一种核酸一体化多重检测盒体及检测方法技术

本发明专利技术涉及一种核酸一体化多重检测盒体，包括盒体外壳和外壳内的两层板。两层板在外壳中上下叠放，上层板与下层板之间可以进行相对滑动。下层板先与上层板连通流道的四个半球形凹槽腔室连通，形成四个球形腔室，并使得上下层板的内嵌腔室连通。液体可以从下层板流入上层板。随着上层板的滑动，下层板可与上层板的四个相对独立的半球形凹槽腔室连通，形成四个球形腔室。下层板中提取好的核酸液体流入四个球形腔室中，与腔室中预封装的等温扩增检测试剂干粉混合，外界进行温度控制和荧光检测，即可实现核酸一体化多重检测。本发明专利技术在封闭的环境中完成一体化核酸检测，可有效避免样本间交叉污染，整个装置操作简单便携，满足现场检测的需求。

Nucleic acid integrated multiple detection box and detection method

The invention relates to an integrated nucleic acid multiple detection box, which comprises a box body outer shell and two layers of boards inside the shell. The two laminate is stacked up and down in the casing, and the upper plate and the lower plate can be relatively slid. The lower plate is communicated with the four hemispherical groove chambers connected with the upper channel to form four spherical chambers, and the inner chambers of the upper and lower laminates are communicated. The liquid can flow into the upper plate from the lower plate. With the sliding of the upper plate, the lower plate can be connected to four relatively independent hemispherical cavity chambers of the upper plate, forming four spherical chambers. A good nucleic acid liquid is extracted from the lower plate into four spherical chambers, which is mixed with the pre encapsulated isothermal amplification test reagent in the chamber. The integrated multiple detection of nucleic acid can be realized by temperature control and fluorescence detection outside. The invention can complete the integrated nucleic acid detection in a closed environment, which can effectively avoid cross contamination between samples. The whole device is simple and portable, and meets the needs of field detection.

