一种元宝枫籽活性肽的制备方法技术

本发明专利技术涉及活性肽的制备，公开了一种元宝枫籽活性肽的制备方法，该方法包含以下步骤：1）过筛；2）超声辅助提取；3）酸沉；4）水洗分散；5）干燥；6)酶解：称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水和Alcalase蛋白酶，水解后，加热钝化蛋白酶，即得元宝枫籽活性肽。本发明专利技术通过超声辅助浸提，提取元宝枫籽分离蛋白，利用Alcalase蛋白酶对元宝枫籽蛋白进行水解制备元宝枫籽活性肽，该提取方法简单，工艺成熟，适于工业实际生产，能够短时间提取元宝枫籽活性肽，蛋白提取率可达65%以上，所得元宝枫籽活性肽的水解度(DH)高达78.35%，适于用于食品、保健品等。

【技术实现步骤摘要】
一种元宝枫籽活性肽的制备方法
本专利技术涉及活性肽的制备，尤其涉及一种元宝枫籽活性肽的制备方法。
技术介绍
元宝枫籽颗粒大，含油量高，含油量为48%，机榨出油率35%，高于油菜籽出油率。元宝枫是以含油酸和亚油酸的半干性油，其中必需脂肪酸——亚油酸和亚麻酸高达53%，油质优良，是食用植物油中不多见的，因此元宝枫籽油利用较多，但是元宝枫籽中的蛋白质却较少被利用，元宝枫籽含蛋白质25%-27%，不含淀粉，在植物种子种是鲜见的。种仁提取油后，油粕是很好的食用蛋白质。据测定，元宝树蛋白质中含有9种人体必需的氨基酸，属完全蛋白质，制取的优质食物味道鲜美，是理想的蛋白质资源，已经越来越为人们所重视。但是近年来科学研究发现，人类摄取蛋白质经消化酶作用后，并非主要以氨基酸的形式吸收，而是以肽的形式吸收，一些肽不仅能提供人体生长、发育所需的营养物质，同时具有多种生理功能，如改善和提高矿物质运输和吸收、抗菌和病毒、提高免疫力、抗氧化、降胆固醇、抗癌作用，清除自由基抗衰老以及抗高血压和高血脂等。而元宝枫籽活性肽的制备还未见报道。
技术实现思路
为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种元宝枫籽活性肽的制备方法，通过超声辅助浸提和酶解，并严格调节各个步骤的提取参数，能够短时间提取元宝枫籽活性肽，蛋白提取率可达65%以上，水解度可达78%以上。本专利技术的具体技术方案为：该方法包含以下步骤：1）过筛：将脱脂元宝枫籽粕粉碎，过100-180目筛；2）超声辅助提取：取筛下物，加入蒸馏水，用lmol/LNaOH调节到预定pH，然后放入超声波仪器中提取，将超声后的混合物离心分离，收集上清液；3）酸沉：用1mol/LHCl调节上清液到pH=4.5，离心后倒去上清液，得到元宝枫籽蛋白凝乳；4）水洗分散：对元宝枫籽蛋白凝乳进行水洗后，将其分散在去离子水中，调节至pH=7.0；5）干燥：将蛋白分散液粉碎、均质，经冷冻干燥后制得元宝枫籽分离蛋白；6)酶解：称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水和Alcalase蛋白酶，水解后，加热钝化蛋白酶，即得元宝枫籽活性肽。采用超声辅助提取元宝枫籽分离蛋白，能够使元宝枫籽分离蛋白最大限度的析出，提高元宝枫籽分离蛋白提取率，加快提取速率。pH值对于蛋白质提取效率影响极大，随pH增加，蛋白质提取率增加，但是到达一定pH值后，提取率反而下降，因此提取时采用NaOH调节pH值至预定pH，提取效率最佳。提取后，调节pH=4.5，为元宝枫籽分离蛋白的蛋白质等电点，因此蛋白质大量沉淀，简单离心即可分离。作为优选，所述步骤6）中酶解的具体方法为：准确称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水至蛋白完全溶解，然后加入反应器搅拌至均质，并加热至反应温度，用0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl调节酸碱度，准确量取Alcalase蛋白酶加入水解反应器中，反应过程中及时滴加0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl，使pH值稳定，并使温度始终保持不变，水解后，即用0.5mol/L的HCl调节pH值至4.3，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到90℃，加热15min，钝化蛋白酶。作为优选，所述酶解反应温度为55-60℃，酶解pH=8.8-9.2，底物浓度8-10wt%，酶质量分数6-7wt%，水解时间2-3h。随着温度的升高，蛋白水解度DH增大，但是温度高于一定温度，DH下降。pH值对元宝枫籽分离蛋白水解的影响较大。底物浓度对DH影响也很大，而且底物浓度还影响酶的添加量，水解时间也影响DH，综合考虑多种因素，确定了最适的酶解方法及相关参数。作为优选，所述步骤2）中筛下物和蒸馏水的料液比为1:28-32。作为优选，所述步骤2）中预定pH=9.5。作为优选，所述步骤2）中超声功率为360W以上，超声时间为50-70min，超声温度为35-45℃。温度过高蛋白质易变性，温度过低，提取效果差，提取时间长，在35-45℃时，综合效果最佳。作为优选，所述步骤2）中离心转速为3400r/min，离心时间为10-20min。作为优选，所述步骤3）中离心转速为3400r/min，离心时间为25-35min。作为优选，所述步骤4）中水洗重复1-2次。作为优选，所述步骤5）中采用均质机均质，均质机压力为10MPa。与现有技术对比，本专利技术的有益效果是：本专利技术通过超声辅助浸提，提取元宝枫籽分离蛋白，利用Alcalase蛋白酶对元宝枫籽蛋白进行水解制备元宝枫籽活性肽，该提取方法简单，工艺成熟，适于工业实际生产，能够短时间提取元宝枫籽活性肽，蛋白提取率可达65%以上，所得元宝枫籽活性肽的水解度(DH)高达78.35%，适于用于食品、保健品等。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的描述。实施例1将脱脂元宝枫籽粕粉碎，过100目筛，取筛下物，加入筛下物按料液比1：30加入蒸馏水，用lmol/LNaOH调节到pH=9.5，放入超声波仪器中提取，超声功率为360W，超声时间为60min，超声温度为35℃。将混合物倒入离心管，在3400r/min下离心15min，收集上清液。用1mol/LHCl调节上清液到蛋白等电点pH=4.5，在3400r/min下离心30min，倒去上清液，得到元宝枫籽蛋白凝乳。对凝乳进行二次水洗后，将其分散在去离子水中，调节至pH=7.0，胶体磨粉碎、均质机均质后的蛋白分散液经冷冻干燥制得亚麻籽分离蛋白，均质机压力为10MPa，所得蛋白提取率为65.45%。按8%的底物浓度准确称取元宝枫籽分离蛋白，加入适量蒸馏水，然后加入反应器搅拌至均质加热至55℃，用0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl调节酸碱度至pH9.0，依据所用酶的活力，准确量取6%Alcalase蛋白酶加入水解反应器中，反应过程中及时滴加0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl，使pH值稳定在pH9.0，并使温度始终保持在55℃。水解2.0h，即用0.5mol/L的HCl调节至pH4.3，停止搅拌，移出反应器，迅速升温到90℃，加热15min，钝化蛋白酶。记录水解过程中各时段消耗的碱液量，采用pHstat法计算水解度DH为75.24%。实施例2将脱脂元宝枫籽粕粉碎，过180目筛，取筛下物，加入筛下物按料液比1：32加入蒸馏水，用lmol/LNaOH调节到pH=9.5，放入超声波仪器中提取，超声功率为500W，超声时间为50min，超声温度为40℃。将混合物倒入离心管，在3400r/min下离心15min，收集上清液。用1mol/LHCl调节上清液到蛋白等电点pH=4.5，在3400r/min下离心30min，倒去上清液，得到元宝枫籽蛋白凝乳。对凝乳进行一次水洗后，将其分散在去离子水中，调节至pH=7.0，胶体磨粉碎、均质机均质后的蛋白分散液经冷冻干燥制得亚麻籽分离蛋白，均质机压力为10MPa，所得蛋白提取率为62.49%。按10%的底物浓度准确称取元宝枫籽分离蛋白，加入适量蒸馏水，然后加入反应器搅拌至均质加热至57℃，用0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl调节酸碱度至pH8.8，依据所用酶的活力，准确量取7%Alcalase蛋白酶加入水解反应器中，反应过程中及时滴加0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl，使pH值稳定在pH8本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种元宝枫籽活性肽的制备方法，其特征在于：该方法包含以下步骤：1）过筛：将脱脂元宝枫籽粕粉碎，过100‑180目筛；2）超声辅助提取：取筛下物，加入蒸馏水，用lmol/L NaOH调节到预定pH，然后放入超声波仪器中提取，将超声后的混合物离心分离，收集上清液；3）酸沉：用1mol/L HCl调节上清液到pH=4.5，离心后倒去上清液，得到元宝枫籽蛋白凝乳；4）水洗分散：对元宝枫籽蛋白凝乳进行水洗后，将其分散在去离子水中，调节至pH=7.0；5）干燥：将蛋白分散液粉碎、均质，经冷冻干燥后制得元宝枫籽分离蛋白；6)酶解：称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水和Alcalase蛋白酶，水解后，加热钝化蛋白酶，即得元宝枫籽活性肽。

