(专利权)人：施康培医疗科技武汉有限公司，
类型：发明
国别省市：湖北,42