一种pH敏感型载药粒子及其制备方法和应用技术

本发明专利技术涉及一种pH敏感型载药粒子及其制备方法和应用，所述载药粒子是通过如下方法制备得到的：将喜树碱或喜树碱衍生物溶于碱性水溶液中，加入低抗凝血性肝素修饰物，超声处理，得混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，即得所述载药粒子。在偏酸性条件下，如pH值1.5-6.0条件下，载药粒子呈凝胶状态，凝胶粒径达1μm-3μm，此种凝胶在人体酸性组织条件下可降解，释放出喜树碱或喜树碱衍生物，发挥抗肿瘤作用。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，尤其涉及。
技术介绍
临床上许多难溶性药物具有显著的药理活性，但是由于水溶性差，进入人体生物利用度低，同时产生很高的毒副作用。纳米级载药微乳液能改变药物在人体的吸收、分布，控制药物的释放速度，成为当今理想的药物输送载体。而作为载体的乳化剂多选择人体内源性化合物，比如:卵磷脂、胆酸；或者人工合成的可生物降解的高分子乳化剂。肝素属于硫酸化糖胺聚糖，可以被广泛的疏水化修饰，这种多糖乳化剂可以作为难溶性药物的载体。而低抗凝血性肝素修饰物具有抗肿瘤细胞侵袭转移的活性，单独利用这种低抗凝血性肝素修饰物制备载药微乳液，既可以靶向给药，又可以起到联合给药的作用，这种载药微粒子，还未见有资料记载。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的是提供一种pH敏感型载药粒子的制备方法，所述制备方法包括如下步骤:(1)制备低抗凝血性肝素修饰物；(2)制备载药粒子:将喜树碱或喜树碱衍生物与低抗凝血性肝素修饰物在碱性条件下进行超声处理，得混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，冷冻干燥，即得所述载药粒子。为了达到良好的载药效果，优选地，所述喜树碱或喜树碱衍生物与所述低抗凝血性肝素修饰物的重量比为1:1-1:20，进一步优选为1:1-1:10。优选地，步骤(3)的具体操作为:按照喜树碱或喜树碱衍生物与低抗凝血性肝素修饰物的重量比为1:1-1:20计，先将喜树碱或喜树碱衍生物溶于pH值为9?10的碱液中，然后加入低抗凝血性肝素修饰物，超声处理，得混合溶液，将所述混合溶液微孔过滤，并冷冻干燥即得所述载药粒子。喜树碱或其衍生物在碱性水溶液中，其内酯环开环，与碱成盐，易溶于水，并在氢键或疏水性效应作用下，载于疏水化修饰的肝素修饰物上，在一定温度和超声条件下，在碱性水溶液中形成稳定载药粒子。而在酸性介质中，喜树碱类药物内酯环关环，与肝素表面脱离，肝素钠盐被酸化，肝素表面阴离子相互排斥，使得肝素链段之间变得松散，粒径涨大。优选地，所述超声处理采用频率为20?60KHz的超声波，超声处理直至溶液成纳米粒子状态。优选地，所述微孔过滤采用0.1-0.3 μ m的微孔过滤滤膜。 优选地，冷冻干燥在温度-40-0°C，真空条件下进行。进一步优选地，将所述载药粒子在-20°C条件下冷冻干燥处理直至水被全部蒸干为止。本专利技术涉及到的低抗凝血性肝素修饰物是通过如下方法制备得到的:首先将肝素经高碘酸钠氧化、硼氢化钠还原得到低抗凝血性肝素，然后以低抗凝血性肝素为原料，用乙酐和二环己基碳二亚胺对其进行修饰，即得。优选地，所述低抗凝血性肝素修饰物是通过如下方法制备得到的:将低抗凝血性肝素过树脂柱提纯，并向过柱得到的产品中加入碱，得到肝素盐；将所述肝素盐溶于有机溶剂中，加入乙酐和二环己基碳二亚胺，反应即得；优选地，所述有机溶剂为二甲基甲酰胺；所述碱为三丁胺。为了达到最佳的载药效果，本专利技术中所使用的低抗凝血性肝素修饰物的分子量范围为 2000-28KDa。优选地，所述喜树碱衍生物为10-羟基喜树碱、9-硝基喜树碱、7-乙基-10-羟基喜树碱、拓扑替康、伊立替康中的一种或几种。