层析柱组件制造技术

本发明专利技术涉及一种层析柱组件，其提供了用于执行层析分离的可承受的自装填的柱。层析柱组件包括具有在大致相对的端部处的第一开口和第二开口的柱管，以及具有卡扣配合设计或栓接设计的端盖。柱组件还包括接合器轴，其通过端盖插入柱中以用于实现期望的底座容积。柱组件还可包括包围第二开口的第二端盖，且可选的接合器轴可通过第二端盖插入柱中，允许底座容积的进一步调整。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使用液体层析法提纯细胞组分，诸如蛋白质和/或缩氨酸。更具体而言，本专利技术涉及一种层析柱及用于提纯一种或多种细胞组分的套件，以及其使用方法。
技术介绍
生物技术方法在蛋白质、缩氨酸、核酸和其它生物实体的研究中用于日益增加的范围。由于其通用性和对实体的灵敏度，故在此背景下，层析法通常是优选的提纯方法。层析法基于通过将混合物溶解在流动相(例如，如缓冲液的液体)中且使其穿过固定相(例如，可为珠/树脂的层析基质)来分离混合物的原理。更具体而言，包括目标实体(例如，化学/生物分子)的混合物引入移动相中，移动相然后与也称为层析基质的固定相接触。目标实体在其由移动相传送穿过固定基质时，然后将经历固定相与移动相之间的一系列相互作用。相互作用利用了混合物中的目标实体和其它组分的物理或化学性质的差异。层析方法可在不同操作模式中运行。最简单的模式是批层析法，其中移动相添加到包含固定相的容器中；在适合时段内允许目标实体与固定相之间的相互作用；取回移动相；以及添加洗脱剂来释放目标实体。另一方面，在柱层析法中，包含样本(混合物)的移动相加入包含固定相的柱的顶部。通过打开柱的下端处的出口，移动相穿过柱，在此期间，样本与固定相相互作用。通常通过在顶部应用少量洗脱剂且又允许洗脱剂由重力或使用层析法系统穿过柱来执行洗脱。—旦在固定相上获得目标实体的适合负载，则液流从移动相变到洗脱剂，可选地具有一种或多种中间洗液，且在柱的出口处从洗脱剂回收目标部分。洗脱剂通常包括梯度，诸如盐或pH梯度。为了避免较大污染物的污染且获得柱各处的有利液体分布，入口通常配备有过滤器和机械液体分送器器件。更常见的是，出口将类似地存在过滤器和一些机械液体分送器器件。执行蛋白质提纯的许多研究者使用基本层析法系统或通过人工方法。由于工作流的强制性，故这些使用者中的大多数采用自装填的空柱，对其自己的柱装填其选择的介质。许多销售者在此领域提供空柱。B1-Rad提供Econo品牌下的低压层析柱。这些是具有流接合器的玻璃柱，且经得起小于I巴的低操作压力。PalI Corporat1n提供LRC柱，其可经得起10到30巴的操作压力。其螺纹锁系统允许活塞的快速粗略调整，随后精细调整(这给予了各种底座高度的覆盖)。选择装填其自己的柱的使用者在低压柱节段中的有限压力规格、可承受性、易用性、具有接合器的端盖的复杂设计和柱的尺寸/规模的限制方面面临不断的挑战。存在对于更加用户友好且可经得起较高柱压力的良好的层析柱设计的需要。
技术实现思路
本文公开了新颖层析柱设计和使用此的方法。因此，本专利技术的第一方面在于提供结合新颖端盖设计的自装填的层析柱组件，其适用于生物分子(诸如蛋白质和/或缩氨酸)从初始生物材料的提纯。本专利技术的特定方面提供了一种用于柱组件的新颖端盖，其为卡扣配合端盖。此柱可采用达到2巴的背压。本专利技术的另一个特定方面提供了一种用于柱组件的新颖端盖，其为具有使用固持件或卡簧的栓接设计。此柱可采用达到5巴的背压。本专利技术的第二方面在于提供一种使用包括根据本专利技术的某些实施例的新颖端盖的自装填层析柱组件对生物分子层析分离的方法。本专利技术的第三方面提供了一种用于制作层析柱组件的套件，该套件包含根据本专利技术的某些实施例的新颖端盖构件。本专利技术的进一步的细节和优点将从以下描述和权利要求中呈现。【附图说明】图1示出了根据本专利技术的一个实施例的层析柱组件的一部分的示意图，示出了端盖、接合器轴、销止挡件，以及柱管的一部分。图2示出了根据本专利技术的一个实施例的层析柱组件的一部分的示意图，示出了端盖、固持件/弹性挡圈以及柱管的一部分的栓接设计。