【技术实现步骤摘要】
一种核酸一体化多重检测盒体及检测方法
本专利技术涉及一种分子生物学领域的核酸检测芯片，特别涉及一种核酸一体化多种检测盒体及检测方法，属于生物医学工程和分子诊断领域。
技术介绍
当前生物医学工程研究正从整体和细胞水平深入到分子水平。核酸是细胞内一类重要的生物分子，参与调控细胞的大部分功能，了解核酸在不同细胞的含量与分布对深入研究其功能及背后的生物学意义至关重要，对恶性肿瘤、艾滋病、遗传性疾病以及各种传染病的检测诊断和治疗均具有重要意义。现有的核酸检测主要采用PCR技术，PCR的方法灵敏度高、特异性好，是目前最常用的基因诊断方法。但是PCR方法操作起来较复杂，并且实验时间久，对人员和仪器要求比较高，不适合在基层或现场进行快速诊断。等温扩增技术是目前比较受青睐的一种扩增技术，其反应过程始终维持在恒定的温度下，通过添加不同活性的酶和各自特异性引物来达到快速扩增的目的。具有操作简便，反应时间短，灵敏度高等优点，适合快速诊断领域。但是同时等温扩增高效的扩增效率易引起下游检测时扩增产物的污染，若能检测的时候将上游的样本处理即核酸提取、扩增以及下游的检测封闭在一个盒体中一体化进行，则可有效避免检测的污染。同时为了适应基层或现场快速检测的需求，需要检测的装置小型化，便携式。为了解决上述问题，本专利技术提出一种核酸一体化多重检测盒体及检测方法。
技术实现思路
本专利技术目的是针对现有基层或现场快速检测需求，提供一种核酸一体化多重检测盒体及检测方法，该装置和方法可实现核酸的快速一体化多重检测，并且体积小巧，方便携带，能有效防止检测过程中的污染和样品间的交叉污染。为了实现本专利技术的目的和优点，本专利技术通过以下技术方案实现：一种核酸一体化多重检测盒体，盒体包括一个外壳，以及和外壳内的两层流道板。两层流道板上下叠放，可放入外壳中。所述外壳为方形，外壳一个侧面敞开，另一侧面开有一小孔，其他各面均封闭。所述两层流道板通过敞开的侧面推入外壳中，形成完整的盒体。所述两层流道板分成上层板和下层板，两层板内各刻有多条液体流道和腔室。优选地，所述上层板设九个腔室，其中八个是半球形凹槽腔室，另外一个是在上层板内嵌的腔室；所述八个半球形凹槽腔室，其中有四个是与流道连通，同时与所述的上层板内嵌腔室一端连通；另外四个半球形凹槽腔室均不与流道连通，各自相对独立。所述上层板内嵌的腔室另一端连通一小段气压平衡流道，流道出口与外壳一侧面小孔相通。优选地，所述下层板设有五个腔室，其中四个是半球形凹槽腔室，另外一个是在下层板内嵌的腔室；所述四个半球形凹槽腔室均与流道连通，同时与所述的下层板内嵌腔室一端通过流道连通；所述下层板内嵌腔室另一端与进样流道一端连通，所述进样流道另一端连通外界的进样装置。所述的上层板的半球形凹槽腔室位置和所述下层板的半球形凹槽腔室位置相互对应；所述的上层板的半球形凹槽腔室槽口向下，所述下层板的半球形凹槽腔室槽口向上，两层板的腔室槽口径大小相同，一一对应可形成完全的球形腔室。所述的上层板与所述下层板之间可以进行相对滑动。下层板先与上层板连通流道的四个半球形凹槽腔室连通，形成四个球形腔室，并使得上下层板的内嵌腔室连通。随着上层板的滑动，下层板可与上层板的四个相对独立的半球形凹槽腔室连通，形成四个球形腔室。所述的上层板的四个相对独立的半球形凹槽腔室内预装有用于核酸等温扩增检测的试剂固体干粉，可以是同一样本的不同疾病检测试剂或同一靶向基因不同位点的检测试剂，以此达到多重检测的目的。进一步地，本专利技术针对上述核酸一体化多重检测盒体还提供了以下使用方法，通过以下过程实现。过程一、外界的进样系统先通过下层板的进样流道通入矿物油至下层板的内嵌腔室，再通过压力系统将腔室中的矿物油驱动至连通的流道中，并排尽下层板内嵌腔室中的矿物油，排至上层板的内嵌腔室中；过程二、将待测样本和提取液通过进样系统通入下层板的内嵌腔室，外界对内嵌腔室进行加热温度控制，将反应温度控制在100℃，反应10分钟，实现核酸的高温一步法提取。过程三、滑动上层板，使下层板与上层板的四个相对独立的半球形凹槽腔室连通，形成四个球形腔室。将过程二中反应后的液体驱动至四个球形腔室中，并充满腔室，溶解预封装在上层板半球形凹槽腔室内的核酸等温扩增检测的试剂固体干粉，外界辅助混匀试剂。过程四、进样系统再次通入矿物油至下层板的内嵌腔室，并驱动至下层板的流道中。过程五、对上层板的四个相对独立的半球形凹槽腔室进行加热温度控制，将反应温度控制在65℃，反应30分钟。反应过程中应荧光检测装置进行反应物的实时检测。反应结束后通过观察荧光检测装置显示的各个腔室的荧光曲线，判断多重检测的结果。本专利技术的有益效果：本专利技术将高温一步法核酸提取，等温扩增，实时荧光检测相结合，极大地缩短了传统核酸检测的时间，并且对设备的成本要求大大降低；本专利技术将整个的核酸检测过程集成一体化在封闭的环境中完成，有效避免了外界的污染和核酸的交叉污染；本专利技术采用盒体层式结构，加工难度较小，操作简单便携，十分满足现场检测的需求。附图说明图1本专利技术结构外形示意图。图2本专利技术结构透视示意图。图3本专利技术上层板结构示意图。图4本专利技术下层板结构示意图。图5本专利技术上下层板初始相对位置俯视图(A)和侧视图(B)。图6本专利技术中下层板核酸扩增检测过程相对位置俯视图(A)和侧视图(B)。其中：1-盒体，2-外壳，3-上层板，4-下层板，301-上层流道，302-上层板内嵌的腔室，303-上层流道连通凹槽腔室，304-独立腔室，305-平衡流道，401-下层流道，402-下层板内嵌的腔室，403-下层流道连通凹槽腔室，404-进样流道。具体实施方式下面结合实施例和附图1-6对本专利技术做更进一步地解释，以令本领域技术人员参照说明书文字能根据以实施。下列实施例仅用于说明本专利技术，但并不用来限定本专利技术的实施范围。一种核酸一体化多重检测盒体及检测方法，如图1和2所示，盒体1包括一个外壳2，以及外壳2内的两层流道板(上层板3和下层板4)。两层流道板上下叠放，可放入外壳中。所述外壳2为方形，其一个侧面敞开，另一侧面开有一小孔，其他各面均封闭。所述两层流道板通过敞开的侧面可推入外壳中，形成完整的盒体1。所述上层板3和下层板4内各刻有多条液体流道和多个腔室。如图3所示是所述上层板3的结构示意图，有九个腔室及若干上层流道301。其中一个是在上层板内嵌的腔室302，另外八个是半球形凹槽腔室。八个半球形凹槽腔室的其中四个连通流道和上层板内嵌的腔室302，称作上层流道连通凹槽腔室303，另外四个均不与流道连通，各自相对独立，称作独立腔室304。所述上层板内嵌的腔室302另一端连通一段气压平衡流道305。如图4所示是所述下层板4的结构示意图，有五个腔室及若干下层流道401。其中一个是在下层板内嵌的腔室402，另外四个是半球形凹槽腔室，均连通流道和下层板内嵌的腔室402，称作下层流道连通凹槽腔室403。所述下层板内嵌的腔室402另一端连通一段进样流道404。所述的上层板3和下层板4之间可以进行相对滑动，上层板3的流道连通凹槽腔室303和独立腔室304的槽口向下，下层板4的流道连通凹槽腔室403槽口向上，两层板的腔室槽口口径大小相同，一一对应可形成完全的球形腔室。针对上述核酸一体化多重检测盒体，案例中采用以下使用方法本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，包括：一个外壳，以及外壳内的两层板，两层板在外壳中上下叠放；所述两层板中的上层板设有九个腔室，其中八个是半球形凹槽腔室，另外一个是在上层板内嵌的腔室；所述八个半球形凹槽腔室，其中有四个是与流道连通，同时与所述的上层板内嵌腔室通过流道连通；另外四个半球形凹槽腔室均不与流道连通，各自相对独立；所述两层板中的下层板设有五个腔室，其中四个是半球形凹槽腔室，另外一个是在下层板内嵌的腔室；所述四个半球形凹槽腔室均与流道连通，同时与所述的下层板内嵌腔室一端通过流道连通，所述的下层板内嵌腔室另一端与下层板内进样流道一端连通。

