【技术实现步骤摘要】
一种优选胱抑素C检测试剂盒及其制备方法
本专利技术属于生物医药
,具体涉及一种优选胱抑素C检测试剂盒及其制备方法。
技术介绍
肾脏疾病是临床上一种常见的疾病,迄今为止,早诊断、早治疗以及逆转损伤的肾功能是唯一能阻止肾脏疾病恶化的途径。临床评价肾脏疾病进展和严重程度一般以肾功能为参考,以肾小球滤过率(GFR)作为反映肾功能最重要的指标。胱抑素C,是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂,也被称为γ-微量蛋白或γ-后球蛋白,且是一种低分子量、碱性非糖化蛋白质,其分子量为13.3KD,由122个氨基酸残基组成,可由机体所有有核细胞产生,产生率恒定。循环中的胱抑素C仅经肾小球滤过而被清除,为反映肾小球滤过率变化的内源性标志物,并在近曲小管重吸收,但重吸收后被完全代谢分解,不返回血液。因此,可以通过血液中胱抑素C的浓度来反映肾小球的过滤速率。而且,胱抑素C血清浓度不受敏症过程、性别、年龄和肌肉重量影响,是反映肾小球滤过率变化的理想同源性标志物,并逐步发展为评估肾功能的一项敏感性好、特异性高的指标。目前,临床上主要依托免疫学方法完成胱抑素C的检测,借助抗原抗体的特异性结合,以双抗夹心的方式定量检测血清中胱抑素C的含量。具体的检测方法又包括:酶联免疫吸附测定法、化学发光法和免疫比浊法。前面两种方法由于操作繁琐、耗时长以及费用高等不足,严重限制其应用。随着全自动生化仪的普及和多种快速免疫比浊检测技术的发展,免疫比浊法兼具反应时间短,精密度好,检测范围宽,黄疸、溶血和脂血标本影响小,易于自动化等优势,已成为临床胱抑素C的主流检测方法。但是,由于免疫比浊法的检测原理缺乏酶促放大反应, ...
【技术保护点】
一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:包括彼此独立的试剂R1和试剂R2,所述试剂R1主要由缓冲液1、无机盐离子1、稳定剂1、防腐剂1、增溶剂1和加速剂1组成;所述试剂R2主要由交联胱抑素C抗体的聚苯乙烯微球、缓冲液2、稳定剂2、增溶剂2、防腐剂2和保护剂2组成,其中保护剂2为β‑环糊精;所述聚苯乙烯微球与胱抑素C抗体通过物理吸附连接或者聚苯乙烯微球表面氨基、羧基、酰肼或者环氧基与胱抑素C抗体表面氨基共价偶联,并被β‑环糊精包合,聚苯乙烯微球粒径为100nm。
【技术特征摘要】
1.一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:包括彼此独立的试剂R1和试剂R2,所述试剂R1主要由缓冲液1、无机盐离子1、稳定剂1、防腐剂1、增溶剂1和加速剂1组成;所述试剂R2主要由交联胱抑素C抗体的聚苯乙烯微球、缓冲液2、稳定剂2、增溶剂2、防腐剂2和保护剂2组成,其中保护剂2为β-环糊精;所述聚苯乙烯微球与胱抑素C抗体通过物理吸附连接或者聚苯乙烯微球表面氨基、羧基、酰肼或者环氧基与胱抑素C抗体表面氨基共价偶联,并被β-环糊精包合,聚苯乙烯微球粒径为100nm。2.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于,组成如下:试剂R1,其组分为:试剂R2,其组分为:3.根据权利要求2所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于,具体组成如下:试剂R1,其组分为:试剂R2,其组分为:4.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中的缓冲液1为Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液、磷酸盐缓冲液、硼砂缓冲液中的任意一种或多种的组合,其pH为7.0~9.0;所述试剂R2中的缓冲液2为磷酸盐缓冲液、硼砂缓冲液、Hepes缓冲液、Tris-HCl缓冲液、MOPS缓冲液中任意一种或多种的组合,其pH为7.0~9.0。5.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中的稳定剂1为牛血清白蛋白、甘露糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二钠、果糖中的一种或多种的组合;所述试剂R2中的稳定剂2为牛血清白蛋白、甘露糖、山梨醇、乙二胺四乙酸二钠、果糖中的一种或多种的组合。6.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中的防腐剂1为叠氮钠、硫柳汞或者ProClin300;所述试剂R2中的防腐剂2为叠氮钠、硫柳汞或ProClin300。7.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中的无机盐离子1为KCl、NaCl、CaCl2、中的任意一种或多种的组合;所述试剂R1中的加速剂1为聚乙二醇-2000、聚乙二醇-6000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一种或多种的组合;所述试剂R1和试剂R2中的增溶剂1均为吐温20。8.根据权利要求1所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒,其特征在于:还包括胱抑素C试剂的校准品,校准品为胱抑素C含量为0.1mg/L,0.5mg/L,1.0mg/L,2.0mg/L,4.0mg/L和8.0mg/L的六个梯度标准品,溶液为牛血清白蛋白10g/L、吐温200.3mmol/L、叠氮钠10mmol/L、磷酸盐缓冲液10mmol/L的缓冲液。9.如权利要求2所述的一种优选胱抑素C检测试剂盒的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)、试剂R1的制备:配制缓冲液1:磷酸盐缓冲液5~15mmol/L;在缓冲液1中加入牛血清白蛋白5~15g/L、吐温200.1~0.3mmol/L、聚乙二醇2.0~...
【专利技术属性】
技术研发人员:张海悦,孙景春,闫小娟,魏滢,王姝,韩永双,韩峰,刘玉娟,
申请(专利权)人:吉林省富生医疗器械有限公司,
类型:发明
国别省市:吉林,22
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