【具体实施方式】本专利技术涉及一种层析柱组件，其提供了用于执行层析分离的可承受的自我装填的柱，包括但不限于亲和力、离子交换、凝胶过滤、脱盐和使用层析系统或通过重力流的生物分子(诸如蛋白质)的缓冲交换。层析柱组件的模块化设计提供了某些优点，例如，易用性、自组装选择，以及耐高压加热性。在第一方面中，本专利技术涉及液体层析柱组件，其包括具有在大致相对的端部处的第一开口和第二开口的柱管，以及根据本专利技术的某些方面的包围第一开口的端盖。可选地，柱组件还包括接合器轴，其从第一开口插入柱中以用于实现期望的底座容积。柱组件还可包括包围第二开口的第二端盖。在某些实施例中，第二端盖为根据任何现有技术设计的端盖。在其它实施例中，第二端盖为根据本专利技术的某些实施例的端盖，且可选的接合器轴通过第二端盖插入柱中，允许底座容积的进一步调整。在一个实施例中，本专利技术提供了具有卡扣配合设计的端盖。卡扣配合端盖的使用允许层析柱组件经得起高于某些现有技术的端盖的柱压力。该柱可采用达到2巴的背压。卡扣配合设计还使柱组装过程容易完成，且因此很用户友好。在接合器轴存在时，该层析柱组件可结合任何层析系统使用；不考虑接合器轴的存在，新颖层析柱组件允许使用者执行重力流操作。在实施例的变型中，本专利技术提供了具有内螺纹的卡扣配合设计的端盖，以及具有互补螺纹的可动接合器轴。包括可动接合器(一个或两个的组合或没有)允许使用者产生不同的底座容积，且在层析系统上或通过重力流方法使用柱。在实施例的另一变型中，除具有内螺纹的卡扣配合设计的端盖(22)和具有互补螺纹的可动接合器轴(21)之外，包括了隐藏的销(S卩，止挡件)(24)，其在第一开口端(图1)附近穿过柱管(23)的边沿的一部分。隐藏的销防止接合器轴与端盖一起旋转(由于摩擦)，因此允许了底座高度的容易的调整。作为备选，O形环可用于在接合器轴与柱管之间引入摩擦(以防止接合器旋转)。端盖的卡扣配合设计使得柱组件极为用户友好，且可在达到2巴的背压下操作。该设计允许使用者利用一个或两个接合器的组合实现各种底座高度。其还允许使用者将该柱用于重力流应用，而不使用层析系统。在另一个实施例中，本专利技术提供了具有栓接设计的端盖(图2)。端盖(42)利用螺栓(44)栓接在第一开口端附近的柱(45)的边沿上，因此包围第一开口。具有内螺纹的端盖螺母(41)与具有互补螺纹的接合器轴(46)接合。可动接合器轴的使用(一个或两个的组合或没有)允许使用者调整底座容积。可选的销止挡件(43)可包括在端盖(42)上。止挡件防止接合器在端盖螺母旋转时旋转，因此允许底座高度的容易的调整。端盖螺母借助于弹性挡圈或任何类型的固持件装固到栓接端盖。端盖的栓接设计允许使用者与层析系统一起使用这些柱组件。这些柱组件可经得起达到5巴的背压。该设计允许使用者利用一个或两个接合器的组合实现各种底座高度。柱管可由对生物分子的常规提纯期间使用的大部分化学制品提供抵抗力的任何生物相容材料制成。因此，例如，层析管可由适合的塑料材料、钢或玻璃制成。在某些实施例中，柱管由丙烯酸或聚丙烯材料制成。作为优选，柱管为透明的。柱管还可包括常规元件，诸如过滤器、分配器件、管路、配件、袋等。柱管可具有不同高度和内径，以便端盖、接合器和相关构件制作成具有匹配尺寸。在某些实施例中，层析柱组件提供从I到170mL的柱底座容积。作为优选，具有卡扣配合端盖的层析柱组件具有从I到70mL的柱底座容积。还作为优选，具有栓接端盖的层析柱组件具有从2到130mL的柱底座容积。在某些实施例中，柱管的内径在5到50mm之间，而柱管的长度在50到100mm之间。在某些优选实施例中本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种液体层析柱组件，包括：柱管，其具有在大致相对的端部处的第一开口和第二开口；以及包围所述第一开口的卡扣配合端盖。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：V拉奥，M拉马克里什纳，N坎布勒，
申请(专利权)人：通用电气健康护理生物科学股份公司，
类型：发明
国别省市：瑞典;SE