一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法技术

本发明专利技术属于分析化学技术领域，具体涉及一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法。通过在极酸性介质中，使复杂样品中的极性物质发生电离，并在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。本发明专利技术操作过程简单快捷，为复杂样品中极性物质的分离分析提供了新的方法。

An electrokinetic extraction method for polar substances based on capillary electrophoresis

The invention belongs to the technical field of analytical chemistry, and in particular relates to an electrokinetic extraction method for polar substances based on capillary electrophoresis. The polar substances in complex samples are ionized in extremely acidic media and driven into the PEEK capillary by an external electric field, and then separated and extracted. The operation process of the invention is simple and fast, and provides a new method for separating and analyzing polar substances in complex samples.

【技术实现步骤摘要】
一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法
本专利技术属于分析化学
，具体涉及一种基于毛细管电泳的极性物质提取方法。
技术介绍
毛细管区带电泳（capillaryzoneelectrophoresis,CZE）是依靠带电离子的电荷密度（有效电荷与离子大小的比率）对其进行分离的。自由流电泳（FreeFlowElectrophoresis,FFE）是一种无固体支持介质的制备型区带电泳模式。FFE是利用带电离子电泳淌度和等电点的不同对其进行分离，尤其适用于各类生物材料的分离和纯化。样品连续地注入由两片平板形成的分离腔后，随着单一或多种缓冲液形成的薄膜流经整个分离腔。在垂直于电解质和样品流动的方向上施加电压，可在溶液流动时施加电压，即连续自由流电泳；也可在溶液静止时施加电压，即间歇自由流电泳。外加的电压将使电泳淌度和等电点不同的各组分的运动方向发生不同角度的偏离，在分离室的末端从不同的出口流出。自由流电泳的特点在于可连续进样并能够大体积收集样品片段，可作为前处理与分离技术与其它色谱技术联用，或直接与检测仪器联用。文献曾报道，用FFE与超高分辨的ESIICR-FT/MS离线联用对SuwanneeRiver黄腐酸样品进行分离鉴定。毛细管等速电泳（CapillaryIsotachophoresis,cITP）也是利用分析物的有效淌度的不同进行分离的电泳技术。与CZE不同的是，cITP中使用两种电解质，而样品处于两种电解质之间：前导电解质（leadingelectrolyte）采用有效淌度比分析物的有效淌度大的缓冲液；尾随电解质（terminatingelectrolyte）采用有效淌度比分析物的有效淌度小的缓冲液。在外加电压的作用下，样品中速度最大的离子移动最快，但总落后于前导电解质；速度最小的离子移动最慢，但总领先于尾随电解质，因此样品离子便被压缩在前导电解质和尾随电解质之间进行分离，本专利技术结合CZE、FFE与cITP的分离特点，建立一种新型毛细管电泳方法，用于提取复杂样品中的极性物质。在极酸性（pH=1.8）的介质中，只有能够电离的极性物质能够在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。
技术实现思路