【技术特征摘要】
1.一种元宝枫籽活性肽的制备方法，其特征在于：该方法包含以下步骤：1）过筛：将脱脂元宝枫籽粕粉碎，过100-180目筛；2）超声辅助提取：取筛下物，加入蒸馏水，用lmol/LNaOH调节到预定pH，然后放入超声波仪器中提取，将超声后的混合物离心分离，收集上清液；3）酸沉：用1mol/LHCl调节上清液到pH=4.5，离心后倒去上清液，得到元宝枫籽蛋白凝乳；4）水洗分散：对元宝枫籽蛋白凝乳进行水洗后，将其分散在去离子水中，调节至pH=7.0；5）干燥：将蛋白分散液粉碎、均质，经冷冻干燥后制得元宝枫籽分离蛋白；6)酶解：称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水和Alcalase蛋白酶，水解后，加热钝化蛋白酶，即得元宝枫籽活性肽。2.如权利要求1所述的元宝枫籽活性肽的制备方法，其特征在于，所述步骤6）中酶解的具体方法为：准确称取元宝枫籽分离蛋白，加入蒸馏水至蛋白完全溶解，然后加入反应器搅拌至均质，并加热至反应温度，用0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl调节酸碱度，准确量取Alcalase蛋白酶加入水解反应器中，反应过程中及时滴加0.5mol/L的NaOH和0.5mol/L的HCl，使pH值稳定，并使温度始终保持不变，水解后，即用0.5mol/L的HCl调节pH值至4....

【专利技术属性】
技术研发人员：廖建春，孔昀，李嘉祺，
申请(专利权)人：浙江健智元生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33