【技术特征摘要】
1.一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，包括：一个外壳，以及外壳内的两层板，两层板在外壳中上下叠放；所述两层板中的上层板设有九个腔室，其中八个是半球形凹槽腔室，另外一个是在上层板内嵌的腔室；所述八个半球形凹槽腔室，其中有四个是与流道连通，同时与所述的上层板内嵌腔室通过流道连通；另外四个半球形凹槽腔室均不与流道连通，各自相对独立；所述两层板中的下层板设有五个腔室，其中四个是半球形凹槽腔室，另外一个是在下层板内嵌的腔室；所述四个半球形凹槽腔室均与流道连通，同时与所述的下层板内嵌腔室一端通过流道连通，所述的下层板内嵌腔室另一端与下层板内进样流道一端连通。2.根据权利要求1所述的一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，所述的上层板的半球形凹槽腔室位置和所述下层板的半球形凹槽腔室位置相互对应。3.根据权利要求1所述的一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，所述的上层板的半球形凹槽腔室槽口向下，所述下层板的半球形凹槽腔室槽口向上，两层板的腔室槽口径大小相同，一一对应可形成完全的球形腔室。4.根据权利要求1所述的一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，所述的上层板与所述下层板之间可以进行相对滑动。5.根据权利要求1所述的一种核酸一体化多重检测盒体，其特征在于，所述外壳为方形，外壳一个侧面敞开，另一侧面开有一小孔，其他各面均封闭。所述两层流道板通过敞开的侧面推入外壳中，形成完整的盒体。6.根据权利要求1所述的一种核酸一...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐勇军，代建国，
申请(专利权)人：深圳职业技术学院，
类型：发明
国别省市：广东,44