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徐丽专利技术
徐丽共有177项专利
一种用凝胶电泳法鉴定质粒的酶切片段的方法技术
本发明公开了一种用凝胶电泳法鉴定质粒的酶切片段的方法。步骤如下:首先将干燥的电泳凝胶床两端固定,水平放置;在50ml的缓冲液中加入0.1-0.5g琼脂糖,摇匀,在微波炉内将琼脂糖溶液以最短时完全溶解,冷却后加EB,直至浓度为0.5ig/...
一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法技术
本发明公开了一种对shRNA干扰片段进行筛选的方法,其特征在于,步骤如下:首先建立能够稳定表达PERV的细胞模型;然后对细胞进行培养,shRNA表达载体转染细胞,并进行荧光观察;用荧光定量进行检测。在对PERV进行培养的时候,需要及时吸...
重组载体的双酶切鉴定方法技术
本发明公开了重组载体的双酶切鉴定方法。首先挑选单菌落,使其分别接种于平板上;振荡后36摄氏度培养过夜;将过夜后的菌液做质粒提取;反复提取2次;酶切鉴定:在试管中加入12ulddH2O;35摄氏度条件下反应2-2.5小时;琼脂电泳观察结果...
对转染质粒进行制备的方法技术
本发明公开了对转染质粒进行制备的方法。步骤如下:首先对受体菌进行培养,使其在37摄氏度的环境下振荡培养1-2小时;然后制备感受态细胞,弃上清,悬浮细胞放置冰箱中保存备用;将摇匀后的感受态细胞悬液进行转化,其后在35摄氏度的环境下正面朝上...
一种对大肠杆菌进行转化的方法技术
本发明公开了一种对大肠杆菌进行转化的方法。步骤如下:首先去需要进行转化的大肠杆菌的感受态细胞,其之前需要冷藏在温度不高于零下70度的冰箱中,且时间不少于24小时;去除后将其在冰上融化;然后将DNA连接物加入细胞中,混合均匀后放置在温度为...
一种对蛋白质载体进行转化及鉴定的方法技术
本发明公开了一种对蛋白质载体进行转化及鉴定的方法。首先,在干净的试管中加入所需要转化鉴定的DNA片段;然后在17摄氏度的环境下连接过夜;去23ul连接过夜的载体溶液在此处转化;挑选无突变的言行的克隆白色菌落过夜培养;将过夜培养后的菌落作...
一种对载体进行连接转化的方法技术
本发明公开了一种对载体进行连接转化的方法。首先在干净的离心试管中放入需要连接转化的PCR片段,同时加入1.0ulLigase;然后在17-18摄氏度条件下连接过夜;随后去3ul用于大肠杆菌的转化;观察结果;离心试管中加入700ul漂洗液...
构建干扰载体的方法技术
本发明公开了构建干扰载体的方法。步骤如下:首先干扰片段寡脱氧核苷酸,即将目标干扰片段脱氧核苷酸使用无菌的双蒸水稀释,直至其浓度达到1ug/ul,其后分别取相应的片段溶液进行退火,形成双链;将载体进行双酶切,首先制备大肠杆菌,然后将载体转...
毕赤酵母配置过程中抽提质粒DNA溶液的调配方法组成比例
本发明公开了毕赤酵母配置过程中抽提质粒DNA溶液的调配方法。步骤如下:首先将柠檬酸钠室温下进行过滤;加入琼脂糖凝胶电缓冲液后浓缩;将70ml的甘油和3倍的纯净水混合均匀后,在高压下进行灭菌处理;其后再过滤除菌;最后加入3%的琼脂粉,随后...
一种细胞总RNA的提取方法技术
本发明公开了一种细胞总RNA的提取方法。步骤如下:首先收集所需要的细胞,并加入保质液;然后加入200ul的氯仿,震荡摇匀后放置6-8分钟;用高速离心机,11000rpm,室温离心10分钟;分离提纯;再用台式离心机,室温离心5分钟;分离提...