本专利技术目的在于建立一种新型毛细管电泳方法，用于提取复杂样品中的极性物质。该方法中，在极酸性（pH=1.8）的介质中，使复杂样品中的极性物质发生电离，并在外加电场的驱动下进入PEEK毛细管内，从而被分离提取。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种基于毛细管电泳的极性物质提取方法，其具体步骤为：1)运行液的配置：配置电动提取所需的运行液（pH1.8）；2)毛细管的预处理：PEEK毛细管长度为60cm，所有提取过程中，PEEK毛细管保持25℃的工作温度，未使用过的毛细管需使用前需用去离子水和甲醇分别冲洗，每次提取前后，也需用去离子水和甲醇分别冲洗；3)极性物质的提取：先采用压力进样的方式，使毛细管充满运行液，再采用电动进样的方式，对极性物质进行提取，最后用压力将毛细管内的样品推进采集瓶；4）极性物质的检测：将毛细管中的样品直接推入质谱检测器，对其进行检测。具体的：步骤1)所述运行液的配置具体为含极性物质的溶液。步骤2)所述毛细管的预处理的配置具体操作为，未使用过的PEEK毛细管使用前用去离子水和甲醇分别冲洗10min，重复五次，以确保毛细管内壁的清洁。每次提取前及提取结束，依次以去离子水及甲醇冲洗毛细管10min，重复2次。每提取5次，依次以去离子水及甲醇冲洗毛细管5min，重复2次。步骤3)所述极性物质的提取具体操作为，先采用30mpa压力进样1min，使毛细管充满运行液，再采用-10kV的电压电动进样10min，对极性物质进行提取。步骤4）所述极性物质的检测具体操作为，采用100mpa压力最后用30mpa压力将毛细管内的样品全部推进质谱检测器。本专利技术的显著优点在于：本方法操作过程简单快捷，为复杂样品中极性物质的分离分析提供了新的方法。附图说明图1不同极性化合物混合溶液经毛细管电动提取后的信号对比图（pH=1.8）。具体实施方式为了使本专利技术所述的内容更加便于理解，下面结合具体实施方式对本专利技术所述的技术方案做进一步的说明，但是本专利技术不仅限于此。实施例1：不同极性化合物混合溶液的毛细管电动提取和检测。以香兰素、苯甲酸、对苯二酸、1，2，3-苯三甲酸（极性：香兰素<苯甲酸<对苯二酸<1，2，3-苯三甲酸）为例，称取香兰素、苯甲酸、对苯二酸、1，2，3-苯三甲酸各1.0mg，分别溶于1.0mL水、1.0mL乙醇、1.0mL二甲基亚砜和1.0mL水中，分别配置成香兰素（1.0mg/mL）标准溶液、苯甲酸（1.0mg/mL）标准溶液、对苯二酸（1.0mg/mL）标准溶液、1，2，3-苯三甲酸（1.0mg/mL）标准溶液。取香兰素（1.0mg/mL）标准溶液、苯甲酸（1.0mg/mL）标准溶液、对苯二酸（1.0mg/mL）标准溶液、1，2，3-苯三甲酸（1.0mg/mL）标准溶液各200µL，加入200µL水，得香兰素（0.2mg/mL）、苯甲酸（0.2mg/mL）、对苯二酸（0.2mg/mL）、1，2，3-苯三甲酸（0.2mg/mL）的混合标准溶液。按本专利技术方法对4种化合物的混合标准溶液进行毛细管电动提取后，进入质谱检测器进行定量检测。图1中比较可以看出，在极端酸性的条件下，本专利技术方法对不同极性物质的提取的量为：香兰素<苯甲酸<对苯二酸<1，2，3-苯三甲酸，与极性成正比，其中，极性最小的香兰素几乎没有被提取。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法，其特征在于：其具体步骤为：1) 运行液的配置：配置电动提取所需的运行液；2) 毛细管的预处理：PEEK毛细管长度为60 cm，所有提取过程中，PEEK毛细管保持25 ℃的工作温度，未使用过的毛细管需使用前需用去离子水和甲醇分别冲洗，每次提取前后，也需用去离子水和甲醇分别冲洗；3) 极性物质的提取：先采用压力进样的方式，使毛细管充满运行液，再采用电动进样的方式，对极性物质进行提取，最后用压力将毛细管内的样品推进采集瓶；4） 极性物质的检测：采用压力将毛细管中的样品直接泵入质谱检测器，对其进行检测。

【技术特征摘要】
1.一种基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法，其特征在于：其具体步骤为：1)运行液的配置：配置电动提取所需的运行液；2)毛细管的预处理：PEEK毛细管长度为60cm，所有提取过程中，PEEK毛细管保持25℃的工作温度，未使用过的毛细管需使用前需用去离子水和甲醇分别冲洗，每次提取前后，也需用去离子水和甲醇分别冲洗；3)极性物质的提取：先采用压力进样的方式，使毛细管充满运行液，再采用电动进样的方式，对极性物质进行提取，最后用压力将毛细管内的样品推进采集瓶；4）极性物质的检测：采用压力将毛细管中的样品直接泵入质谱检测器，对其进行检测。2.根据权利要求1所述基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法，其特征在于：步骤1)所述运行液具体为含极性物质的溶液。3.根据权利要求1所述基于毛细管电泳的极性物质电动提取方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：何聿，郭文静，张勤，
申请(专利权)人：福州大学，
类型：发明
国别省市：福建,35