人血清白蛋白‑药物复合物及其合成方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种人血清白蛋白‑药物复合物及其合成方法和应用。所述的人血清白蛋白‑药物复合物是以人血清白蛋白为载体，在人血清白蛋白IB子域中酪氨酸161和组氨酸146两个位点上共同结合5氟尿嘧啶，在人血清白蛋白的II A子域中组氨酸242位点上结合有铜(II)金属配合物，在人血清白蛋白的半胱氨酸34位点上通过交联剂结合有富G寡核苷酸。申请人对所得复合物进行体内抗肿瘤活性研究，结果表明，以白蛋白为基础的多药物递送系统较单独的三种药物提高了靶向性以及治疗效果，且毒性更低。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及医药
，具体涉及三种药物与人血清白蛋白的复合物及其合成 方法及其合成方法和应用。
技术介绍
癌症是涉及多种途径的复杂疾病，其特点是一条线上的细胞连续突变致使病情恶 化。此外，由于化疗过程导致肿瘤细胞基因突变使得其存活率增高，肿瘤也面临着化疗剂内 源性和获得性抗性的挑战。显然，通过单一药物抑制的方法不足以达到使肿瘤衰退的目的。 因此，多靶向联合治疗正在成为癌症治疗越来越重要的策略，通过多重药物调剂疾病细胞 不同的信号通路，最大限度的克服阻力提高治疗效果。 事实上，有非常多的证据显示，多种药物组合比单独用药对肿瘤的治疗更加有效。 目前，已有超过9500种不同的联合治疗癌症临床试验。例如，紫杉醇与5-氟尿嘧啶（5FU) 的联合用药已被用于治疗胃癌、乳腺癌、胰腺癌等多种类型的癌症。尽管组合药物的使用似 乎是非常有希望的癌症疗法，但其研发方面仍然存在着很大的挑战，就是如何统筹好生物 利用度、药动力学以及细胞吸收结合的治疗效果等诸多问题。比如，药物通常会被血液循环 系统中的巨噬细胞以及其他分子成分所结合从而被清除出整个循环系统。将具有体外协同 作用的联合药物注入到血液中，其分布与消除都是相对独立的。不同的药代动力学性质使 得相同的肿瘤细胞中两种药物的摩尔比不可控制。这些障碍都限制了联合治疗的在临床方 面的治疗效果。为了克服这一难题，人们尝试利用单一的药物载体同时结合多个治疗药物 从而同时递送至作用部位达到同时治疗的效果。比如我们已知的纳米颗粒递送系统，通过 增强渗透性和保留效应有效的将多种药物传递至肿瘤位点，从而提高肿瘤中药物的浓度。 然而不幸的是，由于多种药物可能存在化学不相容性或者它们的组合会影响到载体的稳定 性，从而导致这种共输送的单载体多种药物组合方式不可行。为此，我们提出通过调节多种 药物在单载体中的空间分布从而避免它们相互之间的干扰。 目前还未见有以人血清白蛋白（HSA)为载体，同时输送5-氟尿嘧啶、富G寡核苷 酸（AS1411)以及铜配合物的复合物的相关报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种人血清白蛋白-药物复合物及其合成方法 和应用。 本专利技术所述的人血清白蛋白-药物复合物，是以人血清白蛋白为载体，在人血清 白蛋白IB子域中酪氨酸161和组氨酸146两个位点上共同结合5氟尿嘧啶（即酪氨酸161 和组氨酸146两个位点上共同结合一个5氟尿嘧啶分子），在人血清白蛋白的IIA子域中 组氨酸242位点上结合有铜（II)金属配合物，该铜（II)金属配合物具有如下式（I)所示 结构，在人血清白蛋白的半胱氨酸34位点上通过交联剂结合有富G寡核苷酸； 上述人血清白蛋白-药物复合物的合成方法为：取如下式（I)所示结构的铜（II) 金属配合物（简写为BpT)、5_氟尿嘧啶以及人血清白蛋白进行孵育，孵育所得混合物进行 浓缩、洗涤，然后通过交联剂接上富G寡核苷酸即得； 上述合成方法中，所述的交联剂通常为N-琥珀酰亚胺基-4- (4-马来酰亚胺苯基） 丁酸盐（SMPB)。 更为具体的人血清白蛋白-药物复合物的合成方法包括以下步骤： 1)取式⑴所示结构的铜（II)金属配合物、5-氟尿嘧啶以及人血清白蛋白进行 孵育，孵育所得混合物进行浓缩、洗涤，得到HSA-5FU-BpT复合物； 2)取富G寡核苷酸溶解于PBS缓冲液，加入过量的交联剂，反应，所得产物滴 加到HSA-5FU-BpT复合物中，在保护气氛下孵育，孵育所得混合物进行浓缩、洗涤，得到 HSA-5FU-BpT-AS1411 复合物。 