一种获得PCR扩增片段的方法技术
本发明公开了一种获得PCR扩增片段的方法。步骤如下:首先将对象PCR加入模版DNA2ul,以及ddH2O36.5ul,并将混合物摇匀;待其混合均匀后放置86摄氏度的环境下进行变性,时间1-6分钟;再将混合物放置下列环境下:90-95摄氏...
一种质粒的提取方法技术
本发明公开了一种质粒的提取方法。步骤如下:首先挑取平板上的菌落,在10-15mlLB条件下接种,随后经过35摄氏度振荡培养过夜;第二步,吸取3毫升过夜培养的菌液,6000rpm离心27秒,丢弃上清,收集菌落;第三步,使用200ul的溶液...
大肠杆菌细胞的制备方法技术
本发明公开了大肠杆菌细胞的制备方法。步骤如下:首选挑选合适的细胞菌落,然后将DH5平板划线,在35摄氏度环境下过夜;其后将菌落接种于菌液中,并导入离心管中;随后在35摄氏度的培养箱中过夜;加入10%琼脂;250rpm摇床过夜;加入100...
毕赤酵母的培养基制备方法技术
本发明公开了毕赤酵母的培养基制备方法。步骤如下:首先在平板中加入3-5%的琼脂粉,随后在115-130摄氏度条件下进行高温灭菌至少15分钟;再加入100克葡萄糖,灭菌15分钟或者过滤除菌;在3-4摄氏度条件下静置24小时候提纯;再取适量...
毕赤酵母配置过程中母液的调配方法组成比例
本发明公开了毕赤酵母配置过程中母液的调配方法。步骤如下:首先将酵母基础氮源培养基在3摄氏度的条件下进行保存;24小时后将其溶于三倍比例的纯净水中,过滤除菌;然后将其比例为其二分之一的生物素溶于其中,再次过滤除菌;在5摄氏度的条件下进行保...
一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法技术
本发明公开了一种制备内源性逆转录病毒多克隆抗体的方法。步骤如下:首先将PCR扩增P15E基因与GEX-4T-1载体混合,其后进行T载体连接测序以及构件GST重组载体;所述重组载体后将其转化BL-21DE3宿主菌;其后进行IPTG的诱导表...
一种纯化、筛选优化蛋白的方法技术
本发明公开了一种纯化、筛选优化蛋白的方法。首先诱导表达菌体破碎;然后将包涵体分离、洗涤、制备;第三步是将包涵体进行溶解;尿素梯度透析复性法对包涵体复性;重组蛋白偷袭;最后将重组蛋白冷冻干燥保存。所述诱导表达的过程,在水浴中超声破菌,间隔...
宫腔镜下手术用电切刀制造技术
宫腔镜下手术用电切刀,属于医疗用具技术领域。本实用新型的技术方案是:包括支撑杆,其特征是在支撑杆的前端设有电切铲,支撑杆的后端设有电机,电机的后端设有电源线。本实用新型结构简单,医务人员在给病人进行较大子宫肌瘤、子宫内膜息肉及子宫纵隔切...
宫腔镜宫颈防漏器制造技术
宫腔镜宫颈防漏器,属于医疗用具技术领域。本实用新型的技术方案是:包括内腔管,其特征是在内腔管的外侧设有水囊,水囊的后端设有导水管,导水管的后端设有橡皮防漏塞,内腔管的后端设有手柄。本实用新型结构简单,医务人员在给病人进行宫腔镜操作时膨宫...
腹腔镜手术套管制造技术
腹腔镜手术套管,属于医疗用具技术领域。本实用新型的技术方案是:包括垂直套管,其特征是在垂直套管下端设有定位翼,垂直套管上设有滑行套,滑行套上设有支臂,支臂前端设有保护罩。本实用新型结构简单,能够避免腹腔镜套管脱出体外,且能够保护创口,减...
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