The invention discloses a method for restoring growth and preservation in vitro preservation after a Oncidium germplasm resources, from the growth of Oncidium new pseudobulbs stripping shoot tip, the protocorm induction medium surface cultured protocorm, the protocorm of repeated cutting and subculture, so as to produce required the number of protocorm, then the preservation in vitro culture medium for protocorm growth, entered the stage, at 0 to 5 DEG C under the condition of dark culture; dark culture of protocorm transferred to differentiation medium, produce seedlings from protocorm differentiation. The invention uses Oncidium meristem culture, induced protocorm, then won the Wen Xinlan seedlings by protocorm differentiation. Cryopreservation of protocorm, combined with the addition of Paclobutrazol, can greatly prolong the storage time, reduce the subculture times, and effectively maintain the genetic characteristics of germplasm resources. After a certain period of time, under normal temperature and light conditions, it can recover rapidly and differentiate into seedlings.
【技术实现步骤摘要】
一种文心兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法
本专利技术涉及一种文心兰种质资源离体保存及保存后恢复生长的方法。属于植物组织培养
技术介绍
文心兰,中国的传统名花,种质资源丰富,分布广泛,并具有较高的观赏价值。其繁殖方法一般为分株繁殖,3~4年才能进行一次,繁殖速度较慢。文心兰种子非常细小、呈粉状,没有胚乳,只有一个简单的胚,外面包着疏松、透明、不易透水的种皮,胚内含有很少的营养物质,绝大部分为脂类物质,自然条件下文心兰种子很难萌发。因此,传统的种子保存技术不适用文心兰种质资源保存。文心兰多数栽培品种均是由野生种驯化或自然变异筛选而来。从资源上来说,由于对野生国兰资源的大量采挖,天然资源已遭到了大量破坏,可采集的野生资源越来越少,再加上自身繁殖速度极其缓慢,我国野生文心兰资源日趋紧缺,有些珍稀品种已濒临灭绝,因此,建立科学、有效、实用的文心兰种质资源保存技术迫在敏捷。通过有计划的培育、繁殖、发展、保存濒危的特有种类,才能避免该物种灭绝。组织培养作为植物种质资源离体保存技术已被广泛使用,在种质资源交换过程中,利用试管苗进行交换不仅运输成本低,还可避免在交换过程中病虫害的传播,也可以解决大田保存占地面积大、费用高等问题。频繁的离体继代培养保存技术,在每一次继代培养过程中都有可能造成交叉污染,多次的继代培养还会引发遗传变异,同时,随着继代培养数量的增加要耗费大量的人力物力。
技术实现思路
本专利技术的目的是为克服上述现有技术的不足,提供一种文心兰种质资源离体保存方法。本专利技术还提供了所述离体保存方法保存后恢复生长的方法。为实现上述目的,本专利技术采用下 ...
【技术保护点】
一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,从文心兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖,将其置于VW培养基辅以0.5~1mg/L 6‑苄基腺嘌呤的原球茎诱导培养基表面培养成原球茎,将原球茎进行反复切割和继代培养,所采用的继代培养基为VW培养基辅以0.2~0.4mg/L 6‑苄基腺嘌呤,从而繁殖出所需数量的原球茎,然后采用VW培养基辅以2.5mg/L多效唑的离体保存培养基进行培养,待原球茎进入发育生长阶段后,在0~5℃条件下暗培养。
【技术特征摘要】
1.一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,从文心兰新生长的假鳞茎上剥取茎尖,将其置于VW培养基辅以0.5~1mg/L6-苄基腺嘌呤的原球茎诱导培养基表面培养成原球茎,将原球茎进行反复切割和继代培养,所采用的继代培养基为VW培养基辅以0.2~0.4mg/L6-苄基腺嘌呤,从而繁殖出所需数量的原球茎,然后采用VW培养基辅以2.5mg/L多效唑的离体保存培养基进行培养,待原球茎进入发育生长阶段后,在0~5℃条件下暗培养。2.根据权利要求1所述的一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,所述茎尖的剥取方法如下:选择长度为5~7cm的假鳞茎,用自来水清洗表面尘土,剥去最外层的1~2个叶片,用体积浓度75%的酒精擦洗3~4秒,放入质量浓度0.1%的升汞溶液中灭菌20分钟,无菌水冲洗3~4次,晾干或用滤纸吸干表面水分,在显微镜下剥取大小约为0.5mm的茎尖。3.根据权利要求1所述的一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,将茎尖置于试管或培养瓶中原球茎诱导培养基的表面,轻压茎尖以接触到原球茎诱导培养基的表面为宜,避免埋入,进而引起窒息死亡,及时密封并做好标记。4.根据权利要求1所述的一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,原球茎的培养方法是:将茎尖在25℃,光照2000lux,每天光照10小时的条件下培养15天后,出现明显膨大,30天后出现若干个白色突起,45天后,所述突起体积增大形成原球茎。5.根据权利要求1所述的一种文心兰种质资源离体保存方法,其特征在于,反复切割和继...
【专利技术属性】
技术研发人员:丁汉凤,王存娥,贾文斌,辛富刚,颜廷进,
申请(专利权)人:山东省农作物种质资源中心,
类型:发明
国别省市:山东,37
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