上述合成方法的步骤1)和2)中涉及的孵育操作与现有技术相同。 上述合成方法的步骤2)中，交联剂的加入量通常为富G寡核苷酸物质的量的2~ 10倍，加入交联剂后的反应在低于40°C的条件下进行，当反应在20~30°C的室温条件下进 行时，反应的时间通常为20~60min。反应完成后，未反应的N-琥珀酰亚胺基-4-(4-马来 酰亚胺苯基）丁酸盐可使用凝胶层析过滤除去。所述的保护气氛通常为氮气等惰性气体。 在完成富G寡核苷酸与HSA-5FU-BpT复合物的孵育后，可以采用凝胶层析过滤除去未缀合 到HSA-5FU-BpT复合物中的富G寡核苷酸。 本专利技术还提供上述人血清白蛋白-药物复合物在制备抗肿瘤药物中的应用。 本专利技术还包括以上述权利要求1所述人血清白蛋白-药物复合物为活性成分制备 的抗肿瘤药物。 同时本专利技术还提供一种以2-苯甲酰基吡啶缩氨基硫脲为配体的铜（II)金属配合 物或其药学上可接受的盐，其与人血清白蛋白-药物复合物中提及的铜（II)金属配合物具 有相同的结构，即具有如下式（I)所示结构： 上述铜（II)金属配合物的合成方法，包括以下步骤： a)取2-苯甲酰基吡啶和氨基硫脲，以醇类物质作为溶剂，进行反应，有沉淀生成， 收集沉淀，洗涤，得到配体2-苯甲酰基吡啶缩氨基硫脲； b)取配体2-苯甲酰基吡啶缩氨基硫脲和CuBr2，以醇类物质作为溶剂，进行反应， 反应物静置、析晶，收集晶体，即得到目标产物。 上述铜（II)金属配合物的合成方法中，所述的醇类物质优选为甲醇和/或乙醇， 其中，甲醇优选采用体积浓度为2〇~80%的甲醇，乙醇优选采用体积浓度为20~80%的 乙醇；当醇类物质的选择为甲醇和乙醇的组合时，甲醇和乙醇之间的配比可以为任意配比。 上述铜（II)金属配合物的合成方法中，所述的反应优选是在20°C至溶剂（即醇 类物质）的回流温度范围内反应。反应采用的方式可以为常温条件下反应、常规的加热反 应或回流反应，优选采用回流反应。反应进一步优选是在50°C至溶剂的回流温度范围内进 行，更优选是在60°C至溶剂（即醇类物质）的回流温度范围内进行。反应是否完全可以可 采用薄层层析（TLC)跟踪检测。在步骤a)中，当反应50°C至溶剂的回流温度范围内进行 时，通常是控制反应时间为12~24h。在步骤b)中，当反应50°C至溶剂的回流温度范围内 进行时，通常是控制反应时间为1~2h。 上述铜（II)金属配合物的合成方法的步骤a)中，收集得到的沉淀通常采用甲醇、 乙醇、乙醚和水中的一种或两种以上洗涤。本步骤中，2-苯甲酰基吡啶和氨基硫脲的物质的 量之比为化学计量比，通常为1 :1。所述溶剂的用量以能溶解参加反应的原料为宜，通常情 况下，lmmol的2-苯甲酰基P比啶或氨基硫脲用4~10mL的溶剂来溶解。在具体的溶解步骤 中，可将2-苯甲酰基吡啶和氨基硫脲分别用溶剂溶解，再混合在一起反应；也可将2-苯甲 酰基吡啶或氨基硫脲混合后再加溶剂。 上述铜（II)金属配合物的合成方法的步骤b)中，优选是将反应所得的反应物先 过滤，收集滤液，再将滤液进行静置、析晶。本步骤中，优选是在较低的温度条件下进行静 置，通常选择在0~8°C条件下进行静置析晶。进一步地，在静置析晶时，在盛装滤液的容器 开口上罩上一层薄膜，然后在薄膜上开设若干个小孔使溶剂缓慢挥发，以获得更好的析晶 效果。本步骤中，配体2-苯甲酰基吡啶缩氨基硫脲和CuBr2的物质的量之比为化学计量比， 通常为1 :1。所述溶剂的用量以能溶解参加反应的原料为宜，通常情况下，以1_〇1的配体 2-苯甲酰基吡啶缩氨基硫脲为基准计算，溶剂的用量为4~10mL。在具体的溶解本文档来自技高网...

【技术保护点】
人血清白蛋白‑药物复合物，其特征在于：该复合物是以人血清白蛋白为载体，在人血清白蛋白IB子域中酪氨酸161和组氨酸146两个位点上共同结合5氟尿嘧啶，在人血清白蛋白的II A子域中组氨酸242位点上结合有铜(II)金属配合物，该铜(II)金属配合物具有如下式(I)所示结构，在人血清白蛋白的半胱氨酸34位点上通过交联剂结合有富G寡核苷酸；

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨峰，张振雷，齐金旭，苟峄，张耀，王俊，
申请(专利权)人：广西师范大学，
类型：发明
国别省市：广西;45