本专利技术提供了一种较佳的pH敏感型纳米粒子的制备方法，所述制备方法包括如下步骤:(1)制备低抗凝血性肝素:将肝素或肝素钠溶于水中，加入高碘酸钠，并调节pH值为3-5，在2_7°C条件下反应；反应完全后向反应液中加入碱液，并于暗处继续反应；反应完全后，向反应液中加入硼氢化钠，继续反应；反应完全后，调节反应液的pH值为中性，然后加入溶剂，沉淀出低抗凝血性肝素，即得；优选地，所述溶剂为醇类溶剂，进一步优选为乙醇；(2)制备低抗凝血性肝素修饰物:将低抗凝血性肝素过树脂柱，并向过柱得到的产品中加入碱，得到肝素盐；将所述肝素盐溶于有机溶剂中，加入乙酐和二环己基碳二亚胺，反应即得；(3)制备载药粒子:按照喜树碱或喜树碱衍生物与低抗凝血性肝素修饰物的重量比为1:1-1:10计，先将喜树碱或喜树碱衍生物溶于pH值为9?10的碱液中，然后加入低抗凝血性肝素修饰物，在10-80°C条件下使用20?60KHz的超声波超声处理直至形成纳米粒子，得混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，并冷冻干燥即得所述载药粒子。本专利技术的第二个目的是提供上述任意一种方法制备得到的载药粒子。采用此种方法制备得到的载药粒子为微乳液态，其粒子形态为圆形，呈多分散状态，粒径60-200nm不等。此种载药粒子在偏碱性条件下，如pH值7.4-9.0条件下，呈多分散微粒子；在偏酸性条件下，如pH值1.5-6.0条件下，载药粒子呈凝胶状态，凝胶粒径达1 μπι-3 μπι，喜树碱内酯环关闭，位于凝胶内，而作为载体的低抗凝血性肝素修饰物，由于在酸性条件下，链上阴电荷相排斥，使得载体松散、吸水，凝胶粒径增大。此种凝胶在人体酸性组织条件下可降解，释放出喜树碱或喜树碱衍生物，发挥抗肿瘤作用。采用上述制备方法得到的产品剂型为冻干粉，冻干粉在临床用药更加便捷。例如，使用葡萄糖水溶液或生理盐水溶解所述冻干粉后，注射给药用于抗体内酸性组织部位的肿瘤治疗；或者，通过滚轮微针给药，用于白癜风、银肩病、瘢痕的治疗；或者，将所述冻干粉制成胶囊或通过气雾给药，用于肠道和肺部肿瘤的治疗；或者，通过鼻吸入给药，用于鼻咽癌、扁桃体癌的治疗。本专利技术的第三个目的是提供上述任意一种方法制备得到的载药粒子在制备治疗酸性组织部位癌症药物中的应用。优选地，所述癌症为皮肤癌、鼻咽癌、扁桃腺癌、食管癌，乳腺癌、淋巴癌、黑色素瘤、肺癌、肠道癌、胃癌、阴道肿瘤、银肩病、瘢痕中的一种或多种。【附图说明】图1为实施例3制备得到的载药纳米粒子冻干粉在pH9的PBS缓冲液中激光粒度分布仪所测粒径。图2为实施例1低抗凝血性低分子肝素iNMR图谱。图3为实施例2低抗凝血性肝素修饰物的iNMR图谱。【具体实施方式】以下实施例用于说明本专利技术，但不用来限制本专利技术的范围。实施例1低抗凝血性肝素的制备将肝素钠20g (分子量1.2?2.8道尔顿)溶于175ml去离子水，用IN HC1将溶液pH调整为5，加入高碘酸钠(Na104) 15g，用去离子水将溶液调整为500ml，用IN HC1调整溶液pH至5。于4°C反应24h。在去离子水中透析，得透析液1.5L，加1N NaOH水溶液32ml，室温下于暗处反应3h。然后加硼氢化钠(NaBH4) lg，于室温下反应4h后，将溶液中和至pH为7.0。加2.54L乙醇，静置3h，析出沉淀，用乙醇重新精制，对析出的固体进行减压干燥，得低抗凝血当前第1页1 2 本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种pH敏感型载药粒子的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括如下步骤：(1)制备低抗凝血性肝素修饰物；(2)制备载药粒子：将喜树碱或喜树碱衍生物与低抗凝血性肝素修饰物在碱性条件下进行超声处理，得混合溶液；将所述混合溶液微孔过滤，冷冻干燥，即得所述载药粒子。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：梁颖，
申请(专利权)人：蚌埠医学院，
类型：发明
国别省市：安徽;34